五种HLA低分辨率基因分型试剂的对比分析

目的 比较五种 HLA低分辨率分型试剂的检测效果。方法 用五种 HLA分型试剂分别检测 7份标准品 ,分析比较各种试剂的检测结果。结果 五种分型试剂基因检出率均为 1 0 0 % ,无漏检。分辨率较好 ,均能达到低分辨率的要求。但试剂 A和 D特异性略低于其它试剂。

筛选试剂红细胞的血型基因分型方法建立和应用

目的建立重要的红细胞血型的基因分型技术用于筛选抗原谱合理的试剂红细胞。方法首先建立检测红细胞血型系统Rh CE、Kidd、MNS、Duffy、Diego、Lutheran、Colton、Lutheran和Kell等的聚合酶链式反应-序列特异性引物(PCR-SSP)分型技术;对于无法获得相关血型试剂的Diego和Colton血型系统,采用测序方法验证该技术检测血型的准确性,其他6个血型系统则用血清学方法验证该技术检测血型的准确性;最后应用该方法对82名O型固定献血者的8个血型系统做基因分型。结果血型基因PCR-SSP分型技术的结果,与血清学和测序检测结果比较,完全一致。所建立的血型基因分型技术对82名O型献血者8种红细胞血型检测,筛选出13位可能适合提供试剂红细胞的献血者。结论成功建立了分型准确、方便、经济的红细胞血型基因PCR-SSP技术,用于从大量献血者中筛选出抗原谱合理的试剂红细胞。

人类白细胞抗原基因分型检测试剂盒行业标准的修订与验证

目的对2010年发布的YY/T 1180-2010《人类白细胞抗原(HLA)基因分型试剂盒(SSP法)》进行修订并验证。方法按照拟定行业标准的要求,选择不同方法学的人类白细胞抗原(HLA)基因分型试剂盒进行验证。结果外观、参考品符合率、重复性、有效检测范围、检出限、稳定性等性能指标符合要求。结论人类白细胞抗原(HLA)基因分型试剂盒行业标准的修订及时科学合理,适用范围更加全面,有助于规范此类试剂盒的技术要求和检验方法,从而提高此类试剂盒的产品质量,并为其上市前后的监管提供依据。

新型乙型肝炎病毒基因分型检测试剂盒的临床评价

目的评价一种新型乙型肝炎病毒基因分型检测(免疫荧光法)试剂的临床性能。方法收集中国人民解放军三○二医院研究对象的血清383例,与血清对应的血浆50例。乙型肝炎病毒A基因型评价采用北京万泰生物药业股份有限公司试剂盒(荧光免疫层析法),基因序列测定为对照方法;乙型肝炎病毒B、C、D基因型评价使用北京万泰生物药业股份有限公司试剂盒(荧光免疫层析法),上海之江生物科技试剂盒(荧光定量PCR法)为对照试剂。验证试剂和对照试剂同时检测同一例标本,若结果不一致,2种方法分别进行复测,结果以复测为准,如仍不一致进行基因测序,以测序结果为准,对结果进行Kappa一致性检验,计算2种方法的检测一致率。另通过验证试剂检测对应的血浆标本,评价验证试剂对血清、血浆标本检测能力的一致性。结果 A基因型验证试剂检出15例,对照方法检出12例,2种方法的符合率为12/15。B基因型验证试剂相对对照试剂的阳性符合率为98.00%(49/50),阴性符合率为99.06%(315/318),总符合率为98.91%(364/368),Kappa值为0.954。C基因型验证试剂相对对照试剂的阳性符合率为98.78%(242/245),阴性符合率为86.99%(107/123),总符合率为94.84%(349/368),Kappa值为0.881。D基因型验证试剂相对对照试剂的阳性符合率为87.50%(7/8),阴性符合率为100.00%(360/360),总符合率为99.73%(367/368),Kappa值为0.932。验证试剂对50例对应的血清/血浆标本检测,结果均为5例乙型肝炎病毒B基因型,44例C基因型,1例未分型。结论该新型试剂盒对乙型肝炎病毒的A、B、C、D型分型效果较好,可用于感染病毒分型的临床检测。

湛江地区献血人群HIV的基因分型及ELISA单试剂阳性者追踪检测的研究

目的了解湛江市无偿献血人群中人类免疫缺陷病毒(human immunodeficiency virus,HIV)基因分型,推测湛江市HIV病毒来源,为湛江市防控艾滋病和临床用血安全提供依据。方法从23例经湛江市CDC WB法确认的HIV无偿献血者血液中提取RNA,用RT-PCR进行gag基因扩增,并对扩增产物进行测序和序列分析。对68例ELISA单试剂阳性者献血后每2周采血1次再次检测,检测呈双试剂阳性者通过WB法确认。结果 23例阳性感染者均为HIV-1,其中12例(52.2%)为CRF01_AE重组亚型;10例(43.5%)为CRF07_BC重组亚型;1例(4.3%)为01B型。68例ELISA单试剂检测阳性者中有1例8周后确认为HIV-1 CRF01_AE重组亚型,1例10周后确认为HIV-1 CRF07_BC重组亚型,35例连续追踪6个月后依然为单试剂检测阳性,31例由于多方面的原因无法追踪,最后放弃。结论湛江地区献血人群中HIV-1亚型以CRF01_AE和CRF07_BC为主。35例单试剂阳性者可能与感染了弱病毒株或其体内病毒受体或其他病毒感染相关的基因存在变异有关,需要进一步追踪研究。

ELISA单试剂抗-HCV反应性献血者的HCV基因分型及归队研究

目的研究ELISA单试剂抗-HCV反应性献血者的HCV基因分型及归队。方法选取该站2019年1月—2020年12月301名ELISA单试剂检测抗-HCV反应性献血者为研究对象,采集静脉血做血清学及PCR定性检测。PCR定性检测阳性者做HCV基因分型,阴性者做献血者归队处理。结果301名通过ELISA筛查抗-HCV献血者,男性180名,138名HCV NAT无反应,占比达到76.67%,高于女性的61.16%(74/121);HCV NAT反应占比男性为10.56%,小于女性的34.71%;HCV分型阳性数,男性为6.11%,小于女性的14.05%。PCR反应性献血者HCV基因分型阳性者HCV亚型分布分别为:HCV2a占25.00%,HCV3a占17.86%,HCV6a占14.28%,HCV1b占42.86%,结果显示:分布情况为HCV1b>HCV2a>HCV3a>HCV6a。PCR无反应性献血者6个月后再次接受血清学和NAT检测,212名中有182名再次接受检测,其中2种方法均合格的献血者有102名,将其纳入次轮归队程序。经过第二轮的归队程序后,有81名献血者回归献血者队伍,归队为26.91%(81/301)。结论临床中ELISA单试剂抗-HCV反应性献血者的HCV基因分型及归队研究具有重要意义,可筛选出部分HCV阳性者并进行屏蔽,提升献血安全性,值得广泛推广应用。

2009年中国检验医学年度评选在京揭晓 亚能HPV基因分型检测产品荣获“十大先进试剂”

本刊讯： 作为唯一可以实现早查早治的癌症，宫颈癌的预防和治疗近年引起了全社会的广泛关注。在人乳头瘤病毒（HPV）基因检测技术的研发和应用上，深圳企业已经走在全国前列。记者近日获悉，作为国内首家引入HPV分型概念并最早临床推广HPV分型产品的亚能生物技术（深圳）有限公司（以下简称亚能生物），其生产的HPV基因分型检测产品市场占有率己居国内前列。

安捷伦科技推出新型PCR试剂盒——SureDirect血液PCR试剂盒可用于扩展的基因分型和病原体检测研究

安捷伦科技公司近日推出新型SureDirect血液PCR（聚合酶链反应）试剂盒．该试剂盒拓宽了公司PCR产品线，扩展了血源性疾病的基础和临床研究者在基因分型和病原体检测方法的应用．

早期筛查宫颈癌的HPV基因分型检测试剂盒问世

广东潮州凯普生物化学有限公司研制出世界首个人乳头状瘤病毒（HPV）基因分型检测试剂盒，采用这种检测法最快在3个半小时内就可得出被检者是否感染HPV的结论。

中德生物STR荧光ZDgenetype9+1基因分型试剂盒应用结果分析

目的:确证中德生物STR荧光ZDgenetype 9+1基因分型试剂盒应用于个体基因分型的准确性和重复性。方法:应用中德生物ZDgenetype 9+1 STR荧光基因分型试剂盒扩增100例无关个体样本,建立扩增产物在ABI 310遗传分析仪上基因分型的方法,相同样本扩增结果与AmpFLSTR Identifiler基因分型结果进行比较。结果:ZDgenetype 9+1荧光基因分型试剂盒对100例无关个体血样进行复合扩增并实现了在ABI 310遗传分析仪上进行基因分型,其结果与AmpFLSTR Identifile扩增相同样本的基因分型结果吻合率为100%。结论:中德生物ZDgenetype 9+1 STR荧光基因分型试剂盒适用于法庭科学日常办案和科研使用。

美国FDA批准一种丙型肝炎病毒基因分型检测试剂

美国FDA于2013年6月20日批准雅培公司生产的一种名为Abbott RealTime HCVGenotypeⅡ的试剂,用于确定丙型肝炎患者所携带的丙型肝炎病毒（HCV）的基因分型。该试剂可以使用患者的血浆或者血清样本检测出其所携带的丙型肝炎病毒是1型、1a型、1b型、2型、3型、4型还是5型,从而方便医生采用更准确、合适的治疗方法,因为不同基因分型的丙型肝炎病毒对现有的治疗药物反应有别。据美国疾病预防控制中心的数据,丙型肝炎是美国最常见的慢性血液感染疾病之一,

国产HCV RNA分型试剂盒检测结果分析

目的分析丙型肝炎病毒(HCV)RNA分型试剂盒检测深圳市抗-HCV阳性献血者结果。方法收集2014-2015年158份深圳市抗-HCV阳性献血者血液样本,应用聚合酶链反应(PCR)-荧光探针法进行HCV RNA定量检测,病毒载量>1.0×103 IU/mL的样本经HCV RNA分型试剂盒检测HCV基因型,分析不同基因型所占比例,病毒基因型与载量之间的相关性。结果 158份抗-HCV阳性献血者PCR-荧光探针法检出HCV RNA阳性样本54例,病毒载量>1.0×103 IU/mL的45例,全部得到分型结果,HCV 1b型、2型、3型、6型分别占57.78%(26/45)、6.67%(3/45)、8.89%(4/45)、26.67%(12/45)。单因素方差分析结果显示,1b型与2型病毒载量差异有统计学意义(F=2.861,P<0.05);不同性别间HCV RNA定量检测结果及抗-HCV S/CO值结果差异有统计学意义(P<0.05);不同年龄段各基因型分布比例经Fisher精确检验,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 HCV 1b型、6型仍为深圳市无偿献血人群感染HCV的主要基因型,而HCV 2型和3型比例有所减少。

β地中海贫血的基因诊断及两种试剂比较

目的 评价基因诊断在β地中海贫血(β地贫)诊断中的作用,比较不同厂家β地贫基因诊断试剂的临床应用效 果。方法 采用两种β地贫基因诊断试剂分别对包括周围静脉血、脐血和羊水在内的300份标本分别进行基因诊断,比较两 种试剂操作的繁简性和临床诊断符合率。结果 两试剂操作步骤大致相同,均可对血液以外的样本如羊水等进行β地贫诊 断,均可检测17个突变位点,占β地贫突变发生率的99％以上;与临床诊断结果比较,阳性符合率均在99％左右,阴性符合率 均为100％,差异无显著性。结论 基因诊断对样本的适用范围较广,对β地贫有确诊和分型意义,并有利于产前诊断,具有 准确、敏感、特异、简便等优点,但对17个突变位点以外的稀少类型β地贫仍可能出现漏诊。

寡核苷酸微阵列芯片在人乳头瘤病毒基因分型检测中的应用评估

目的探讨寡核苷酸微阵列芯片技术在人乳头瘤病毒(HPV)检测中的实用价值。方法使用HPV寡核苷酸微阵列芯片试剂盒对227例宫颈拭子样本进行16种高危型(HPV-16,18,31,33,35,39,45,51,52,53,56,58,59,66,68,CP8304)和5种低危型(6,11,42,43和44)检测,所检测的样本为HC2探针捕捉法检测所得到的HPV高危型和低危型样本,用以评估该DNA微阵列试剂的性能。结果190例经HC2法检测为高危型HPV阳性以及30例被HC2法检测为低危型的样品被寡核苷酸微阵列芯片试剂盒检测出具体的高危和低危HPV型别,总共检测出13种高危型和5种低位危型HPV亚型,在高危亚型中,各型检出率分别是16型26.01%、58型20.18%、52型14.71%、68型7.59%、31型7.13%、33型6.37%、66型6.24%、18型4.05%、59型2.18%、39型1.10%、56型1.50%、45型1.40%、51型1.07%;在低危亚型中,各型检出率分别为6型45.43%、11型29.70%、42型14.11%、43型5.89%和44型5.00%。单一HPV亚型感染及2种、3种HPV亚型混合感染分别为60.46%、29.89%、9.65%。7例经HC2检测为高危型,但寡核苷酸微阵列芯片试剂盒未能检测出HPV的具体型别,寡核苷酸微阵列芯片试剂盒与HC2法高危型HPV检测结果的符合率为96.92%(220/227)。结论HPV寡核苷酸微阵列芯片试剂盒与HC2法高危型HPV检测阳性符合率高,并可以明确具体分析21种HPV型别,是一种准确、高效、经济的HPV型别检测方法,可用于HPV的常规基因型分型诊断及人群筛查。

乙型脑炎病毒核酸检测试剂国家参考品的研制

目的建立乙型脑炎病毒核酸检测试剂国家参考品,确定其质量标准。方法通过对24份病原体培养物的复核、确证,全基因组测序及基因分型,组成乙型脑炎病毒核酸检测试剂国家参考品,经多家实验室的协助标定,确定参考品的质量标准,并对参考品进行均匀性及稳定性评估。结果乙型脑炎病毒核酸检测试剂国家参考品由10份阴性、14份阳性、1份最低检出限和1份精密度样品组成。质量标准为10份阴性参考品应均检出阴性;14份阳性参考品应至少检出13份阳性;精密度考品重复检测10次,要求均为乙型脑炎病毒阳性,且其检测值的CV应不大于5.0%;最低检出限参考品要求1∶102倍稀释及以上浓度时应为乙型脑炎病毒阳性。参考品的均匀性及稳定性均符合要求。结论该参考品可用作乙型脑炎病毒核酸检测试剂的质量控制及评价。

人类粒细胞抗原系统基因测序方法的建立

目的人类粒细胞特异性抗原在不同人群中表现出高度的多态性,输注后由于个体抗原的差异,可以刺激不同的机体产生免疫反应,从而引发某些不良反应。本研究拟建立1种基于DNA扩增和测序分型(PCR sequencing-based typ-ing,PCR-SBT)的HNA-1、HNA-3到HNA-5和HNA-2a(G/C)抗原系统的基因分型技术。方法选择参与本单位献血人员的随机标本400例,采用DNA抽提试剂盒,抽提标本基因组DNA,严格按试剂说明书进行操作,参照数据库中人类HNA-1～HNA-5基因序列,采用计算机软件设计引物,并在引物5’端添加M13序列,5对引物分别扩增HNA-1～HNA-5基因序列,