布托啡诺调节缺氧诱导因子-1α/血管内皮生长因子信号通路对宫颈癌细胞增殖、迁移和血管生成的影响

目的探讨布托啡诺(Butorphanol)对宫颈癌细胞增殖、迁移和血管生成的影响及作用机制。方法使用0.5~80.0μg/mL的布托啡诺分别处理HeLa细胞24 h,细胞计数试剂-8(CCK-8)法检测细胞增殖,计算IC50值。将HeLa细胞分为对照组(Control组)、阴性对照组(NC组)、缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)过表达组(HIF-1α组)、布托啡诺组(Butorphanol组)、Butorphanol+HIF-1α组,平板克隆形成实验、细胞划痕实验、Transwell小室实验、小管形成实验分别检测HeLa细胞增殖、迁移、侵袭与血管生成,Western blot法检测HIF-1α、血管内皮生长因子(VEGF)蛋白表达,裸鼠移植瘤实验检验布托啡诺对宫颈癌移植瘤生长的影响。结果过表达HIF-1α可显著促进HeLa细胞增殖、迁移、侵袭及血管生成拟态形成,并上调HIF-1α、VEGF蛋白表达(P<0.05);布托啡诺可有效抑制HeLa细胞增殖、迁移、侵袭、血管生成拟态形成及宫颈癌移植瘤生长,并下调HIF-1α、VEGF蛋白表达(P<0.05);布托啡诺对宫颈癌细胞的抑制作用可被HIF-1α的过表达减弱。结论布托啡诺通过抑制HIF-1α/VEGF信号通路抑制宫颈癌细胞增殖、迁移、侵袭及血管生成,抑制宫颈癌的生长。

瑞香素调节缺氧诱导因子-1α/血管内皮生长因子信号通路对胫骨骨折大鼠骨痂形成和血管生成的影响实验研究

目的:探究瑞香素对胫骨骨折大鼠骨痂形成、血管生成及缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)/血管内皮生长因子(VEGF)信号通路的影响。方法:构建胫骨骨折大鼠模型,将120只胫骨骨折大鼠随机分成模型组、瑞香素低剂量组(30 mg/kg)、瑞香素中剂量组(60 mg/kg)、瑞香素高剂量组(90 mg/kg)剂量组、瑞香素高剂量+HIF-1α抑制剂YC-1组(90 mg/kg瑞香素+10 mg/kg YC-1),每组24只。另取24只正常大鼠仅暴露胫骨,穿入克氏针,不切断胫骨,设为假手术组。各组大鼠进行相应给药干预8周。X射线观察骨痂形成情况,并计算骨痂体积。微计算机断层扫描(Micro-CT)分析骨折折断处骨痂组织和假手术组相同部位骨组织骨体积分数(BV/TV)、骨小梁数量(Tb.N)、骨小梁厚度(Tb.Th)和骨密度(BMD)。HE染色观察胫骨骨折处骨组织及假手术组大鼠相同部位骨组织形态学变化,并计算新生血管数量及血管面积。酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清中碱性磷酸酶(ALP)、骨钙素(OCN)水平。蛋白印迹实验检测胫骨骨折处骨痂组织及假手术组骨膜组织HIF-1α和VEGF蛋白表达。结果:与假手术组比较,模型组胫骨骨组织破坏严重,骨小梁稀疏紊乱,成骨细胞数量明显减少,BV/TV、Tb.N、Tb.Th、BMD、新生血管数量及血管面积、HIF-1α和VEGF蛋白表达水平降低,ALP、OCN水平升高(均P<0.05)。与模型组比较,瑞香素低、中、高剂量组骨组织中骨痂依次增多,骨小梁生成增加且排列有序,毛细血管逐渐丰富,聚集的成骨细胞数量依次增加,骨组织破坏减轻,骨痂体积、BV/TV、Tb.N、Tb.Th、BMD、新生血管数量及血管面积、ALP、OCN、HIF-1α和VEGF蛋白表达水平依次升高(均P<0.05)。与瑞香素高剂量组比较,瑞香素高剂量+YC-1组骨痂、骨小梁生成、毛细血管、成骨细胞数量减少,骨组织破坏加重,骨痂体积、BV/TV、Tb.N、Tb.Th、BMD、新生血管数量及血管面积、ALP、OCN、HIF-1α和VEGF蛋白表达水平降低(均P<0.05)。结论:瑞香素可能通过激活HIF-1α/VEGF信号通路促进胫骨骨折大鼠骨痂形成、血管生成,从而加速骨愈合。

沉默miRNA210可能通过低氧诱导因子-血管内皮生长因子途径减轻心肌炎时心肌细胞的损伤

目的研究miRNA210在脂多糖(LPS)诱导心肌炎时对大鼠原代心肌细胞的作用及其内在机制。方法采用CCK8法检测正常或LPS诱导时miRNA210对大鼠原代心肌细胞活力的影响;ELISA法检测在LPS诱导前提下,miRNA210处理后肿瘤坏死因子(TNF)-α与白细胞介素(IL)-1β的分泌情况;流式细胞凋亡法检测各干预组前后大鼠原代心肌细胞的凋亡情况;Western blot法检测凋亡相关蛋白bcl-2、bax、caspase-3和低氧诱导因子1(HIF1)-血管内皮生长因子(VEGF)的表达情况。结果CCK8检测结果显示,与对照组相比,miRNA210模拟物(t=0.000,P=1.000)和siRNA(t=0.686,P=0.500)干扰对大鼠原代心肌细胞的影响差异无统计学意义,LPS处理后大鼠原代心肌细胞的细胞活力明显降低(t=8.764,P<0.001);与LPS组相比,抑制miRNA210后大鼠原代心肌细胞活力明显升高(t=3.576,P=0.012)。ELISA检测结果显示,与对照组相比,LPS诱导后IL-1β(t=4.166,P=0.014)和TNF-α(t=6.309,P=0.003)表达显著上调;与LPS组相比,应用miRNA210模拟物后IL-1β(t=4.096,P=0.015)和TNF-α(t=4.424,P=0.011)表达显著升高,沉默miRNA210后IL-1β(t=4.287,P=0.012)和TNF-α(t=3.577,P=0.023)表达显著下调。流式细胞凋亡实验结果表明,与对照组相比,LPS诱导后的大鼠原代心肌细胞凋亡明显增加(t=32.780,P<0.001);与LPS组相比,应用miRNA210模拟物明显加重了LPS诱导的细胞凋亡(t=7.412,P=0.002),沉默miRNA210后的大鼠原代心肌细胞凋亡率明显降低(t=11.720,P<0.001)。Western blot检测结果表明,与对照组相比,LPS显著下调了bcl-2表达(t=8.346,P=0.001),上调了bax(t=12.890,P<0.001)和caspase-3的表达(t=4.331,P=0.012)。与LPS组相比,应用miRNA210模拟物后bcl-2(t=6.074,P=0.003)表达明显下降,bax(t=5.376,P=0.022)和caspase-3(t=5.859,P=0.004)表达明显升高;沉默miRNA210后bcl-2表达明显升高(t=3.873,P=0.017),bax(t=5.205,P=0.006)和caspase-3(t=2.800,P=0.040)表达明显下降。与对照组比,LPS组的HIF1(t=10.380,P=0.001)和VEGF(t=4.973,P=0.008)表达显著上调;与LPS组相比,应用miRNA210模拟物后的HIF1(t=8.952,P=0.001)和VEGF表达(t=11.203,P=0.001)显著上调,沉默miRNA210后的HIF1(t=3.893,P=0.017)和VEGF表达(t=3.181,P=0.033)显著降低。与LPS组相比,应用2ME后逆转miRNA210模拟物后的bax(t=4.899,P=0.008)、HIF1(t=2.833,P=0.047)及caspase-3(t=2.877,P=0.045)和VEGF表达(t=2.994,P=0.040)显著降低,bcl-2表达(t=3.392,P=0.017)显著升高。结论沉默miRNA210可通过HIF1-VEGF介导的凋亡通路来减少LPS诱导的心肌细胞损伤。

肝癌组织中缺氧诱导因子-1α的表达及其与血管内皮生长因子的相关性分析

目的探讨肝癌组织中缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)的表达及其与血管内皮生长因子(VEGF)的相关性。方法选取2020年1月至2021年12月江西省肿瘤医院收治的94例肝癌患者作为研究对象。比较患者手术前后视觉模拟评分法(VAS)评分和血清HIF-1α、VEGF水平,比较术后1 d和术后7 d不同肝功能Child-Pugh分级、巴塞罗那分期(BCLC)患者的HIF-1α水平,分析HIF-1α水平与肝癌患者各因素的相关性。结果术前及术后1、7 d,患者VAS评分及血清HIF-1α、VEGF水平比较差异有统计学意义(P<0.05);术后1、7 d,患者VAS评分及血清HIF-1α、VEGF水平均高于术前,且术后7 d低于术后1 d,差异有统计学意义(P<0.05)。术后7 d,肝功能Child-Pugh不同分级和BCLC不同分型的患者HIF-1α水平均低于术后1 d,差异有统计学意义(P<0.05)。Pearson相关分析结果显示,患者HIF-1α水平与VAS评分(r=0.485,P<0.001)、VEGF水平(r=0.476,P<0.001)、肝功能ChildPugh分级(r=0.284,P=0.006)、BCLC分期(r=0.250,P=0.016)呈正相关。结论血清HIF-1α与VEGF水平在肝癌患者不同疼痛程度上呈正相关,检查HIF-1α与VEGF水平对肝癌患者具有一定临床意义。

缺血预适应对局灶性脑缺血再灌注大鼠皮质区低氧诱导因子-1α和血管内皮生长因子表达的影响

目的缺血预适应诱导脑缺血耐受已成为缺血性脑血管疾病的研究热点,但其具体机制尚未阐明。文中通过观察缺血预适应后局灶性脑缺血再灌注大鼠梗死灶周边皮质区低氧诱导因子-1α(hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α)、血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)表达的变化,探讨缺血预适应的脑保护机制。方法将130只雄性SD大鼠随机分为假手术组、脑缺血组和预适应组,脑缺血组和预适应组按缺血后再灌注时间不同分为再灌注2、6、12、24、48和72 h 6个亚组,假手术组10只大鼠,其余每个时间点各10只大鼠。采用改良线栓法制备大鼠局灶性脑缺血预适应模型,通过免疫组织化学法与Western blot法观察脑缺血后再灌注各个时间点HIF-1α和VEGF的表达变化。结果脑缺血组、预适应组于再灌注2 h HIF-1α和VEGF阳性细胞及蛋白表达有所增加,24 h表达至各时间点最高水平,随后表达逐渐减少,72 h表达仍明显高于假手术组(P<0.05)。预适应组各时间点HIF-1α、VEGF的阳性细胞及蛋白表达均高于脑缺血组,差异有统计学意义(P<0.05);脑缺血组、预适应组组内各相邻时间点比较,差异有统计学意义(P<0.05)。假手术组HIF-1α和VEGF阳性细胞及蛋白仅少量表达。结论脑缺血再灌注损伤能够诱导HIF-1α、VEGF的表达,脑缺血预适应能够进一步上调两者表达。

低氧对小鼠缺氧诱导因子-1α、P53和血管内皮生长因子表达的影响

目的:研究低氧时小鼠肺组织中缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)、P53及血管内皮生长因子(VEGF)表达的变化,探讨三者之间的关系,以及低氧与血管新生的关系。方法:实验用雄性昆明小鼠,分为低氧组与对照组,低氧仓浓度分别为10%、7%、5%。低氧时间分别为3天、6天、9天。用免疫组织化学技术检测小鼠在低氧条件下肺组织中的HIF-1α、P53和VEGF蛋白表达的变化及微血管密度(MVD)。结果:低氧组HIF-1α、P53和VEGF蛋白表达均增加,并且随低氧时间的延长及低氧浓度的降低而增强,而对照组HIF-1α无表达,P53和VEGF有少量表达(P<0.05);低氧组的MVD也高于对照组;P53,VEGF表达与MVD均与HIF-1α表达呈正相关(r分别为0.609、0.730与0.691)。结论:HIF-1α/VEGF通路在低氧致小鼠肺组织血管新生过程中起重要作用,P53基因的失活可能经HIF-1α/VEGF通路促进血管新生。

急性脑梗死患者血清低氧诱导因子-1α与血管内皮生长因子水平及意义

目的探讨低氧诱导因子(HIF)-1α与血管内皮生长因子(VEGF)在急性脑梗死患者血清中的水平变化及临床意义。方法将脑梗死患者根据脑梗死灶面积分为大梗死灶、中梗死灶和小梗死灶,采用ELISA检测脑梗死血清HIF-1α与VEGF蛋白浓度,分析脑梗死急性期血清中HIF-1α和VEGF浓度在1、3、5、7、14 d动态变化水平,比较脑梗死不同体积组血清HIF-1α和VEGF的浓度。结果血清中HIF-1α浓度表达呈现动态变化规律,发病后1天达到高峰,之后呈现迅速下降趋势,1、3、5、7 d与对照组比较差异显著,14 d时虽没达到显著水平,但仍然高于对照组水平;不同体积脑梗死血清HIF-1α浓度比较,发现大梗死灶在各个时间点血清HIF-1α浓度均显著高于中梗死灶和小梗死灶,中梗死灶各个时间点平均血清HIF-1α浓度与小梗死灶只有1 d达到显著差异(P<0.05或P<0.01);脑梗死组血清VEGF浓度在5个时间点与对照组比较差异显著(P<0.01),血清中VEGF浓度在发病后第5天达到高峰,在第14天仍然显著高于对照组(P<0.01),大梗死灶和中梗死灶组在各个时间点血清VEGF浓度均显著高于小梗死灶(P<0.05),大梗死灶与中梗死灶各个时间点血清VEGF浓度均未达到显著差异(P>0.05)。结论血清HIF-1α和VEGF浓度在1、3、5、7 d与对照组比较差异显著,14 d时仍高于对照组,大梗死灶和中梗死灶组在各个时间点血清VEGF浓度均显著高于小梗死灶。

缺血预适应对局灶性脑缺血再灌注大鼠海马CA1区低氧诱导因子-1α、血管内皮生长因子表达的影响

目的观察缺血预适应后局灶性脑缺血再灌注大鼠缺血侧海马CA1区低氧诱导因子（HIF）-1α、血管内皮生长因子（VEGF）表达的变化，探讨缺血预适应的脑保护机制。方法雄性sD大鼠随机分为3组：假手术（SO）组、脑缺血（MCAO）组和缺血预适应（BIP）组，后两组按缺血后再灌注时间不同分为再灌注2、6、12、24、48、72h6个亚组。制备大鼠局灶性脑缺血预适应模型，采用免疫组织化学法与Westernblot法观察脑缺血后再灌注各个时间点海马CA1区HIF—1α和VEGF的表达变化。结果SO组未见神经功能缺损症状，与MCAO组相比，BIP组再灌注各时间点神经功能缺损评分低（P〈0．05）。MCAO组、BIP组HIF-1α、VEGF阳性细胞及蛋白表达均于再灌注2h开始增多，6～12h表达递增，24h表达至高峰，随后表达减少，72h表达仍高于SO组。两组各时间点HIF-1α和VEGF阳性细胞及蛋白表达均高于S0组（P〈0．05）。除再灌注2h、6hMCAO组与BIP组HIF—1α的阳性细胞表达差异无统计学意义外，2组各时间点VEGF阳性细胞表达、HIF-1α、VEGF蛋白表达均是BIP组高于MCAO组（P〈0．05）。结论脑缺血预适应可能通过上调HIF-1α、VEGF的表达，发挥脑保护作用。

复方丹参滴丸对2型糖尿病大鼠代谢、生化指标及缺氧诱导因子-1α/血管内皮生长因子通路的影响

目的探讨复方丹参滴丸(DSP)对2型糖尿病(T2DM)大鼠代谢、生化指标及缺氧诱导因子(HIF)-1α/血管内皮生长因子(VEGF)通路的影响。方法选择48只6~8周龄的清洁级健康雄性SD大鼠,根据简单随机抽样方法分为对照组(NC组,n=10)和造模组(n=38),其中对照组给予常规饲料喂养,造模组采用高糖高脂饲料喂养,以30 mg/kg的剂量腹腔注射2%链脲佐菌素(STZ)溶液,制备T2DM大鼠模型。32只成模大鼠以血糖水平分为糖尿病对照组(DM组,n=16)和DSP治疗组(DSP组,n=16),分别灌胃给予等量体积的生理盐水及400 mg·kg^(-1)·d^(-1)的DSP生理盐水混悬液治疗,疗程均为8 w。分别采用AU2700全自动生化仪和自动放射免疫仪测定3组大鼠血清糖脂代谢指标及生化指标水平,采用BNII全自动蛋白分析仪检测血清24 h尿微量白蛋白(24 h UAlb),显微镜下观察肾皮质组织切片的病理变化及进行肾小球细胞外基质(ECM)堆积指数的评估,采用Western印迹方法检测三组大鼠肾组织中HIF-1α及VEGF的表达水平,并比较三组各指标的差异。结果显微镜下显示,与NC组比较,DM组及DSP组大鼠的肾小球基底膜及系膜区呈现明显肿胀、扩张,DSP组大鼠的肾小球病变程度较DM组有所减轻;DM组及DSP组大鼠的肾小球ECM堆积指数积分高于NC组,而DSP组低于DM组(P<0.05);三组大鼠血清中糖脂代谢指标水平整体比较差异均有统计学意义(P<0.05);与NC组比较,DM组及DSP组大鼠血清中空腹血糖(FPG)、空腹胰岛素(FIns)、胰岛素抵抗指数(HOMAIR)、总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)水平均升高,而HDL-C水平降低(P<0.05);除高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)外,DSP组其他指标水平均低于DM组(P<0.05);DM组与DSP组大鼠血清肌肝(Scr)、尿素氮(BUN)、24 h UAlb水平及肾组织中HIF-1α和VEGF的相对含量均明显高于NC组,而DSP组明显低于DM组(P<0.05)。结论 DSP可有效改善T2DM大鼠的糖脂代谢紊乱,延缓肾脏损害进程,其机制可能与HIF-1α/VEGF通路的调控作用有关。

低氧诱导因子-1α、血管内皮生长因子及胎盘生长因子在不同海拔世居藏族及移居汉族青年中的水平及意义

目的:探讨低氧诱导因子-1α(HIF-1α)、血管内皮生长因子(VEGF)及胎盘生长因子(PIGF)在不同海拔藏、汉族青年人群的水平及意义。方法:应用双抗体夹心酶联免疫吸附法(ELISA)测定平原汉族组(P组),中度海拔藏、汉族组(M1和M2组)及高海拔藏、汉族组(H1组和H2组)血清HIF-1α、VEGF、PIGF的水平,分析其与动脉血氧分压(PaO2)相关性。结果:H2组HIF-1α水平高于P组、M1组和M2组(均P<0.05),H1组HIF-1α水平高于M1组(P<0.05);H2组VEGF水平高于其他各组(均P<0.05);M1组和M2组PIGF水平低于P组(均P<0.01),H1组PIGF高于M1组及M2组(均P<0.01),H2组高于M1组、M2组及H1组(均P<0.05)。汉族HIF-1α、VEGF、PIGF和PaO2负相关(r=-0.475,-0.686,-0.511,均P<0.01);藏族HIF-1α与PaO2无线性相关(r=-0.270,P>0.05),VEGF、PIGF与PaO2负相关(r=-0.376,-0.482,均P<0.05)。结论:不同海拔藏、汉族青年人群血清HIF-1α、VEGF和PIGF水平有明显差异,VEGF和PIGF除受HIF-1α的调节外,可能还有其他的调节因素起作用。

坎地沙坦对大鼠肥厚心肌组织中低氧诱导因子-1α、血管内皮生长因子表达的影响

目的:探讨在大鼠心肌肥厚发展过程中心肌组织中低氧诱导因子-1α(HIF-1α)、血管内皮生长因子(VEGF)的表达及相互关系,以及坎地沙坦对其影响。方法:35只雄性Wistar大鼠随机分为3组,假手术组(A组)10只、模型组(B组)13只、坎地沙坦组(C组)12只。采用腹主动脉缩窄法制作心肌肥厚模型。术后24hC组大鼠给予坎地沙坦4mg/(kg·d)灌胃,A、B组用等量蒸馏水灌胃。6周后检测大鼠心肌肥厚程度、血流动力学指标以及心肌组织中HIF-1α、VEGF蛋白的表达。结果:与A组相比,B组大鼠心肌组织明显肥厚(P<0.05),B组大鼠心肌组织中HIF-1α、VEGF蛋白表达增加(P<0.05);与B组比较,C组心肌肥厚程度改善(P<0.05),HIF-1α、VEGF蛋白表达减少(P<0.05)。结论:坎地沙坦能延缓心肌肥厚的发生发展,此作用可能与影响HIF-1α表达有关。

地塞米松对低氧小鼠缺氧诱导因子-1α及血管内皮生长因子表达的影响

背景与目的业已发现缺氧与肿瘤发生、发展关系密切。本研究的目的是观察地塞米松对低氧小鼠肺组织中缺氧诱导因子1α(hypoxiainduciblefactor1α,HIF1α)及血管内皮生长因子(vascularendothelialgrowthfactor,VEGF)表达的影响,探讨缺氧与血管新生的关系及地塞米松的作用机制。方法实验用雄性昆明小鼠,随机分为对照组和三个实验组(缺氧3天组、缺氧6天组、缺氧+激素组)。用免疫组织化学技术检测小鼠肺组织中HIF1α和VEGF蛋白的表达。结果缺氧组小鼠HIF1α和VEGF蛋白表达均较对照组显著增加(P<0.05);缺氧+激素组与缺氧组比较,HIF1α和VEGF蛋白表达显著下降(P<0.05)。HIF1α与VEGF表达呈正相关(r=0.730,P=0.007)。结论缺氧可以上调小鼠肺组织中VEGF和HIF1α的表达,而地塞米松可抑制低氧小鼠VEGF和HIF1α的表达,具有抗血管生成的作用。

低氧训练对大鼠骨骼肌缺氧诱导因子-1α蛋白和血管内皮生长因子mRNA表达的影响

目的:探讨低氧训练对大鼠骨骼肌缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)蛋白和血管内皮生长因子(VEGF)基因表达的影响。方法:选用健康雄性SD大鼠72只,随机分为9组。采用递增负荷跑台训练及低氧、超低氧两种不同程度的递增低氧刺激,在运动中和运动后给予低氧处理。应用免疫组织化学、原位杂交、计算机显微图像分析等方法,检测HIF-1α、VEGFmRNA在骨骼肌组织中的定位及含量。采用相关分析方法,分析低氧训练骨骼肌HIF-1α蛋白表达对骨骼肌VEGF转录的促进作用。结果与结论:低氧和运动训练可增加骨骼肌组织HIF-1α蛋白和VEGFmRNA含量,低氧训练骨骼肌组织HIF-1α蛋白表达的增加对VEGF基因转录具有促进作用。

低氧诱导因子-1α、血管内皮生长因子、Bcl-2与急性脑梗死患者神经功能缺损度的相关研究

目的:探讨急性脑梗死患者外周血中低氧诱导因子-1α(HIF-1α)、血管内皮生长因子(VEGF)、Bcl-2水平的动态变化规律及与早期神经功能恶化(END)的相关性。方法:脑梗死患者173例根据美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)评分,分为END组59例和非END组114例。采用ELISA法检测2组患者入院后12 h、24 h、3 d、5 d、7 d、10 d外周血HIF-1α、VEGF、Bcl-2水平变化及与END发生的相关性。结果:END组NIHSS评分及DWI-ASPECTS≤7分的患者比例明显高于非END组(P<0.05)。脑梗死患者在入院24 h时外周血HIF-1α、VEGF和Bcl-2水平达到高峰,且END组患者外周血HIF-1α、VEGF和Bcl-2水平均明显高于非END组(P<0.05)。END程度越严重,患者外周血HIF-1α、VEGF和Bcl-2水平越高(P<0.05)。多因素Logistic回归分析显示,脑梗死患者END的发生风险与HIF-1α、VEGF和Bcl-2水平呈正相关性(P<0.05)。结论:外周血HIF-1α、VEGF和Bcl-2水平可能可作为急性脑梗死后神经功能损伤度的预测指标。

低氧诱导因子-1ɑ、血管内皮生长因子及其受体在胰腺癌中的表达和预后

目的探讨胰腺癌组织中低氧诱导因子-1ɑ(HIF-1ɑ)、血管内皮生长因子(VEGF)及VEGF受体1(VEGFR1)、受体2(VEGFR2)对胰腺癌微血管密度(MVD)的影响,以及这些蛋白的表达与胰腺癌根治性手术后患者生存期的关系。方法收集2008年1月—2012年5月在上海交通大学医学院附属仁济医院普外科行胰十二指肠切除术的50例胰腺癌患者的胰腺癌组织病理标本,并随机取其中15例患者的胰腺阴性切缘组织作为对照。采用免疫组织化学法检测胰腺癌组织、阴性切缘组织中HIF-1ɑ、VEGF、VEGFR1、VEGFR2的表达水平。以CD34单克隆抗体显示肿瘤微血管内皮细胞,计算肿瘤内MVD。结果共随访45例,随访率为90%。胰腺癌组织中HIF-1α、VEGF、VEGFR1、VEGFR2阳性率分别为82.0%、84.0%、80.0%和84.0%,均显著高于阴性切缘组织的46.7%、26.7%、0、13.3%(P值均<0.05)。胰腺癌组织中,HIF-1α与VEGF(r=0.564)、VEGFR1(r=0.301)、VEGFR2(r=0.310)、MVD(r=0.443)呈正相关(P值均<0.05),VEGF与VEGFR1(r=0.383)、VEGFR2(r=0.342)呈正相关(P值均<0.05),VEGFR1与VEGFR2呈正相关(r=0.851,P<0.05)。胰腺癌组织中,VEGF(r=0.836)、VEGFR1(r=0.339)、VEGFR2(r=0.284)与肿瘤MVD均呈正相关(P值均<0.05)。结论胰腺癌组织中HIF-1α影响肿瘤分化,能促进VEGF、VEGFR1、VEGFR2表达,诱导肿瘤新生血管形成,增加MVD,促进肿瘤生长,影响患者术后的生存期。

大鼠视网膜胚胎发育过程中低氧诱导因子-1α及血管内皮生长因子的表达

背景研究发现低氧诱导因子-1（HIF-1）与机体缺氧的生理反应有关，并在胚胎发育过程中发挥作用。此外人视网膜胚胎发育过程中血管内皮生长因子（VEGF）呈高表达。但二者在胚胎期缺氧环境中的作用及相互关系仍有待研究。目的观察大鼠视网膜胚胎发育过程中HIF-1α和VEGF的表达变化，探讨HIF-1α和VEGF在视网膜胚胎发育过程中的作用和相互关系。方法30只清洁级SD孕鼠剖腹取出胚胎10、12、14、16、20d鼠，每组取5只孕鼠，每只孕鼠随机选取2只胎鼠进行观察。摘除胎鼠一侧眼球，分离视网膜并制备切片，用免疫组织化学法检测视网膜组织中HIF-1α、VEGF蛋白的阳性表达，采用逆转录聚合酶链反应（RT—PCR）法分别检测不同胎龄大鼠及成年大鼠视网膜组织中HIF-1α mRNA及VEGF mRNA的表达。结果免疫组织化学染色表明，在大鼠视网膜胚胎早期（10～12d）即可检测到HIF-1α和VEGF蛋白均呈高表达，二者的表达强度均随胎龄的增加而减弱（F=56．70，P〈0．01；F=60．78，P〈0．01），各胎龄组视网膜中HIF-1α和VEGF蛋白的表达量均明显高于成年鼠，差异均有统计学意义（P〈0．01），随胎龄的增加HIF-1α蛋白在视网膜中的表达变化与VEGF蛋白表达呈正相关（r=0．96，P=0．00）。RT—PCR检测结果表明，大鼠胚胎早期（10～12d）即可检测到HIF-1α mRNA和VEGF mRNA在视网膜中均呈高表达，二者的表达均随胎龄的增加而减弱（F：68．84，P〈0．01；F=96．49，P〈0．01），各胎龄组视网膜中HIF-1α和VEGF蛋白的表达量均明显高于成年鼠，差异均有统计学意义（P〈0．01）。结论大鼠视网膜胚胎发育过程中HIF-1α及VEGF的表达随着胎龄的增加均呈先高后低的动态变化趋势，提示HIF-1α／VEGF通路参与大鼠视网膜的胚胎发育过程。

血管内皮生长因子和低氧诱导因子-1α与慢性马兜铃酸肾病大鼠肾间质纤维化的关系

目的探讨血管内皮生长因子(VEGF)及低氧诱导因子-1α(HIF-1α)等与慢性马兜铃酸肾病(CAAN)大鼠肾间质纤维化的关系。方法36只Wistar大鼠分2组:关木通组(24只)予关木通水煎剂连续灌胃12周,对照组(12只)予等量自来水连续灌胃12周;在4、8、12、16周末分别处死关木通组6只、对照组3只,留取肾组织。常规HE、Masson染色,免疫组化检测低氧诱导因子-1α(HIF-1α)、血管内皮生长因子(VEGF)和纤维连接蛋白(FN)表达并进行半定量分析。结果与对照组相比,关木通组肾小管间质病变逐渐加重,16周末呈典型的寡细胞性肾间质纤维化;VEGF表达短暂上升随后下降;HIF-1α、FN表达逐渐增多,与肾间质面积正相关。结论在CAAN中,HIF-1α表达多少引起VEGF的变化与CAAN大鼠肾间质纤维化关系密切;FN在CAAN大鼠肾间质纤维化发展过程中起到重要的作用。

氧诱导鼠视网膜病变中低氧诱导因子-1α和血管内皮生长因子的表达

目的:探讨HIF-1α和VEGF在早产儿视网膜病变鼠模型中的表达及意义。方法:建立氧诱导的早产儿视网膜病变新生鼠模型。Western-blot检测视网膜HIF-1α的表达,并以计算机图像分析仪进行分析;ELISA方法检测视网膜VEGF的表达。结果:与正常对照组比较,视网膜病变组在鼠出氧箱后5,10,15d视网膜HIF-1α表达逐渐增加(P<0.01),呈时间依赖关系。视网膜VEGF的表达分别为381.5±3.1,431.8±1.3和443.9±1.2ng/L,与对照组比较,均有显著增加(P<0.01)。结论:氧诱导视网膜病变中的HIF-1α和VEGF上调。

亚低温对脑缺血再灌注大鼠血管内皮生长因子和低氧诱导因子-1α表达的影响

目的探讨亚低温对脑缺血再灌注大鼠内皮生长因子(VEGF)和低氧诱导因子-1α(HIF-1α)表达的影响。方法 30只Sprague-Dawley大鼠随机分为假手术组、模型组和亚低温组,每组10只。后两组制备大脑中动脉闭塞(MCAO)2 h再灌注动物模型,亚低温组进行亚低温处理24 h。Longa评分评估各组大鼠神经功能;湿/干重法测定脑含水量;TTC染色观察脑梗死体积;ELISA法检测脑组织VEGF、HIF-1α蛋白含量;q PCR法检测脑组织VEGF m RNA水平。结果与假手术组比,模型组神经行为学评分升高,脑含水量及脑梗死率增加,脑组织HIF-1α蛋白、VEGF蛋白及m RNA水平上调(P<0.05)。与模型组比,亚低温组神经神经行为学评分显著降低(χ~2=26.657,P<0.001),脑含水量及脑梗死率降低,脑组织HIF-1α蛋白、VEGF蛋白及m RNA水平进一步上调(P<0.05)。结论亚低温可能通过HIF-1α介导VEGF上调,促进缺血组织区新生血管形成,从而发挥对缺血性脑卒中的保护作用。

血管内皮生长因子及低氧诱导因子-1α与糖尿病合并动脉狭窄病人支架植入术后再狭窄的关系研究

目的研究血管内皮生长因子(VEGF)及低氧诱导因子-1α(HIF-1α)与糖尿病合并动脉狭窄病人支架植入术后再狭窄关系。方法选取2016年9月至2018年2月华中科技大学同济医学院附属梨园医院糖尿病合并动脉狭窄病人188例,均行动脉支架植入治疗,支架植入前检测病人血清VEGFA及HIF-1α,糖、脂代谢指标及血清C反应蛋白(CRP),对病人追踪随访6个月,按是否发生冠脉再狭窄分为再狭窄组98例,未再狭窄组90例,比较两组病人VEGF及HIF-1α,糖、脂代谢指标及血清CRP水平差异,采用logistic分析糖尿病合并动脉狭窄病人支架植入术后再狭窄的风险因素。采用Pearson检验分析VEGF、HIF-1α与CRP的相关性。绘制受试者工作特征曲线(ROC曲线),分析VEGFA及HIF-1α对糖尿病合并动脉狭窄病人支架植入术后再狭窄的预测效能。结果再狭窄组及未再狭窄组病人血清糖化血红蛋白(HbA1c)≥7.2%、总胆固醇(TC)≥5.7 mmol/L、VEGF≥106.4 pg/mL、HIF-1α≥217.4 ng/mL、小而密低密度脂蛋白胆固醇(sLDLc)≥3.4 mmol/L、CRP≥11.6 mg/L、病变在分支动脉,支架植入长度≥3.4 cm、支架数目为2个及以上、支架直径<4.2 mm所占比例差异有统计学意义(63/98比34/90,64/98比31/90,61/98比31/90,63/98比27/90,62/98比40/90,62/98比17/90,71/98比41/90,62/98比34/90,26/98比10/90,71/98比31/90,均P<0.05)。多因素logistic回归分析结果显示,VEGF、HIF-1α、HbAH1c、CRP水平是动脉支架植入术后再狭窄的独立风险因素,支架直径是保护性因素(P<0.05)。相关分析结果显示,VEGF、HIF-1α与CRP水平呈现正相关关系(P<0.05)。VEGF、HIF-1α、CRP对糖尿病合并动脉狭窄病人支架植入术后再狭窄的评估效能:ROC-AUC(95%CI)分别为0.665(0.412~0.916)、0.761(0.552~0.971)、0.636(0.323~0.944)。结论糖尿病合并动脉狭窄病人血清VEGF、HIF-1α水平与支架植入术后再狭窄密切相关,检测血清VEGF、HIF-1α水平对冠脉再狭窄的发生具有较好的预测价值。