^(125)I粒子持续低剂量率照射和^(60)Co γ射线高剂量率照射对H1299细胞生物学效应的比较研究

目的探讨125I粒子持续低剂量率(CLDR)内照射和60Coγ射线高剂量率(HDR)外照射对非小细胞肺癌(NSCLC)细胞株H1299的细胞生物学效应。方法 H1299细胞处于指数生长期时分别行125I粒子CLDR照射和60Coγ射线HDR照射;克隆形成实验检测细胞存活分数,流式细胞术检测细胞周期和细胞凋亡率,Western blot检测Bax、Bcl-2蛋白表达水平。结果随着照射剂量增大,125I粒子CLDR照射比60Coγ射线HDR照射抑制H1299细胞增殖效应更明显。照射剂量为4 Gy时125I粒子组H1299细胞G2/M期百分比、细胞凋亡率分别为(21.77±0.31)%、(13.79±0.50)%;同样照射剂量下,60Co照射组H1299细胞G2/M期百分比仅为(18.85±0.99)%,细胞凋亡率仅为(8.79±0.22)%(P<0.05)。125I粒子CLDR照射明显上调Bax蛋白表达,同时下调Bcl-2蛋白表达。结论 125I粒子CLDR内照射比60Coγ射线HDR外照射抑制H1299细胞增殖效应更明显。Bcl-2/Bax蛋白比失衡在125I粒子CLDR照射抗肿瘤效应中可能发挥重要作用。

低剂量^(125)I内照射A549肺癌的抑瘤效果及对survivin和NF-κB表达影响的研究

目的:观察低剂量125I持续内照射对裸鼠A549细胞肺癌的抑瘤效果和对survivin、NF-κB表达的影响,以期进一步探讨125I的抑瘤机制。方法:将25只裸鼠A549肺癌模型分为实验组(n=13)和对照组(n=12)。实验组用表观活度为5.55~7.03 MBq/粒的125I微粒子植入治疗,对照组用剂量为0的"冷粒子"进行对照实验。观察28 d,记录两组小鼠存活率、测量残存肿瘤的体积、重量并计算肿瘤体积抑制率;HE染色及survivin、NF-κB免疫组化检测,比较125I粒子对肿瘤组织的损伤情况及两组survivin和NF-κB的表达差异。结果:实验组和对照组小鼠存活率分别为84.6%和75.0%(P>0.05),平均肿瘤体积分别为(0.36±0.15)cm3和(0.42±0.12)cm3(P>0.05),肿瘤体积抑制率为14.3%。实验组见紧贴125I粒子周边变性坏死,稍远离部位及血管周围肿瘤细胞存活明显,对照组粒子周围肿瘤细胞生长良好。实验组survivin阳性表达率(76.9%)高于对照组(58.3%,P<0.05),NF-κB在两组皆有高表达(分别为92.3%和83.3%,P>0.05)。结论:低剂量125I持续内照射A549肺癌细胞的抑瘤效果不太明显,低剂量125I辐射可上调NF-κB、survivin等细胞凋亡相关蛋白的表达而可能与低剂量辐射损伤的适应性反应有关。

^(125)Ⅰ籽源持续照射对人肺癌细胞凋亡及DNA-PK蛋白表达的影响

目的:探讨^(125)Ⅰ籽源低剂量率持续照射诱导人肺癌细胞凋亡以及对DNA依赖蛋白激酶复合物(DNA-PK)表达的影响。方法:选择A549和NCI-H446两种辐射敏感性不同的人肺癌细胞株,采用9粒^(125)I籽源组成的平面照射装置进行持续照射,吸收剂量为2Gy。应用流式细胞术检测细胞凋亡和细胞周期的变化,免疫组化方法检测DNA-PKcs蛋白表达。结果:^(125)Ⅰ籽源照射2Gy后,A549和NCI-H446细胞的凋亡率分别为(11.14±1.11)%和(25.27±5.65)%,分别是对照组的5倍和8倍左右,其中NCI-H446细胞的凋亡率较A549细胞显著升高(P<0.05),显示NCI-H446细胞更敏感。两种细胞的细胞周期均出现明显的G_2/M期阻滞(P<0.05)。A549细胞自身蛋白表达显著高于NCI-H446细胞(P<0.05)。结论:^(125)Ⅰ籽源低剂量率持续照射诱导肺癌细胞凋亡的效果与DNA-PK修复基因的状态和受照射后的变化密切相关。

西妥昔单抗增加结直肠癌细胞对125I粒子持续低剂量率照射的敏感性

目的探讨在125I放射性粒子持续低剂量率照射下，西妥昔单抗对结直肠癌细胞CL187放射敏感性的影响及可能的机制。方法实验将直肠癌细胞CLl87分为空白对照组、单纯100nmol／LC225处理组、单纯125I—CLDR照射组和C225联合125I-CLDR组。克隆形成实验检测C225是否影响人结直肠癌CL187细胞对125I放射性粒子持续低剂量率照射的放射敏感性。流式细胞仪检测C225对125I—CLDR照射诱导的细胞凋亡的影响。细胞周期检测C225对细胞周期的调节。瑞氏姬姆萨染色检测有丝分裂指数。Westernblot检测细胞内Bax、Bel-2的水平。结果100nmol／LC225的放射增敏比为1．4，并能够增加125I—CLDR照射诱导的细胞凋亡（t=6．6，P〈0．05），增加Bax／Bel-2比值。与空白对照组相比，单独C225处理可使CL187细胞G1期阻滞（t=3．0，P〈0．05），单纯125I—CLDR照射组细胞也存在G，期阻滞（t=8．5，P〈0．01），两者联合时的G1期阻滞效应与125I—CLDR单独处理时相比，差异无统计学意义（t=0．8，P〉0．05）。有丝分裂指数检测结果显示，各实验组与对照组相比差异无统计学意义。结论C225可增加结直肠癌细胞CL187对125I—CLDR照射的放射敏感性，机制可能是C225增加细胞内Bax／Bcl-2比值，增加125I—CLDR诱导的细胞凋亡，与细胞周期阻滞和细胞周期检查点功能无关。

125I粒子持续低剂量率照射对人食管癌细胞系KYSE150抑制作用及其机制研究

目的 研究125I粒子持续低剂量率照射对人食管癌细胞系KYSE150的抑制作用及其机制.方法 根据不同照射方式,将KYSE150细胞分成空白对照组、高剂量率单次外照射组（SDR,1.052 Gy/min）、持续低剂量率照射组（125 I-CLDR,2.77 cGy/h）.克隆形成实验衡量KYSEI50细胞对两种照射方式的敏感性,计算125I-CLDR的相对生物学效应（RBE）.流式细胞仪分析不同照射方式对细胞凋亡和周期的影响.蛋白免疫印迹法检测不同照射方式下KYSE150细胞内γ-H2AX和Bax的蛋白表达量变化.结果 KYSE150细胞对125I-CLDR的放射敏感性高于SDR,125I-CLDR的相对生物学效应约为1.56;与SDR相比,125I-CLDR能更显著地诱导KYSE150细胞的早期和晚期凋亡（=4.07,11.08,P＜0.05）,提高G2/M期细胞比例（t=11.25,P＜0.05）;125I-CLDR组DNA损伤信号蛋白γ-H2AX和促凋亡蛋白Bax的表达水平显著升高.结论 与SDR相比,125I-CLDR对人食管癌细胞KYSE150的抑制作用更为显著,其主要机制可能是电离辐射后肿瘤细胞克隆形成能力受损,DNA损伤严重,细胞凋亡增多,而G2/M期细胞比例升高,细胞放射敏感性增强.