氧化型低密度脂蛋白对2型糖尿病合并肺结核患者的风险评估价值

目的探讨氧化型低密度脂蛋白(oxLDL)对2型糖尿病(T2DM)合并肺结核(PTB)患者的风险评估潜力。方法前瞻性纳入2022年6月至2023年6月门诊就诊的单纯高脂血症组病例60例、PTB组病例100例、T2DM组病例100例和T2DM合并PTB组病例100例,其中PTB组、T2DM组和T2DM合并PTB组再二次分组为血脂正常亚组40例和高脂血症亚组60例,共计360例为病例组;健康人群60例为对照组;入组年龄段为35~70岁。各组均采集静脉血,检测血液中的HbA1C、INS、FSG、TC、TG、HDL、LDL、ApoA I和Apo B,并采用ELISA法检测oxLDL,比较各组间的水平差异。应用多元logistic回归分析oxLDL水平与PTB和T2DM合并PTB的关联。结果T2DM高脂血症亚组的BMI、血糖、血脂和胰岛素抵抗等情况与T2DM合并PTB高脂血症亚组对比差异均无统计学意义(P>0.05);T2DM高脂血症亚组oxLDL水平高于对照组2倍以上,其血脂正常亚组的oxLDL水平显著高于对照组(P<0.05);T2DM合并PTB高脂血症亚组和单纯高脂血症组的oxLDL水平均显著高于对照组2倍以上,但与PTB高脂血症亚组相比,差异均无统计学意义(P>0.05)。相关性分析显示,T2DM高脂血症亚组和T2DM合并PTB高脂血症亚组的TG和LDL均与oxLDL呈显著正线性相关(R=0.352,P<0.05),PTB高脂血症亚组人群的CHOL和LDL均与oxLDL呈显著正线性相关(R=0.441,P<0.05);多元logistic回归分析显示oxLDL高于对照组2倍以上水平均是PTB和T2DM合并PTB的独立危险因素(均P<0.05)。结论显著升高的oxLDL水平可能是T2DM和PTB共病的危险因素,建议对oxLDL高于对照组2倍以上水平作为一个有临床意义的病理水平去进一步评估。

3种中药成分对氧化型低密度脂蛋白诱导人主动脉内皮细胞损伤的影响

目的探讨3种中药成分(姜黄素、连翘苷、白藜芦醇)对氧化型低密度脂蛋白(Ox-LDL)诱导的人主动脉内皮细胞(HAEC)损伤的影响。方法实验设空白对照组(等体积基础培养液),溶剂对照组[等体积含二甲基亚砜(DMSO)的基础培养液],Ox-LDL组(20μg/mL Ox-LDL),姜黄素①②③④组(20μg/mL Ox-LDL+2.5μmol/L、5μmol/L、10μmol/L、20μmol/L姜黄素),连翘苷①②③④组(20μg/mL Ox-LDL+10μmol/L、20μmol/L、40μmol/L、80μmol/L连翘苷),白藜芦醇①②③组(20μg/mL Ox-LDL+20μmol/L、40μmol/L、80μmol/L白藜芦醇),采用四甲基偶氮噻唑盐(MTT)法检测细胞活性,并计算细胞增殖率;采用实时荧光定量聚合酶链式反应(qPCR)法检测细胞微管相关蛋白1轻链3(LC3)和环氧合酶2(COX-2)mRNA的表达水平。结果与Ox-LDL组比较,姜黄素、白藜芦醇各剂量组,连翘苷④组细胞增殖率均显著降低(P<0.01或P<0.05);姜黄素③组、连翘苷②③④组、白藜芦醇各剂量组细胞LC3 mRNA表达水平均显著升高,COX-2 mRNA表达水平均显著降低(P<0.01或P<0.05)。结论姜黄素、连翘苷和白藜芦醇可抑制Ox-LDL诱导下HAEC的增殖,可激发受损细胞自噬,抑制炎性因子COX-2表达。

利伐沙班对氧化型低密度脂蛋白诱导的人脐静脉内皮细胞功能的影响

目的探讨利伐沙班(RIV)对氧化型低密度脂蛋白(Ox-LDL)诱导的人脐静脉内皮细胞(HUVEC)功能损伤的影响。方法根据干预措施,将实验分为空白对照组(A组,常规培养液),Ox-LDL组(B组,100μg/mL Ox-LDL的培养液),Ox-LDL+RIV125组(C1组,100μg/mL Ox-LDL和125 ng/mL RIV的培养液),Ox-LDL+RIV250组(C2组,100μg/mL Ox-LDL和250 ng/mL RIV的培养液)和Ox-LDL+RIV500组(C3组,100μg/mL Ox-LDL和500 ng/mLRIV的培养液),各组细胞均处理48 h。采用CCK-8法检测各组细胞存活率的变化,采用流式细胞术检测细胞凋亡情况,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测白细胞介素1β(IL-1β)、白细胞介素6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平,采用免疫印迹(Western blot)法检测细胞核因子-κB(NF-κB)和尿激酶型纤溶酶原激活因子受体(uPAR)蛋白表达水平。结果与B组比较,C1组、C2组、C3组细胞存活率显著升高(P<0.05),细胞凋亡率和uPAR表达水平均显著降低(P<0.05);C3组IL-1β,TNF-α,IL-6水平和p-NF-κB p65表达水平显著降低(P<0.05)。结论RIV能显著恢复细胞活力、减少细胞凋亡和由Ox-LDL引起的炎性反应,可能通过NF-κB和uPAR的调节而发挥作用。

阿尔茨海默病患者氧化型低密度脂蛋白和胆碱酯酶的水平及临床意义

目的:探究阿尔茨海默病(AD)患者氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)和胆碱酯酶(CHE)检测的临床意义。方法:选取2018年4月~2021年4月广东医科大学附属医院附属医院收治的AD患者36例作为观察组,另选取同期健康者36例作为对照组,分别检测和比较两组血清的ox-LDL和CHE水平差异,并结合患者实际病情进行对照分析。结果:观察组的ox-LDL高于对照组,而CHE低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);AD患者病情程度不同其检测因子含量亦不同,CHE呈下降趋势、ox-LDL呈上升趋势。结论:ox-LDL和CHE的血清水平与AD有一定的相关性,并可对AD患者的病情程度进行预测。

氧化型低密度脂蛋白与心脑血管疾病:研究现状与展望

心脑血管疾病是当今全球面临的重大健康挑战,而氧化型低密度脂蛋白(oxLDL)作为与动脉粥样硬化和心血管疾病密切相关的生物标志物备受关注。本文综述了oxLDL与心脑血管疾病之间的关系,探讨了其形成机制、作用机制、临床意义以及未来的研究展望。

组织蛋白酶S对氧化型低密度脂蛋白诱导的人脐静脉内皮细胞损伤和内皮间质转化的影响和机制研究

目的:探究组织蛋白酶S(CTSS)对氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导的人脐静脉内皮细胞(HUVECs)凋亡、炎症和内皮间质转化(EndMT)的影响和机制。方法:将HUVECs细胞分成4组:对照组、ox-LDL组、ox-LDL+si-CTSS组、oxLDL+si-NC组。ox-LDL组加入100μg/ml ox-LDL孵育24 h,ox-LDL+si-CTSS组和ox-LDL+si-NC组先用转染试剂将CTSS siRNA或对照siRNA转染至细胞中48 h再加入100μg/ml ox-LDL孵育24 h,对照组不进行处理。CCK-8试剂盒检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡,ELISA测定实验检测细胞因子IL-1β和TNF-α表达,Western blot检测CTSS、EndMT相关蛋白(内皮细胞标志物CD31、VE-cadherin和间质细胞标志物α-SMA、Vimentin)、磷酸化p38 MAPK(p-p38)、总的p38 MAPK(t-p38)、p-Akt、Akt、pERK1/2和ERK1/2蛋白含量,显微镜观察细胞形态。此外,使用p38 MAPK激活剂茴香霉素(AM)进一步验证下调CTSS对oxLDL诱导的内皮细胞损伤的作用机制。结果:与对照组相比,ox-LDL组中CTSS表达增加,细胞活力降低,凋亡细胞数目增多,IL-1β和TNF-α含量增加,多数细胞变成纺锤样,CD31和VE-cadherin表达下调,α-SMA和Vimentin表达上调,p-p38/t-p38、pAkt/Akt和p-ERK1/2/ERK1/2增加,差异均有统计学意义(P<0.05);与ox-LDL组相比,ox-LDL+si-CTSS组中CTSS表达降低,细胞活力增加,凋亡细胞数目减少,IL-1β和TNF-α含量降低,纺锤样细胞数目减少,CD31和VE-cadherin表达上调,α-SMA和Vimentin表达下调,p-p38/t-p38、p-Akt/Akt和p-ERK1/2/ERK1/2减少,差异均有统计学意义(P<0.05)。与ox-LDL+si-CTSS组相比,ox-LDL+si-CTSS+AM组细胞活力减弱,TNF-α含量增多,CD31的表达降低,而α-SMA表达升高,差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论:下调CTSS可减弱ox-LDL诱导的内皮细胞凋亡、炎症和EndMT,这很大程度上是通过抑制p38 MAPK、Akt和ERK1/2通路的活化发挥作用的。

血清氨基末端脑钠肽前体、氧化型低密度脂蛋白水平与短暂性脑缺血发作患者发生脑梗死的关系

目的探究血清氨基末端脑钠肽前体(NT-pro-BNP)、氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)水平与TIA患者并发脑梗死(CI)的关系。方法选取2016年10月至2020年1月本院诊治的141例TIA患者为TIA组,另选取同期141名健康体检者为对照组。ELISA测定血清NT-pro-BNP、ox-LDL水平。按ABCD2评分将TIA患者分为低危组(n=48)、中危组(n=50)、高危组(n=43),比较三组血清NT-pro-BNP、ox-LDL水平;按TIA患者90 d内是否发生CI将其分为未并发CI组(n=102)和并发CI组(n=39),比较两组TIA患者一般资料及血清NT-pro-BNP、ox-LDL水平;Logistic回归分析研究TIA患者并发CI的影响因素。结果TIA组患者血清NT-pro-BNP、ox-LDL水平明显高于对照组(均P<0.05)。随着TIA疾病加重,TIA患者血清NT-pro-BNP、ox-LDL水平呈升高趋势(均P<0.05)。与未并发CI组相比,并发CI组TIA患者糖尿病史、临床症状持续时间≥60 min、高血压史的比率及血清NT-pro-BNP、ox-LDL水平均明显升高(均P<0.05)。NT-pro-BNP、ox-LDL与TIA患者并发CI相关(均P<0.05)。结论NT-pro-BNP、ox-LDL在TIA患者血清中水平较高,二者均与TIA患者病情严重程度、TIA并发CI相关,均有望成为评估TIA患者病情严重程度的指标。

川芎嗪通过miR-34a对氧化型低密度脂蛋白诱导的冠状动脉内皮细胞损伤的保护作用

目的:探讨川芎嗪是否通过miR-34a影响氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导的人冠状动脉内皮细胞(HCAECs)损伤。方法:正常培养人HCAECs,作为Con组;用50 mg/L的ox-LDL干预HCAECs,建立细胞损伤模型,作为ox-LDL组。并设立1、10、100 mmol/L组(HCAECs用1、10、100 mmol/L川芎嗪处理+ox-LDL干预),ox-LDL+anti-miR-NC组、ox-LDL+anti-miR-34a组、ox-LDL+miR-NC组、ox-LDL+miR-34a组、ox-LDL+miR-NC+100 mmol/L组、ox-LDL+miR-34a+100 mmol/L组。分别采用试剂盒、酶联免疫吸附法(ELISA)和实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测HCAECs中丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)活性、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素1β(IL-1β)水平和微小核糖核酸34a(miR-34a)表达。结果:ox-LDL组HCAECs的MDA含量、TNF-α、IL-1β水平、miR-34a表达水平比Con组显著升高,SOD活力比Con组显著降低,差异有统计学意义(P<0.05);与ox-LDL组比较,川芎嗪显著降低细胞MDA含量、TNF-α、IL-1β水平以及miR-34a表达水平,显著升高SOD活力,差异有统计学意义(P<0.05)。与ox-LDL+anti-miR-NC组比较,ox-LDL+anti-miR-34a组细胞MDA含量以及TNF-α、IL-1β水平显著降低,SOD活力显著升高,差异有统计学意义(P<0.05)。ox-LDL+miR-34a+100 mmol/L组HCAECs的MDA含量以及TNF-α、IL-1β水平显著高于ox-LDL+miR-NC+100 mmol/L组,SOD活力显著低于ox-LDL+miR-NC+100 mmol/L组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:川芎嗪通过抑制miR-34a降低ox-LDL诱导的人HCAECs炎症反应和氧化应激。

可溶性凝集素样氧化型低密度脂蛋白受体-1在急性缺血性脑卒中表达及与静脉溶栓预后和静脉溶栓后脑出血转化的关系

目的探讨可溶性凝集素样氧化型低密度脂蛋白受体-1(sLOX-1)在急性缺血性脑卒中(AIS)表达及与静脉溶栓预后和静脉溶栓后脑出血转化的关系。方法选取2017年3月至2020年6月南京市高淳人民医院AIS病人104例,酶联免疫吸附法(ELISA)法测定血清sLOX-1水平,比较sLOX-1表达高低与病人临床资料的关系,分析sLOX-1与AIS病人静脉溶栓预后和静脉溶栓后脑出血转化的关系。结果相比于低sLOX-1表达组,高sLOX-1表达组病症更加严重,美国国立卫生院卒中量表(NHISS)评分显著增大,白细胞显著升高,肾小球滤过率估算值(eGFR)、尿酸(UA)显著降低(均P<0.05);行重组组织型纤溶酶原(rt-PA)静脉溶栓治疗预后不良组sLOX-1表达显著高于预后良好组[(2.18±0.71)比(1.67±0.53)];多因素logistic回归模型结果发现经过年龄、溶栓时间、NHISS评分、eGFR等校正过后,sLOX-1[OR=3.83,95%CI:(1.77,5.12),P=0.007]仍然是行rt-PA静脉溶栓AIS病人预后的独立危险因素,经过年龄、NHISS评分、溶栓时间等校正过后,sLOX-1[OR=1.84,95%CI:(1.12,2.54),P=0.020]也仍然是AIS病人发生脑出血性转化(HT)的独立危险因素。结论血清sLOX-1是行rt-PA静脉溶栓AIS病人预后的独立危险因素,也是AIS病人发生脑HT的独立危险因素。

脂蛋白相关磷脂酶A2、可溶性凝集素样氧化型低密度脂蛋白受体-1以及氧化修饰低密度脂蛋白水平与高血压脑出血患者预后的相关性研究

目的分析脂蛋白相关磷脂酶A2(Lipoprotein-associated phospholipaseA2,Lp-PLA2)、可溶性凝集素样氧化型低密度脂蛋白受体-1(soluble lectin-like oxidized low-density lipoprotein receptor-1,sLOX-1)、氧化修饰低密度脂蛋白(oxidized low-density lipoprotein,ox-LDL)水平与高血压脑出血(hypertensive intracerebral hemorrhage,HICH)患者预后的相关性。方法回顾性分析66例HICH病例资料,患者术后均持续随访1个月,使用格拉斯哥预后评分(Glasgow outcome sacle,GOS)评估患者预后,GOS 1~3分为预后不良(n=32),GOS 4~5分为预后良好(n=34)。比较两组基线资料、Lp-PLA2、sLOX-1、ox-LDL水平和美国国立卫生研究院卒中量表(National Institute of Health stroke scale,NIHSS)评分。采用Pearson相关性分析法分析HICH患者Lp-PLA2、sLOX-1、ox-LDL水平与NIHSS评分的相关性。使用受试者工作特征曲线(Receiver operator characteristic curv,ROC)分析Lp-PLA2、sLOX-1、ox-LDL水平评估HICH患者预后的价值。结果两组HICH患者性别、年龄、发病至入院时间、高血压病程,差异无统计学意义(P>0.05),但预后不良组HICH患者出血量、Lp-PLA2、sLOX-1、ox-LDL水平与NIHSS评分均高于预后良好组(均P<0.05)。Pearson相关性分析结果显示:HICH患者Lp-PLA2、sLOX-1、ox-LDL水平与NIHSS评分均呈正相关(P<0.05)。ROC分析结果显示:Lp-PLA2、sLOX-1、ox-LDL水平在评估HICH患者预后的最佳临界值分别为157.75μg/L、362.50ng/L、54.15μg/dL,曲线下面积分别为0.793、0.900、0.793(P<0.05),敏感度分别为75.00%、87.50%、78.13%,特异度分别为82.35%、82.35%、76.47%。结论预后不良组HICH患者Lp-PLA2、sLOX-1、ox-LDL水平呈高表达,Lp-PLA2、sLOX-1、ox-LDL水平越高,神经损伤越严重,且Lp-PLA2、sLOX-1、ox-LDL水平在评估HICH患者预后中具有一定价值。

还原型谷胱甘肽联合奥曲肽治疗肝硬化并发消化道出血的疗效及对血清超氧化物歧化酶、氧化型低密度脂蛋白、丙二醛的影响

目的探讨肝硬化(liver cirrhosis,LC)并发消化道出血(upper gastrointestinal bleeding,UGB)患者应用还原型谷胱甘肽(GSH)与奥曲肽联合治疗后的临床疗效及对血清超氧化物歧化酶(SOD)、氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)、丙二醛(MDA)的影响。方法选取2019年8月至2022年8月于东营市东营区人民医院确诊的80例LC并发UGB患者,将其按随机数字表法分为观察组和对照组,各40例。对照组予以奥曲肽治疗,观察组予以GSH联合奥曲肽治疗。治疗3 d后,记录两组患者的止血效果及用药后不良反应的发生情况;检测治疗前后两组患者血清SOD、ox-LDL、MDA水平。结果观察组患者的止血时间及再出血率相比于对照组均明显降低(均P<0.05)。治疗后,两组患者不良反应总发生率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。与治疗前比较,治疗3 d后两组患者血清SOD水平升高,血清ox-LDL、MDA水平均降低,且观察组血清SOD水平高于对照组,血清ox-LDL、MDA水平低于对照组(均P<0.05)。结论LC并发UGB的患者应用GSH联合奥曲肽治疗能够提高疗效,减少止血量,降低出血风险,减轻氧化应激反应。

PLIN2在氧化型低密度脂蛋白诱导的泡沫细胞脂噬中的作用

目的 探讨围脂滴蛋白2(PLIN2)在泡沫细胞脂噬中的作用,为动脉粥样硬化相关疾病的防治提供更多思路。方法 构建氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导的泡沫细胞模型,沉默细胞内PLIN2基因表达,将细胞分为5组:对照组、空质粒组、ox-LDL处理组、siPLIN2组、ox-LDL+siPLIN2组。应用油红O染色法观察细胞内脂质蓄积情况,采用Western blot观察细胞内PLIN2和脂噬相关蛋白LC3和p62表达情况。结果 在ox-LDL诱导的泡沫细胞形成过程中LC3蛋白表达量随着脂质的增加而增加,p62则先减少后增加;在PLIN2沉默的RAW264.7巨噬细胞中LC3表达下调;在PLIN2沉默的泡沫细胞中,p62蛋白表达量明显增加,脂噬减弱。结论 在ox-LDL诱导的泡沫细胞中,敲减PLIN2可下调p62的表达,减弱细胞内脂噬。

lncRNA BDNF-AS靶向miR-375调控氧化型低密度脂蛋白诱导的动脉粥样硬化模型细胞损伤实验研究

目的探讨长链非编码RNA脑源性神经营养因子反义因子(lncRNA BDNF-AS)对氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导的动脉粥样硬化模型细胞损伤的影响及其对miR-375的靶向调控作用。方法体外培养人脐静脉内皮细胞(HUVECs),分别将lncRNA BDNF-AS小分子干扰RNA与miR-375寡核苷酸模拟物及其阴性对照、lncRNA BDNF-AS小分子干扰RNA si-lncRNA BDNF-AS与miR-375特异性寡核苷酸抑制剂阴性对照、si-lncRNA BDNF-AS与miR-375特异性寡核苷酸抑制剂转染至HUVECs,并用ox-LDL处理24 h;仅使用ox-LDL处理的细胞为ox-LDL组,正常细胞为Con组。采用qRT-PCR法检测lncRNA BDNF-AS、miR-375的表达量;利用试剂盒检测丙二醛(MDA)的含量与超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)的活性;流式细胞术检测细胞凋亡率;双荧光素酶报告实验检测lncRNA BDNF-AS、miR-375的靶向关系。结果与Con组比较,ox-LDL组lncRNA BDNF-AS的表达水平升高(t=26.180,P<0.01),miR-375的表达水平降低(t=32.413,P<0.01);ox-LDL诱导的HUVECs中MDA含量、凋亡率升高(t=27.588、26.806,P<0.01),SOD、CAT的活性降低(t=18.925、37.887,P<0.01)。转染lncRNA BDNF-AS小分子干扰RNA后,lncRNA BDNF-AS的表达水平、MDA含量、凋亡率降低(t=17.220、15.527、18.930,P<0.01),SOD、CAT的活性升高(t=12.570、17.202,P<0.01)。双荧光素酶报告实验证实lncRNA BDNF-AS可靶向结合miR-375;转染miR-375寡核苷酸模拟物可明显降低MDA的含量及凋亡率(t=11.945、20.881,P<0.01),提高SOD、CAT的活性(t=15.859、13.102,P<0.05)。共转染si-lncRNA BDNF-AS和anti-miR-375后,MDA含量、凋亡率升高(t=10.712、15.218,P<0.01),SOD、CAT的活性降低(t=7.961、10.773,P<0.01)。结论抑制lncRNA BDNF-AS表达可上调miR-375的表达而抑制ox-LDL诱导HUVECs氧化应激及细胞凋亡,从而减轻动脉粥样硬化模型细胞损伤。

长链非编码RNA alpha-2-巨球蛋白反义RNA 1靶向微小RNA-106b-5p调控氧化型低密度脂蛋白诱导的人脑微血管内皮细胞损伤

目的探讨长链非编码RNA(lncRNA)alpha-2-巨球蛋白反义RNA 1(A2M-AS1)靶向微小RNA(miR)-106b-5p对氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导的人脑微血管内皮细胞损伤的影响。方法用ox-LDL诱导人脑微血管内皮细胞设为ox-LDL组,正常培养细胞为对照(Ctrl)组;A2M-AS1过表达(pcDNA-A2M-AS1组)、空载体(pcDNA组)、miR-106b-5p抑制剂(anti-miR-106b-5p组)、阴性对照(anti-miR-NC组)、pcDNA-A2M-AS1与对照mimic NC(miR-NC组)、pcDNA-A2M-AS1与miR-106b-5p模拟物(miR-106b-5p mimics组)转染细胞后加ox-LDL处理,n=9;Real-time PCR检测A2M-AS1与miR-106b-5p表达;试剂盒检测丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化氢酶(CAT)水平;流式细胞术及TUNEL法检测细胞凋亡;双荧光素酶报告基因实验检测A2M-AS1与miR-106b-5p靶向关系;Western blotting检测Bcl-2和Bax蛋白表达量。结果与Ctrl组比较,ox-LDL组A2M-AS1表达水平、SOD和CAT活性、Bcl-2蛋白水平降低,miR-106b-5p表达水平、MDA水平、凋亡率、Bax蛋白水平升高(P<0.05);过表达A2M-AS1或干扰miR-106b-5p降低ox-LDL诱导细胞后MDA水平、凋亡率与Bax蛋白水平,升高SOD、CAT活性和Bcl-2蛋白水平(P<0.05);A2M-AS1靶向miR-106b-5p;上调miR-106b-5p逆转过表达lncRNA A2M-AS1对ox-LDL诱导的人脑微血管内皮细胞损伤的作用。结论A2M-AS1通过靶向miR-106b-5p减轻ox-LDL诱导的人脑微血管内皮细胞损伤。

CD36介导氧化型低密度脂蛋白诱导U937细胞泡沫化和凋亡

为探讨清道夫受体CD36在氧化型低密度脂蛋白诱导U937细胞泡沫化和凋亡中的作用 ,用氧化型低密度脂蛋白温育U937细胞 ,观察U937细胞泡沫化过程中CD36的表达时序和泡沫细胞的凋亡 ;用CD36单克隆抗体阻断U937细胞的吞噬作用 ,观察U937细胞吞噬蓄积胆固醇和细胞凋亡的改变。细胞胆固醇以修饰的酶荧光法测定 ;用流式细胞术检测异硫氰酸荧光素 -抗CD36单克隆抗体特异标记的CD36和细胞的凋亡情况 ;用逆转录聚合酶链反应检测CD36mRNA的表达。结果发现 ,80mg/L氧化型低密度脂蛋白与U937细胞温育 2 4h可增加细胞内总胆固醇 ,48h时可形成典型的泡沫细胞 ;CD36表达呈现时序性改变 ,6h即可检出CD36表达增高 ,2 4h达到最高值 ,48h表达略有降低 ,CD36mRNA的转录与CD36的表达一致。用 2 0 0mg/L氧化型低密度脂蛋白与U937细胞温育 2 4h可见U937细胞出现凋亡 ,48h后凋亡峰最明显 ,预先用CD36单克隆抗体阻断可使氧化型低密度脂蛋白致U937细胞凋亡明显减少。实验结果提示 ,CD36介导U937细胞吞噬蓄积氧化型低密度脂蛋白形成泡沫细胞 ,并最终出现凋亡 ;

“氧化型低密度脂蛋白—凝集素样氧化型低密度脂蛋白受体1—活性氧”信号通路参与泡沫细胞的形成(英文)

动脉粥样硬化是多因素引起的,以动脉壁内脂质的沉积甚至粥样斑块的形成为特征的慢性血管炎症性疾病。巨噬细胞内胆固醇的堆积和泡沫细胞的形成是早期动脉粥样硬化形成的标志。然而,泡沫细胞形成的确切机制尚未完全阐明。于此,我们推测氧化型低密度脂蛋白(oxidized low density lipoprotein,ox-LDL),凝集素样氧化型低密度脂蛋白受体1(lectin-like oxidized low density lipoprotein receptor-1,LOX-1)和活性氧(reactive oxygen spe-cies,ROS)组成了一个促进泡沫细胞形成的"信号通路",在泡沫细胞的形成乃至诱导动脉粥样硬化发生中起始动作用。在这一通路中,氧化型低密度脂蛋白,这种经过氧化修饰的低密度脂蛋白,是"激活子";凝集素样氧化型低密度脂蛋白受体1,作为内皮细胞上的氧化型低密度脂蛋白的主要受体是信号"转导子";活性氧,这氧化型低密度脂蛋白与凝集素样氧化型低密度脂蛋白受体1结合后的直接产物是"催化子"和"诱导剂"。

阿托伐他汀减轻氧化型低密度脂蛋白导致的人微血管内皮细胞活化和损伤

目的研究阿托伐他汀(ATV)对氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)导致人微血管内皮细胞活化和损伤的抑制作用。方法采用ox-LDL激活和损伤人微血管内皮细胞。损伤前加入ATV与内皮细胞孵育。细胞暴露于ox-LDL后,MTT法测定细胞活力,酶活性测定法检测培养上清中乳酸脱氢酶(LDH)活力,ELISA检测上清中ICAM-1含量,Western blot检测细胞质内NF-κB p65的磷酸化水平,并采用双萤光素酶报告基因检测系统测定NF-κB的核内转录活性。结果 OxLDL能导致人微血管内皮细胞的活化和损伤。ATV的干预可有效减轻ox-LDL对细胞活力的抑制、减少LDH释放、下调ICAM-1分子的表达、减弱细胞质内NF-κB p65的磷酸化、抑制NF-κB核内转录活性的上调。结论 ATV能有效减轻ox-LDL导致的人微血管内皮细胞活化和损伤,其机制可能与抑制NF-κB的磷酸化和核内转录活性有关。

泽泻汤对氧化型低密度脂蛋白诱导血管平滑肌细胞增殖的影响

目的观察泽泻汤对血管平滑肌细胞(VSMC)周期蛋白Cyclin D1、Cyclin E、增殖细胞核抗原(PCNA)和p27表达的影响,探讨泽泻汤在氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导的VSMC增殖中的作用和机制。方法通过体外50 mg/L ox-LDL诱导VSMC,建立VSMC增殖的动脉粥样硬化细胞模型;应用空白血清及20%泽泻汤含药血清干预。MTS法检测泽泻汤含药血清对VSMC增殖的影响;Western blot检测增殖相关蛋白Cyclin D1、Cyclin E、PCNA和p27表达水平。结果 50 mg/L ox-LDL可明显诱导VSMC增殖。与ox-LDL组比较,泽泻汤含药血清可显著抑制ox-LDL诱导的VSMC增殖,下调细胞Cyclin D1、Cyclin E和PCNA的表达,同时促进p27蛋白表达。结论泽泻汤具有抗VSMC增殖的作用,机制可能与上调p27蛋白和抑制Cyclin D1、Cyclin E、PCNA表达有关。

氧化型低密度脂蛋白对人脐静脉内皮祖细胞增殖、凋亡及bcl-2表达的影响

目的探讨氧化型低密度脂蛋白对人脐静脉内皮祖细胞增殖、凋亡及bcl-2表达的影响。方法密度梯度离心法获取人脐静脉血单个核细胞,培养7天后,收集贴壁细胞并加入不同浓度氧化型低密度脂蛋白(分别为5、10及20mg/L)干预48h。MTT法检测氧化型低密度脂蛋白对内皮祖细胞增殖能力的影响,流式细胞仪检测氧化型低密度脂蛋白对细胞凋亡率的影响,逆转录聚台酶链反应检测bcl-2mRNA的表达,免疫细胞化学法检测bcl-2蛋白的表达。结果氧化型低密度脂蛋白呈浓度依赖性抑制内皮祖细胞增殖,诱导内皮祖细胞凋亡(P<0.01);基础状态下内皮祖细胞表达bcl-2mRNA及蛋白,氧化型低密度脂蛋白处理能抑制其表达,并存在量效关系(P<0.05)。结论氧化型低密度脂蛋白通过下调bcl-2的表达诱导内皮祖细胞凋亡、抑制内皮祖细胞增殖,这可能影响血管内皮的修复及新生血管的形成。

植物血凝素样氧化型低密度脂蛋白受体介导氧化型低密度脂蛋白对内皮祖细胞存活和功能的影响

目的研究植物血凝素样氧化型低密度脂蛋白受体(LOX-1)是否介导氧化型低密度脂蛋白(oxLDL)对内皮祖细胞(EPC)的存活及功能产生影响。方法分选脐血CD34+细胞,培养于内皮细胞生长培养基(EGM-2)中。培养14d后,部分EPC与10、25、50μg/ml的oxLDL孵育48h;部分EPC先与LOX-1单克隆抗体(LOX-1 mAb)预处理24h,再与50μg/ml oxLDL孵育48h;对照组不作处理。检测EPC存活率及EPC迁移、黏附和管状结构形成能力,并检测LOX-1的蛋白及mRNA表达。结果oxLDL浓度为25和50μg/ml时,凋亡率分别为(15.8±1.0)%和(18.8±2.0)%,显著高于对照组的(9.0±1.2)%(P<0.05);迁移率分别为(5.7±1.0)%和(5.1±0.8)%,显著低于对照组的(9.5±0.8)%,(P<0.05);黏附细胞数分别为(33±2)和(30±3)个,显著少于对照组的(37±5)个(P<0.05);形成的管状结构分别为(2.9±0.5)和(1.8±0.5)mm,显著短于对照组的(5.0±0.6)mm(P<0.05)。OxLDL可增加LOX-1 mRNA及蛋白的表达,oxLDL浓度为50μg/ml时,LOX-1 mRNA表达由100%增加为(174±39)%,蛋白表达由100%增加为(172±8)%。OxLDL的上述作用能被LOX-1mAb所阻断。结论OxLDL可降低EPC存活,抑制EPC功能,其作用是由LOX-1介导的。