丁香不同极性部位抑制低密度脂蛋白脂质氧化修饰的研究

为研究丁香提取物对LDL中脂质氧化修饰的抑制作用,采用生物活性追踪法对该提取物抑制LDL弱氧化及完全氧化过程中共轭二烯(CD)产生、总胆固醇降解及脂褐素产生的效果进行了测定。结果表明,在LDL弱氧化过程中,丁香不同极性部位对CD产生、总胆固醇降解均有显著抑制作用(p<0.05),抑制作用强弱顺序为正己烷相>乙酸乙酯相>正丁醇相>水相。在LDL完全氧化过程中,不同极性部位对CD产生、总胆固醇降解及脂褐素产生均有显著抑制作用(p<0.05),抑制作用强弱顺序与上述相同。总多酚、总黄酮含量高低是各极性相对LDL脂质氧化修饰抑制效果产生差异的原因。本文为后续研发丁香抑制LDL氧化功能食品提供参考。

生物活性追踪法对丁香抗低密度脂蛋白氧化修饰的研究

丁香为桃金娘科植物丁香的干燥花蕾。实验室前期经筛选发现,丁香在国家公布的87种药食两用物品原料中抗氧化活性最强。为了在此基础上进一步探索丁香抗低密度脂蛋白(low density lipoprotein,LDL)氧化修饰作用,本文采用生物活性追踪及硫酸铜诱导法,对丁香抗LDL氧化修饰作用进行了研究。结果表明,反应体系中硫酸铜和LDL浓度分别采用3 mmol/L和4 mg/mL合适。丁香粗提物及其乙酸乙酯相、正丁醇相与水相三个极性部位对LDL氧化均具有相应的抑制能力。在不同极性部位中乙酸乙酯相抑制率最高(85.29±0.02)%,为有效部位。该有效部位对LDL抑制呈现良好的量效关系,且对已被氧化修饰的LDL也存在抑制能力。薄层色谱分析发现有效部位主要由8种成分组成。实验证明丁香具有很强的LDL氧化修饰抑制能力,为后续研发抗动脉粥样硬化功能食品打下了基础。

丁香有效部位对低密度脂蛋白弱氧化修饰的抑制效果

低密度脂蛋白(LDL)弱氧化修饰是形成动脉粥样硬化(AS)的关键因素。为了研究丁香有效部位(EFC)对LDL弱氧化修饰的抑制效果,采用Fe^(2+)体外诱导LDL弱氧化,通过测定脂质过氧化产物共轭二烯(CD)、硫代巴比妥酸反应物(TBARS)的产生、LDL紫外可见光谱及载脂蛋白B-100(apo B-100)中赖氨酸(Lys)游离氨基、色氨酸(Trp)活性的衰减程度反映抑制效果。结果表明,在LDL弱氧化过程中,对脂质过氧化保护方面,EFC(2.5μg/m L)能有效延缓增殖阶段CD产生,其延缓效果强于0.5μg/m L阳性对照。EFC(50μg/m L)能延缓LDL降解阶段TBARS生成,延缓效果强于10μg/m L BHT;相应质量浓度(1.25μg/m L、1.5μg/m L)的EFC能减缓LDL因为氧化而改变的紫外可见光谱。对蛋白(apo B-100)氧化保护方面,EFC(5μg/m L)能显著抑制Lys中游离氨基活性衰减(P<0.05),其抑制效果与1.25μg/m L BHT无显著性差异;EFC(1μg/m L)能保护apo B-100中Trp免受破坏。结果表明EFC能有效抑制LDL弱氧化,为后续相关功能食品研发提供了参考。

诃子粗提物及不同极性部位抑制低密度脂蛋白氧化修饰的研究

为了研究诃子抑制低密度脂蛋(Low density lipoprotein,LDL)氧化修饰活性,采用Cu2+体外诱导LDL氧化,以硫代巴比妥酸反应物(thiobarbituric acid reactive substance,TBARS)含量为指标评价氧化修饰程度。运用生物活性追踪法确定诃子抗LDL氧化修饰有效部位,并对其抗LDL氧化修饰活性进行了研究。结果表明,不同浓度诃子粗提物(0.5、0.9、2.7mg/mL)抗LDL修饰抑制率分别为64.31%、77.22%和82.66%。相同浓度(0.5mg/mL)的不同极性部位中,乙酸乙酯相抗LDL氧化修饰能力显著高于其他3个极性部位(p<0.05),为有效部位。不同浓度有效部位(0.5、0.9、2.7mg/mL)抗LDL修饰的抑制率分别达73.19%、81.85%和86.29%。有效部位能明显延长LDL氧化反应潜伏期并能延缓和降低LDL氧化修饰程度。诃子抗LDL氧化修饰与其所含的总黄酮和总多酚有关。结果显示,诃子具有很强的抗LDL氧化修饰能力,为后期开发抗LDL氧化及抗动脉粥样硬化功能食品奠定基础。

当归补血汤含药血清抗动脉粥样硬化的机理研究——一对氧化修饰低密度脂蛋白趋化单核细胞作用的影响

[目的]观察当归补血汤含药血清对氧化修饰低密度脂蛋白(oxidized low-density lipoproteins,OxLDLs)趋化单核细胞(monocytes,MC)作用的影响。[方法]新西兰兔6只,随机分为当归补血汤组、单味当归组和单味黄芪组,以相应药物灌胃3d,2次/d,第3天给药后1h心脏取血分离含药血清,并设自由趋化组(正常组)和OxLDLs组(模型组)作对照,用趋化小室微孔滤膜法检测各组OxLDLs趋化MC的数目及成像。[结果]当归补血汤组中OxLDLs趋化MC数目比模型组减少(P<0.01),而黄芪含药血清和当归含药血清组MC数目与模型组无显著性差异。[结论]当归补血汤全方可抑制OxLDLs对MC的趋化性,从而对MC向血管内皮下聚集而导致泡沫细胞的形成并进而引起的动脉粥样硬化起一定的抑制作用;而当归和黄芪单独使用未见此效应。

丹参多酚酸盐抑制低密度脂蛋白氧化修饰

低密度脂蛋白 (LDL)发生氧化生成的氧化低密度脂蛋白 (ox LDL)是致动脉粥样硬化 (AS)的主要危险因素。本文以低密度脂蛋白 (LDL)氧化修饰为模型和以硫代巴比妥酸反应物 (TBARS)生成量以及LDL氧化的相对电迁移率为指标 ,研究结果表明丹参多酚酸盐能够明显抑制CuSO4和内皮细胞 (HMEC)诱导的LDL氧化修饰 ,且有明显的浓度依赖效应 。

槲皮素、异鼠李素对Cu^(2+)介导极低密度脂蛋白氧化修饰的影响

目的 观察槲皮素 (Que)及异鼠李素 (Iso)对 Cu2 +介导的极低密度脂蛋白 (VL DL)氧化修饰的影响。方法 采用一次性密度梯度离心法分离人血浆 VL DL,用 Cu2 +进行体外氧化修饰 ,抗氧化组在温育前加入不同浓度的 Que和 Iso。分别检测脂蛋白中丙二醛 (MDA)、维生素 E(Vit E)及超氧化物歧化酶 (SOD)活性。结果 Que和 Iso可明显降低 OX- VL DL 中 MDA含量 ,延缓 OX- VL DL 中 Vit E含量的减少 ;显著提高脂蛋白中 SOD活性。结论 Que和 Iso可显著抑制 Cu2 +诱导的 VL DL 的氧化修饰 ,且二者的作用相近 ,这与其抗自由基氧化活性密切相关。

氧化、丙二醛修饰低密度脂蛋白的ELISA检测法及临床应用

目的建立血浆氧化、修饰低密度脂蛋白(LDL)ELISA检测法并进行临床研究。方法采用自制的多克隆抗体建立ELISA分别测定铜离子氧化型(Ox)和丙二醛(MDA)修饰型LDL,并对方法进行考核;对冠心病(CHD)患者、键康对照人群Ox-LDL、MDA-LDL水平进行分析。结果抗Ox-LDL与MDA-LDL几乎没有反应性;Ox-LDL和MDA-LDL测定平均批内变异(CV)分别为6.1%和6.8%,平均批间CV分别为9.7%和10.1%;Ox-LDL和MDA-LDL测定平均回收率分别为95.1%和93.7%;两法检测限均为:0.05～1.5mg/L。CHD患者较正常人血浆Ox-LDL[(178.1±73.8)mg/Lvs.(82.7±29.1)mg/L,P<0.01]、MDA-LDL[(48.7±25.6)mg/Lvs.(39.2±32.9)mg/L,P<0.05]水平均升高;Ox-LDL作为预测动脉粥样硬化发生指标的价值优于MDA-LDL。Ox-LDL、MDA-LDL分别同TC、TG、LDL-C呈正相关,而与HDL-C呈负相关。结论建立的方法特异、灵敏、准确,适于临床检测。高Ox-LDL、MDA-LDL与CHD密切相关。

恒顺香醋对人低密度脂蛋白(LDL)氧化修饰的影响

本文研究了恒顺香醋浓缩物(HV),恒顺香醋提取物(HVE)及其各不同分子量组分(HF1、HF2、HF3、HF4)对低密度脂蛋白氧化修饰(LDL)的影响,并研究了恒顺香醋浓缩物对已受到氧化修饰的LDL的影响。在加入Cu2+与LDL一起温浴前,添加HV、HVE及HVE各分离组分均能够抑制丙二醛的产生。LDL与Cu2+一起温浴2h,然后添加HV,添加组与对照组相比,丙二醛的产生量有明显差别。结果表明恒顺香醋浓缩物(HV),恒顺香醋提取物(HVE)及其各不同分子量组分(HF1、HF2、HF3、HF4)能抑制人低密度脂蛋白氧化修饰,且HV对已受到氧化修饰的LDL的氧化有一定的阻断作用。

氧化修饰低密度脂蛋白促进人单核细胞源树突状细胞的成熟及活化

目的 探讨氧化修饰低密度脂蛋白 (oxidized lowdensitylipoprotein ,oxLDL)和低密度脂蛋白 (lowdensi tylipoprotein ,LDL)对人单核细胞源的树突状细胞 (monocytederiveddendriticcells,MDCs)免疫功能的影响。 方法 采用免疫磁珠法分离人外周血CD14 + 单核细胞 ,经含rhGM CSF(10 0ng/mL)和rhIL - 4 (2 0ng/mL)的Cell gro培养 ,使其分化为MDCs。分别以PBS和LPS(5 0 0 μg/mL)作阴性和阳性 (成熟 )对照 ,观察经5 0 μg/mL的oxLDL和LDL干预 4 8h后 ,流式细胞术检测MDCs表型 (CD1a、CD4 0、CD86、HLA DR) ,混合T淋巴细胞反应检测MDCs对淋巴细胞增殖的影响 ,FITC Dextran检测MDCs吞噬功能 ,ELISA检测细胞培养上清细胞因子 (IL -12、IL - 10和TNF α)浓度。结果 与PBS相比 ,5 0 μg/mLoxLDL干预的MDCs,不但可明显上调共刺激分子CD86的高表达 ,而且反映MDCs成熟程度的CD1a也表达增强 ,与此同时经oxLDL处理的MDCs吞噬作用却明显减弱 ,进一步的混合T淋巴细胞反应显示经过oxLDL刺激的MDCs促T细胞增殖作用明显增强 (P <0 .0 5 ) ;此外 ,oxLDL可明显促进MDC分泌细胞因子TNF α、IL - 10和IL - 12 (P <0 .0 5 ) ,但明显弱于LPS组 ,而LDL无此作用。结论 oxLDL在促进DCs成熟的同时 。

冠心病患者血浆氧化修饰低密度脂蛋白与血清高密度脂蛋白及其亚组分关系的研究（摘要）

冠心病患者血浆氧化修饰低密度脂蛋白与血清高密度脂蛋白及其亚组分关系的研究（摘要）山东医科大学附属医院心内科田庆印，潘其兴，邹明瑾，夏洪印，韩辉，闫荣军氧化修饰低密度脂蛋白（ｏｘｉｄａｔｉｖｅｌｙｍｅｄｉｆｉｅｄｌｏｗｄｅｎｓｉｔｙｌｉｐｏｐｒｏｔｅｉ...

Ebselen和谷胱甘肽对低密度脂蛋白氧化修饰的抑制和终止作用

研究了人工合成的谷胱甘肽过氧化物酶（ＧＳＨＰｘ）模拟物－ｅｂｓｅｌｅｎ及其辅助因子谷胱甘肽（ＧＳＨ）对Ｃｕ２＋及紫外线（ＵＶ）诱导的低密度脂蛋白（ＬＤＬ）氧化修饰的抑制和终止作用。结果显示：在ＧＳＨ存在的情况下，低主５－μｍｏｌ／Ｌ的ｅｂｓｅｌｅｎ就可完全抑制由５μｍｏｌ／ＬＣｕ２＋引发的ＬＤＬ氧化修饰，单独的ｅｂｓｅｌｅｎ和ＧＳＨ没有抑制作用，５０μｍｏｌ／Ｌ的维生素Ｅ只有很微弱的抑制作用。Ｅｂｓｅｌｅｎ对Ｃｕ２＋引发的ＬＤＬ氧化修饰的抑制作用时间的长短与ＧＳＨ的浓度有关。对已由Ｃｕ２＋引发启动的ＬＤＬ氧化修饰，加入ｅｂｓｅｌｅｎ和ＧＳＨ可防止其进一步的氧化。Ｅｂｓｅｌｅｎ和ＧＳＨ对紫外线引起的ＬＤＬ氧化修饰也有一定的抑制作用。

糖尿病患者血浆氧化、丙二醛修饰低密度脂蛋白及其自身抗体水平

目的探讨血浆氧化及丙二醛(MDA)修饰低密度脂蛋白(LDL)及其自身抗体与糖尿病(DM)及其他血脂项目之间的关系。方法选择DM患者、正常对照组各60例。采用酶联免疫吸附试验(ELISA)分别测定铜离子氧化型LDL(ox-LDL)、MDA修饰型LDL(MDA-LDL)及其自身抗体,同时对受检者血脂水平进行检测。结果DM患者血浆ox-LDL、MDA-LDL及其自身抗体水平均明显高于对照组(P<0.01),分别与总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)呈高度正相关,而与高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)呈负相关;且ox-LDL、MDA-LDL分别同其自身抗体呈高度正相关。结论DM患者ox-LDL、MDA-LDL及其自身抗体水平显著升高,可能参与动脉粥样硬化的发生、发展过程。

氧化修饰低密度脂蛋白对巨噬细胞一氧化氮合酶基因表达的影响

氧化修饰LDL (OX LDL)可抑制脂多糖 (LPS)诱导的巨噬细胞NO释放 ,而正常 (N LDL)和乙酰化LDL (AC LDL)则没有抑制作用 .OX LDL对NO释放的抑制作用随LDL修饰程度的升高而增强 ,且具有浓度和时间效应 .狭缝杂交结果显示OX LDL处理可使LPS诱导的巨噬细胞NOSmRNA含量下降 ,提示OX

维生素E和β胡萝卜素对巨噬细胞氧化修饰低密度脂蛋白的影响

目的 : 研究维生素 E(VE)、β胡萝卜素 (βC)对巨噬细胞 (MΦ )介导的低密度脂蛋白 (LDL)氧化修饰能力的影响。方法 : 于培养成熟的 MΦ中分别加入不同剂量的 VE(40、1 0 0、2 0 0 μmol/L)和 βC(0 .5、1 .0、2 .0 μmol/L) 37℃孵育 2 4 h,通过测定培养物上清液中硫代巴比妥酸反应物 (TBARS)、荧光物质 (Lipofusin)、LDL电泳迁移率 (Rf)及共轭二烯 (Dienes)的形成 ,反映LDL的氧化修饰程度。结果 : 体外补充 VE可以显著降低培养物上清液中 TBARS、荧光物质以及共轭二烯的形成 ,明显抑制 LDL的电泳迁移率 ,随剂量增大作用加强 ;βC低剂量组 (0 .5μmol/L)可显著降低培养物上清液中 TBARS、荧光物质以及共轭二烯的形成 ,明显抑制 LDL的电泳迁移率 ,其余各组无明显影响。结论 : VE、βC均可抑制 MΦ介导 LDL氧化修饰的能力 ,并具一定的量效关系 ,提示在 MΦ氧化修饰 LDL的可调节因子中 。

氧化修饰低密度脂蛋白对血管内皮细胞氧化损伤的研究

目的 用氧化修饰低密度脂蛋白 (OX LDL)建立对血管内皮细胞的氧化损伤模型。方法 将人脐静脉内皮细胞暴露于OX LDL环境下 ,测定细胞活力及丙二醛含量。结果 当内皮细胞暴露于OX LDL不同剂量组 (10、5 0、10 0 μg ml) 2 4h后 ,其细胞活力显著降低 ,丙二醛含量增加 ,特别是OX LDL高浓度组最为明显。结论 OX LDL对内皮细胞有明显损伤作用 ,能促发动脉粥样硬化的形成。

银杏达莫对急性脑梗死病人血浆氧化修饰低密度脂蛋白水平的影响

目的:观察银杏达莫注射液对脑梗死病人血浆氧化修饰低密度脂蛋白(OX-LDL)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)水平的影响。方法:72例急性脑梗死病人分为试验组(36例,静脉滴注银杏达莫注射液20 mL·次-1,qd,连续14 d)和对照组(36例,每日静脉滴注丹香冠心注射液20 mL,连续14 d),于治疗前和治疗后14 d分别检测血浆OX-LDL,SOD,MDA的水平变化。结果:试验组病人治疗前血浆OX-LDL,SOD,MDA水平分别为(0．69±s 0．20)mg·L-1,(80±6)kU·L-1,(6．4±1．3)μmoL·L-1,治疗后分别为(0．54±0．23)mg·L-1, (107±9)kU·L-1,(4．1±1．0)μmoL·L-1,治疗前后有非常显著差异(P<0．01);对照组治疗前后血浆OX-LDL,SOD和MDA水平变化不明显(P>0．05)。治疗期间2组病人均未出现明显不良反应。结论:银杏达莫注射液具有清除自由基,降低血浆OX-LDL水平的作用。

脑梗塞患者血浆氧化修饰低密度脂蛋白水平的变化及意义

应用酶联免疫吸附（ＥＬＩＳＡ）法检测７０例脑梗塞患者和２５例健康对照者血浆氧化修饰低密度脂蛋白（ＯＸＬＤＬ）的浓度。结果显示，无论是否合并糖尿病，脑梗塞患者血浆ＯＸＬＤＬ水平均较对照组明显增高（Ｐ＜０．０１～０．００１），Ⅱ型糖尿病伴脑梗塞者的血浆ＯＸＬＤＬ水平高于无糖尿病的脑梗塞者（Ｐ＜０．０５）。提示ＯＸＬＤＬ在脑梗塞的发病过程中起重要作用，ＯＸＬＤＬ水平升高可作为脑梗塞发病在生化方面的危险因素之一。

弱氧化修饰低密度脂蛋白诱导ECV304组织因子基因表达及银杏内酯B的抑制作用

为研究弱氧化修饰低密度脂蛋白 (mmLDL)对ECV30 4组织因子 (TF)蛋白含量和mRNA水平的影响、对胞浆游离钙离子 ([Ca2 + ]i)的影响 ,以及银杏内酯B等的干预作用。采用ELISA法检测细胞内TF蛋白含量 ,用RT PCR法检测细胞内TFmRNA水平 ,用激光共聚焦显微镜观察 [Ca2 + ]i 的变化。结果显示 ,4 0mg LmmLDL作用ECV30 4 4h ,能使TF蛋白含量及mRNA水平显著增加 ,并迅速升高 [Ca2 + ]i。抗氧化剂银杏内酯B及PKC抑制剂Staurosporine可拮抗mmLDL的上述诱导反应。以上结果提示 ,mmLDL可诱导ECV30 4TF表达 ,Ca2 + 与PKC参与mmLDL诱导ECV30 4TF基因表达过程 。