脱氧雪腐镰刀菌烯醇抑制体外培养人外周血单个核细胞低分子量蛋白酶体-2表达

探讨脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON)对人外周血单个核细胞参与抗原呈递的低分子量蛋白酶体-2(LMP-2)表达的影响。采用流式细胞术(FCM)和半定量RT-PCR方法从蛋白质和mRNA水平分析了不同剂量DON对体外培养人外周血单个核细胞LMP-2分子表达的影响及其量效关系。FCM定量检测结果表明,不同浓度DON处理均可一定程度抑制人外周血单个核细胞LMP-2的表达,50ng/mlDON组、100ng/mlDON组、1000ng/mlDON组和2000ng/mlDON组LMP-2平均荧光强度分别为6.99±0.72、6.21±0.55、5.34±0.56和5.03±0.43,在50～2000ng/mL范围内随着DON浓度增加,外周血单个核细胞LMP-2表达降低,与DON浓度呈显著负相关(r=0.824,P<0.01)。半定量RT-PCR结果显示,不同浓度DON处理均可抑制人外周血单个核细胞LMP-2mRNA表达。DON在蛋白质和mRNA水平可剂量依赖地抑制体外培养的人外周血单个核细胞LMP-2的表达。

晶状体囊外摘出术中低分子量肝素前房灌注对房水bFGF和TGF-β2含量的影响及意义

目的观察房水碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)和活性转化生长因子-β2(transforming growth factor-β2,TGF-β2)含量的变化,探讨低分子量肝素(low molecular weight heparin,LMWH)前房灌注对后发性白内障形成的影响机制。方法选取84只兔84眼随机平均分为模型组和实验组(每组各42眼),行单眼透明晶状体囊外摘出术。实验组术中单次应用50000 IU·L-1 LMWH进行前房灌注。分别于术后1d、3d、6d、15d、30d、45d、60d每组各取6只兔6眼,分别测定房水bFGF和活性TGF-β2含量;同时于术后1d、30d、45d、60d分别称取晶状体囊袋湿质量。另选取3只兔6眼作为正常对照组,测定房水bFGF和TGF-β2含量的基线水平。结果晶状体囊外摘出术后模型组和实验组囊袋湿质量均逐渐增加,但LMWH促进了湿质量增加速度,至术后60d时实验组囊袋湿质量为(123.66±17.83)mg,高于模型组的(97.25±15.99)mg(P<0.05)。模型组术后房水bFGF浓度增加了8～15倍,而实验组仅增加了3倍。模型组房水活性TGF-β2浓度在术后30d开始高于基线值(P<0.05),而实验组活性TGF-β2浓度始终与基线值无统计学差异(P>0.05)。模型组术后房水bFGF和活性TGF-β2的含量分别于术后30d和45d恢复至基线水平,而实验组则分别于术后3d和1d恢复至基线水平。结论晶状体囊外摘出术中单次应用实验剂量的LMWH促进后发性白内障形成,可显著抑制术后房水中bFGF和活性TGF-β2表达强度和持续时间。推测房水中这2种细胞因子的含量变化共同参与了后发性白内障的形成。

蛋白酶体亚基LMP-2、Survivin、Caspase-3在稽留流产绒毛及蜕膜组织中的表达

目的:检测稽留流产绒毛及蜕膜组织中蛋白酶体亚基低分子质量多肽-2(proteasome subunit low molecu-lar weight polypeptide 2,LMP-2)、半胱氨酸蛋白酶-3(cysteine-containing aspartate specific protease 3,Caspase-3)、生存素(Survivin)的表达,旨在探讨稽留流产的发病机制。方法:采用免疫组织化学染色方法检测30例稽留流产(实验组)患者绒毛及蜕膜组织中LMP-2、Caspase-3、Survivin的表达,并以30例正常早孕人工流产绒毛及蜕膜组织为对照组。结果:稽留流产组绒毛及蜕膜中LMP-2、Survivin的表达均低于正常早孕组,Caspase-3的表达则高于正常早孕组,差异均有统计学意义(P<0.05)。实验组的绒毛及蜕膜Caspase-3与LMP-2及Survivin的表达均呈负相关,LMP-2与Survivin的表达呈正相关(P<0.05)。结论:LMP-2、Survivin及Caspase-3的异常表达在稽留流产的发生中起重要作用。

6-KPGF1α、TXB2在硫酸镁联合低分子肝素治疗子痫前期中的作用和意义

目的研究6-酮-前列腺素F1α(6-k-PGF1α)、血栓素B2(TXB2)在硫酸镁联合低分子肝素治疗子痫前期中的作用和意义。方法选取该院2015年5月至2017年5月收治的子痫前期孕妇60例作为观察组,给予患者硫酸镁联合低分子肝素治疗2个疗程;另选取健康孕妇60例作为对照组。观察子痫前期孕妇临床治疗疗效;收集两组孕妇血清并采用酶联免疫吸附试验法检测其血清中TXB2和6-k-PGF1α的表达;检测子痫前期孕妇治疗后血压、凝血功能、肾功能变化,并与对照组进行比较。结果与对照组比较,观察组治疗前血压(收缩压、舒张压)和肾功能指标尿素氮、24h尿蛋白显著升高,血小板计数(PLT)、血D-二聚体(DD)水平和凝血酶原时间(PT)显著升高,TXB2显著降低,6-k-PGF1α水平显著升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。轻度PE、晚发重度PE孕妇血中sCD40L和sFlt-1水平与早发重度PE呈显著正性相关关系,sVEGFR2和PLGF水平与早发重度PE呈显著负相关关系(P<0.05)。与治疗前比较,观察组应用硫酸镁联合低分子肝素治疗后,收缩压、舒张压、尿素氮和24h尿蛋白及PLT、血DD、PT均显著降低,TXB2显著升高,6-k-PGF1α显著降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论子痫前期孕妇应用硫酸镁联合低分子肝素治疗后疗效显著,6-kPGF1α、TXB2可以作为子痫前期预后良好的临床预测因子。

低分子肝素对COPD模型大鼠MCP-1及CCR2表达的影响

目的:探讨低分子肝素对慢性阻塞性肺疾病大鼠肺组织中MCP-1及CCR2表达的影响。方法:采用气道内滴入脂多糖及连续被动熏烟法建立大鼠COPD模型,干预组皮下注射低分子肝素进行干预。观察各组大鼠肺组织病理变化,分别采用ELISA及免疫组化法测定支气管肺组织MCP-1及CCR2的表达检测分析。结果:吸烟大鼠的肺组织气道上皮细胞纤毛脱落,肺泡结构紊乱、肺泡腔扩大,部分融合形成肺大泡。模型组大鼠肺组织中MCP-1及CCR2的表达均显著高于对照组,而低分子肝素干预组的表达较模型组显著降低(P<0.05)。结论:在慢性阻塞性肺疾病的气道炎症及气道重塑中MCP-1及其受体的高表达可能具有作用,低分子肝素可能通过抑制MCP-1及其受体的过度表达而减轻气道炎症及气道重塑的作用。

低分子量蛋白尿——Dent病

近年来随着医学飞速的发展，低分子量蛋白尿逐渐受到人们的重视，所谓低分子量蛋白是指由尿中排出的分子质量小于40000d的蛋白质，可通过正常肾小球基底膜或由肾单位分泌漏人尿中，包括尿β2-微球蛋白、α1-微球蛋白、溶菌酶、视黄醇结合蛋白及多肽类激素如甲状旁腺素、胰岛素等。正常情况下，

低分子量肝素抑制JAK2/STAT3信号通路缓解高糖诱导的足细胞损伤

目的 探究低分子量肝素(LMH)对高糖环境诱导的人肾小球足细胞(HGPC)功能的调节作用及Janus激酶2(JAK2)/信号转导与转录激活因子3(STAT3)信号通路变化的机制。方法 体外培养HGPC,以30 mmol/L D-葡萄糖诱导细胞建立体外足细胞损伤模型,并分别以1、5、10、15、20μmol/LLMH进行干预,细胞计数试剂盒-8筛选出最佳的药物浓度进行后续研究。将细胞分为对照组、HG组、20μmol/LLMH组、JAK2/STAT3通路抑制剂(AG490)组、20μmol/LLMH+AG490组、20μmol/LLMH+JAK2/STAT3通路激活剂(C-A1)组。5-乙炔基-2'-脱氧尿苷(EDU)法检测细胞增殖能力;Transwell小室法检测迁移和侵袭能力;蛋白免疫印迹法检测HGPC细胞中JAK2、磷酸化(p)-JAK2、STAT3、p-STAT3、波形蛋白(Vimentin)、纤连蛋白(FN)、神经型钙黏蛋白(N-cadherin)、上皮型钙黏蛋白(E-cad-herin)的蛋白表达水平。结果 20μmol/LLMH为干预细胞活力的最佳剂量;与对照组比较,HG组细胞增殖率和E-cad-herin蛋白表达水平降低(均P<0.001),迁移、侵袭能力和p-JAK2、p-STAT3、Vimentin、FN、N-cadherin蛋白表达水平升高(均P<0.001);与HG组相比,LMH给药后细胞增殖率和E-cadherin蛋白表达水平升高(均P<0.001),迁移、侵袭能力和p-JAK2、p-STAT3、Vimentin、FN、N-cadherin蛋白表达水平降低(均P<0.001);与20μmol/L LMH组相比,AG490与LMH合用可以显著增加LMH的作用效果(均P<0.05),而C-A1与LMH合用可以显著减弱LMH的作用效果(均P<0.05)。结论 LMH可通过抑制JAK2/STAT3信号通路蛋白的磷酸化抑制HGPC迁移、侵袭及上皮-间充质转化。

蒙药黑苏嘎-25促进神经元骨架蛋白表达提高神经递质含量改善阿尔茨海默病小鼠症状

目的探讨蒙药黑苏嘎-25治疗阿尔茨海默(AD)小鼠的效果及机制。方法6月龄快速老化模型SAMP8小鼠分为模型组、[360 mg/(kg·d)]黑苏嘎-25处理组、[90 mg/(kg·d)]黑苏嘎-25处理组、多奈哌齐对照组[0.92 mg/(kg·d)],每组15只,另选择15只6月龄正常衰老SAMR1小鼠作为空白对照组。模型组和空白对照组小鼠常规喂养,生理盐水灌胃,其他给药组按照给药剂量灌胃,所有组灌胃均每天1次,共15 d。给药完成后第1天~第5天,各组取3只小鼠采用Morris水迷宫试验检测各组小鼠逃避潜伏期,穿越平台次数和停留时间。尼氏染色观察尼氏体数量,免疫组织化学染色法检测微管相关蛋白2(MAP-2)、低分子量神经丝蛋白(NF-L)表达和分布,Western blot法检测MAP-2、NF-L蛋白水平。ELISA检测小鼠脑组织(皮层、海马)中神经递质乙酰胆碱(ACh)、五羟色胺(5-HT)、去甲肾上腺素(NE)、多巴胺(DA)的含量。结果与空白对照组相比,模型组逃避潜伏期延长,穿越平台次数和停留时间减少,尼氏体减少,MAP2和NF-L蛋白表达减少;与模型组比较,黑苏嘎-25给药组逃避潜伏期缩短,穿越平台次数和停留时间增加,尼氏体数量增加,MAP-2和NF-L蛋白表达增加。[360 mg/(kg·d)]黑苏嘎-25处理对上述指标的影响更明显。与空白对照组比较,模型组海马及皮层中ACh、NE、DA及5-HT的含量明显减少,与模型组比较,低剂量组、高剂量组、多奈哌齐对照组ACh、NE、DA及5-HT含量显著增加。结论蒙药黑苏嘎-25治疗可改善AD模型小鼠学习记忆能力,保护小鼠神经功能,可能与促进神经元骨架蛋白表达并提高递质含量有关。

低分子量双端羟基聚苯醚的合成研究

通过2,6-二甲基苯酚和四甲基双酚A氧化共聚合成低分子量聚苯醚,研究了单体配比、催化剂添加比例对聚合反应的影响,对反应产物进行了红外光谱、比浓黏度、分子量、产率、热失重、差示扫描量热法(DSC)、羟值等性能的表征与测试,成功制备出了分子量范围在1500~3000具有双端羟基的聚苯醚并确定了最佳合成工艺,产率均在70%以上。结果表明,单体配比对聚苯醚产物的分子量影响最大,聚苯醚产物的分子量随着n_(DMP)∶n_(TM BPA)的增加而增加;催化剂添加比例对聚苯醚产物的热失重影响最大,热失重随着n_(Cu)∶n_(DMP)的减小而减小,当n_(Cu)∶n_(DMP)=0.004时,聚苯醚产物热失重性能最佳,为0.83%。

应用早期鼠胚体外培养对低分子量肝素治疗不孕、自然流产妇女作用机理的初步研究

目的:探讨低分子量肝素(LMWH)治疗不孕、自然流产妇女血清的作用机理。方法:在2-细胞鼠胚体外培养液中分别加入正常生育妇女血清、不孕妇女血清、自然流产妇女血清,并在此基础上加入LMWH,观察小鼠囊胚形成率。结果:加入LMWH后,能提高不孕血清组,自然流产血清组2-细胞鼠囊胚形成率(P<0.05)。结论:LMWH能提高不孕、自然流产者囊胚形成率,具有治疗作用。

低分子量多肽-2基因多态与汉族人群类风湿关节炎的相关性研究

目的 探讨低分子量多肽 2 (LMP 2 )基因多态与类风湿关节炎 (RA)的相关性。方法 用多聚酶链反应 限制性片段长度多态性 (PCR RFLP)分析技术检测 86例RA患者和 80名正常人LMP 2第三外显子基因多态性 ,同时扩增DRB1基因第二外显子以筛选DR4 阳性标本。结果 LMP 2RH杂合子及LMP 2RR纯合子频率在RA组分别显著高于和低于正常对照组 (P均 <0 0 5 ) ,LMP 2H可使DR4+ 正常人患RA的相对危险度 (RR)增加 2 99倍 (P <0 0 5 )。结论 LMP 2RH频率升高及LMP 2RR频率降低可能是RA的特征之一 ,LMP 2H可能与汉族人群RA有一定的关联。

LMP2基因多态性与云南汉族人群非小细胞肺癌的发生发展的相关性

目的:探讨云南汉族人群低相对分子量蛋白酶体(LMP)2基因单核苷酸多态性(SNP)与非小细胞肺癌的相关性。方法:选择云南汉族非小细胞肺癌患者467人(病例组)和健康正常对照490人(对照组),对病例组患者进行病例分型和临床分期,采用TaqMan探针基因分型法对所有对象进行LMP2基因的3个SNPs(rs1351383、rs17587和rs2127675)位点基因分型,用卡方检验比较病例和对照组间3个SNP等位基因和基因型的分布差异,用Haploview软件构件这3个SNP的个体单倍型,并分析两组间及不同病理类型肺癌患者与对照间的单倍型分布差异。结果:3个SNP位点的等位基因及基因型在病例组和对照组中的分布差异均无统计学意义(P>0.05),但rs1351383位点的C等位基因在鳞癌组中的频率显著高于对照组,差异具有统计学意义(P=0.049,OR=0.769,95%CI:0.591~0.999);单倍型rs1351383-rs17587-rs2127675的G-C-G在病例组中(OR=1.461,95%CI:1.075~1.984)以及肺腺癌患者组(OR=1.608,95%CI:1.142~2.265)中的分布显著高于对照组,单倍型rs1351383-rs17587-rs2127675的G-C-A在总病例组中(OR=0.593,95%CI:0.422~0.834)以及肺腺癌患者组(OR=0.541,95%CI:0.365~20.823)中的分布显著低于对照组。结论:LMP2基因的3个SNPs(rs1351383、rs17587和rs2127675)单个位点与云南汉族人群肺癌无相关性,但3个SNPs构建的单倍型可能是云南汉族人群肺癌患病的风险因子。

LMP7、TAP2基因多态性与云南汉族非小细胞肺癌的相关性

目的:探讨低相对分子量蛋白酶体7基因(LMP 7)及抗原处理相关转运体2基因(TAP 2)中的单核苷酸多态性(SNP)与云南汉族人群非小细胞肺癌的相关性。方法:选取云南汉族非小细胞肺癌患者467例作为病例组、同期健康正常人群488例作为对照组,采用Taq Man探针基因分型方法对TAP2基因的SNP位点rs241447及LMP7基因的SNP位点rs2071543进行基因分型,分析rs241447和rs2071543等位基因和基因型在病例组和对照组间的分布差异,分析这两个SNP位点在肺癌不同临床分期的中分布差异。结果:rs241447在对照组和病例组中基因型的分布频率比较,差异有统计学意义(P=0.015);在超显性遗传模式下,rs241447基因型C/C-T/T可能是云南汉族人群非小细胞肺癌的风险因素(OR=1.38,95%CI为1.07~1.78,P=0.014),rs2071543的等位基因和基因型在对照组和病例组中的分布频率比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论:TAP2基因中的SNP位点rs241447可能与云南汉族人群非小细胞肺癌的易感性相关。

β2-微球蛋白检测的临床应用

β2-微球蛋白（β2-MG）是机体产生的一种内源性低分子量血清蛋白质,广泛存在于血浆、尿液等体液中,其含量极微但相当恒定,检测血浆、尿液中β2-微球蛋白含量的变化情况,可以用于评价有关脏器功能和对某些疾病进行诊断及鉴别诊断[1,2]。本文就β2-微球蛋白检测的临床应用加以综述。

聚碳酸1,2-丙二酯的碱催化水解研究

研究了高分子量聚碳酸1,2-丙二酯的碱催化水解反应,并通过核磁共振谱仪和气相色谱质谱联用仪对降解反应产物的解析,发现碱催化聚碳酸1,2-丙二酯水解是无规断链反应和解拉链反应共同作用的结果.结果表明高分子量聚碳酸1,2-丙二酯的碱催化水解是制备低分子量聚碳酸1,2-丙二酯的方法之一.