Sev对低氧缺糖诱导的脑神经元细胞损伤的影响

目的 研究七氟醚(Sev)调控Toll样受体4 (TLR4)/核转录因子κB (NF-κB)信号通路抑制低氧缺糖对脑神经元细胞损伤的保护作用。方法 将大鼠皮质神经元细胞分为对照组、模型组、1.0MAC和2.0 MAC七氟醚组;细胞计数试剂盒(CCK-8)法、流式细胞术检测细胞增殖和凋亡。试剂盒检测丙二醛(MDA)含量以及超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)活性。酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测肿瘤坏死因子(TNF-α)、白细胞介素-6 (IL-6)、白细胞介素-8 (IL-8)水平;蛋白印迹法(Western blot)检测Bcl-2相关X蛋白(Bax)、B细胞淋巴瘤/白血病-2 (Bcl-2)、TLR4、磷酸化核因子κB抑制蛋白α (p-IκBα)和核因子κB抑制蛋白α (IκBα)蛋白表达。结果 与对照组比较,模型组细胞存活率、SOD、CAT活性降低(均P<0.05),凋亡率、MDA含量、TNF-α、IL-6、IL-8水平升高(P<0.05),TLR4、p-IκBα蛋白表达升高;与模型组比较,Sev显著升高细胞存活率、SOD、CAT活性(P<0.05),显著降低细胞凋亡率、MDA含量、TNF-α、IL-6、IL-8水平(P<0.05),TLR4、p-IκBα蛋白表达降低(P<0.05)。结论Sev可减轻低氧缺糖诱导的脑神经元细胞损伤,其机制可能与抑制TLR4/NF-κB信号通路有关。

SDF-1α和CXCR4在低氧缺糖海马脑片中的表达变化

目的研究海马脑片低氧缺糖损伤后SDF-1α和CX-CR4蛋白的表达变化情况。方法运用脑片培养技术建立低氧缺糖海马脑片模型,用免疫组化法和Western blot法检测SDF-1α和CXCR4的表达变化。结果低氧缺糖损伤前后海马脑片中均可见SDF-1α和CXCR4表达的阳性细胞,其胞膜和胞质呈棕黄色着色,其中部分轴丘可见CXCR4阳性蛋白表达。Western blot发现,损伤后在分子量为11 ku和43ku处分别检测到SDF-1α、CXCR4阳性条带;与正常对照组相比,OGD组SDF-1α和CXCR4表达均增加,其中SDF-1α表达增加差异有统计学意义(P<0.01)。结论海马脑片缺氧缺糖损伤后SDF-1α蛋白表达增加,提示SDF-1α可能与海马脑片低氧缺糖损伤密切相关。

犬ADMSCs对低氧缺糖模型RSC96细胞增殖、迁移及相关基因表达的影响

为了探究犬脂肪间充质干细胞(ADMSCs)促进髓鞘修复的分子机制,本试验以大鼠施万细胞(RSC96)为对象,模拟脊髓损伤(SCI)时脊髓组织低氧缺糖的微环境,制备低氧缺糖RSC96细胞模型,通过离体试验研究犬ADMSC对低氧缺糖RSC96细胞增殖、迁移及相关基因表达的影响。设空白对照组、模型对照组、MSC共培养组及空白培养基组,空白对照组为常规培养的RSC96细胞,其余三组为低氧缺糖模型RSC96细胞。在37℃5%CO_(2)培养箱中培养细胞,在造模后0、12、24h对不同组别进行拍照并使用软件测定划痕面积,计算迁移率。24 h后采取CCK-8法检测各组间OD值,并测定细胞增殖(NGF、NT-3)、迁移(Nrg-1)相关基因mRNA的表达情况。结果表明,24h后MSC共培养组的OD值和迁移率显著高于空白培养基组与模型对照组(P<0.05),且相关基因的mRNA表达量均高于其他三组,说明脂肪间充质干细胞可通过与RSC96共同作用来促进髓鞘修复。