紫草素减轻低氧-复氧致大鼠心肌细胞系H9c2损伤

目的探索紫草素对低氧-复氧(H/R)损害的H9c2心肌细胞的保护作用。方法将心肌细胞系H9c2分为对照组、H/R组、紫草素(0.1、1和10μmol/L)干预组,每组3个平行孔;MTT法检测紫草素对H9c2细胞毒性;流式细胞计量术检测细胞凋亡和周期;DCFH-DA检测细胞活性氧水平;生化检测细胞中MDA、8-OHdG和GSH含量;qPCR检测细胞γ-GCS、HO-1和NQO1 mRNA表达;Western blot检测细胞中Bax、Bcl-2、caspase-3、cleaved caspase-3、Keap1和Nrf2蛋白表达;免疫荧光检测细胞Nrf2蛋白进核情况。结果紫草素呈浓度-时间依赖性抑制H9c2细胞增殖(P<0.05);H/R诱导H9c2细胞凋亡、细胞周期阻滞及促进Bax及cleaved caspase-3蛋白表达,抑制Bcl-2蛋白表达(P<0.05),紫草素呈浓度依赖性抑制细胞凋亡、解除细胞周期阻滞及cleaved caspase-3和Bax蛋白表达,增加Bcl-2蛋白表达;紫草素可降低H/R所致活性氧水平、MDA及8-OHdG升高,增高H/R所致GSH含量以及γ-GCS、HO-1和NQO1 mRNA的表达下调,导致Nrf2蛋白的升高及Keap1下调,并促进Nrf2蛋白进核(P<0.05)。结论紫草素减轻低氧-复氧致H9c2心肌细胞的损伤。

凡纳滨对虾应答低氧-复氧胁迫免疫相关酶活力的时空变化

研究了不同溶氧浓度(1.5,3.0,6.5 mg·L^(-1))对凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)鳃、肝胰腺和血淋巴组织的低氧胁迫效应。结果表明,碱性磷酸酶(Alkaline phosphatase,AKP)和酸性磷酸酶(Acid phosphatase,ACP)在鳃、肝胰腺和血淋巴中的分布具有组织特异性,差异显著(P<0.05),在肝胰腺中其活性最强,而酚氧化酶(Phenoloxidase,PO)在各组织中的含量很低。在低氧-复氧过程中各种酶在各组织中大多表现为先升后降的趋势,复氧24 h时,基本恢复到正常水平。DO为3.0 mg·L^(-1)时,这3种酶在鳃中3 h均达到最大值,表明鳃最先感知低氧胁迫,可作为其低氧胁迫的指示器官,同时,说明3 h是凡纳滨对虾应答低氧胁迫的一个关键点。

牛磺酸对低氧复氧乳鼠心肌细胞内游离钙浓度的影响

目的 :研究低氧 复氧对心肌细胞内Ca2 + 浓度([Ca2 + ]i)的影响 ,以及牛磺酸减轻模拟心肌缺血 再灌过程中钙超载的作用 .方法 :采用SD大鼠乳鼠进行心肌细胞培养 ,建立模拟心肌缺血 再灌注模型 .实验分 3组 :①正常对照组 ;②模拟缺血 再灌注组 :细胞低氧 30min 复氧 30min ;③牛磺酸 +缺血 -再灌组 :先加入终浓度为 2 0mmol·L-1的牛磺酸 ,再行低氧 30min 复氧 30min .以Fluo 3/AM荧光指示剂负载 ,应用激光共聚焦显微镜技术检测心肌细胞[Ca2 + ]i 变化 .结果 :对照组心肌细胞 [Ca2 + ]i 荧光强度(6 5 0± 4 1)U和荧光光密度较低 .低氧 30min后复氧即刻 ,[Ca2 + ]i荧光强度开始增加 ,复氧 30min后 [Ca2 + ]i 荧光强度(2 5 37± 187)U和光密度显著增高 (P <0 .0 1vs对照组 ) .而牛磺酸组细胞内荧光强度和光密度较模拟缺血 再灌组显著降低 [(895± 5 0 )Uvs (2 5 37± 187)U ,P <0 .0 1].结论 :心肌细胞低氧 复氧导致钙超载 ;而牛磺酸有明显减轻心肌细胞低氧 复氧时Ca2 +

内质网应激在间歇低氧所致肝脏胰岛素抵抗中的作用

目的探讨大鼠内质网应激在间歇低氧所致肝脏胰岛素抵抗中的作用。方法将24只SD大鼠随机分为对照组(NC组)及间歇低氧组(CIH组),NC组置于常氧环境12周,CIH组先予间歇低氧8周、随后恢复常氧饲养至第12周。两组均于基线、第8周、第12周测定空腹血糖(FBG)、空腹胰岛素(FINS)、及肝脏肌醇依赖酶1α(IRE1α)、剪切型X-box结合蛋白1(XBP1s)、叉形头转录因子1(FoxO1)、活化转录因子6(ATF6)、环腺苷酸反应元件结合蛋白(CREB)、CREB调控转录辅激活因子-2(CRTC2)、内质网膜上的I型跨膜激酶(PERK)、真核翻译起始因子2α(eIF2α)、蛋白激酶B(AKT)、磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶(PEPCK)、葡萄糖6磷酸酶(G6Pase)mRNA的表达水平。结果两组基线时各观察指标差异无统计学意义;8周时,CIH组FBG、FINS及IRE1α、XBP1s、ATF6、PERK、eIF2α、PEPCK、G6Pase mRNA水平较NC组增高(P<0.05),CREB、CRTC2、AKT mRNA水平较NC组降低(P<0.05);12周时,两组各观察指标差异无统计学意义。Pearson相关性分析显示(间歇低氧组第8周):胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)与FoxO1、CREB、CRTC2及PERK、eIF2αmRNA水平呈正相关(r=0.172、0.595、0.183、0.702、0.608;P<0.05),与IRE1α、XBP1s、ATF6、AKT mRNA水平呈负相关(r=-0.422、-0.327、-0.309、-0.399;P<0.05)。结论间歇低氧可以导致胰岛素抵抗的发生,内质网应激可能介导了该效应的发生。

睡眠呼吸暂停综合征动物模型的研究进展

睡眠呼吸暂停综合征（sleep apnea syndrome,SAS）是临床常见病,其病理生理改变,主要是慢性间断性低氧-复氧过程.呈现反复的低氧血症、高碳酸血症和睡眠结构紊乱,主要表现为睡眠时打鼾和呼吸表浅,伴有呼吸暂停,以致引发白天嗜睡和多系统器官的各种并发症.大量的研究表明,SAS是多种疾病的独立危险因素,可导致心、肺、肾、脑及血液等多器官或多系统损害.

营养

膳食钙对高脂膳食大鼠骨骼肌解偶联蛋白3基因表达的影响；镁对人体低密度脂蛋白氧化修饰的影响；富硒乳酸菌对肝损伤小鼠红细胞脂质过氧化和免疫功能的影响；大剂量硒降低硒酶基因表达并致大鼠肝组织损伤；不同剂量碘对小鼠大脑和血液中乙酰胆碱的影响；锌对染铅大鼠海马SS和SSmRNA阳性神经元的保护作用；莼菜富集锌的能力及其锌的分布探讨；牛磺酸对链脲佐菌素-糖尿病性白内障干预机制初探；牛磺酸对染铅大鼠体重及学习记忆的影响；牛磺酸对低氧-复氧乳鼠心肌细胞内游离钙浓度的影响；亚甲基四氢叶酸还原酶基因型、饮食习惯与胃癌的易感性；MK-801对成年大鼠弥漫性脑损伤后海马齿状回神经发生的影响。

红细胞生成素对急性肾损伤微环境下骨髓间充质干细胞定向趋化的影响

目的观察骨髓间充质干细胞（BMSC）在体外模拟的急性肾损伤（AKI）微环境中的迁移特点，明确红细胞生成素（EPO）干预对BMSC迁移的影响，并探讨其可能机制。方法肾小管上皮细胞（RTEC）于低氧一复氧（HR）环境中各培养12h获得HR—RETC，体外模拟AKI。采用Transwell体系将BMSC与RTEC共培养。实验分7组：对照组（①组单纯BMSC培养）、BMSC．RTEC共培养组（②组）、BMSC-HR-RTEC共培养＋不同浓度EPO干预组（③组-⑦组，EPO浓度：0、1、5、10、50IU／ml）。共培养48h后检测各组BMSC迁移数量，Western印迹法分别检测下室RTEC内的基质细胞衍生因子1（SDF-1）表达及上室BMSC的磷酸化（P）MAPK、MAPK水平，ELISA法检测RTEC培养上清中的SDF．1浓度。结果BMSC向HR—RTEC培养室的迁移数量增加，EPO干预可放大此效应，以10IU／ml时最强[与③组比较，（46．67±7．37）个，HP比（19．00±2．37）个／HP，P〈0．051。③组HR-RTEC的细胞内SDF-1表达水平（0．37±0．01比0．19±0．01，P〈0．05）及培养上清中SDF-1浓度[（61．64±4．88）μg/L比（35．26±8．78）μg，L，P〈0．05]均高于未处理RTEC（②组），EPO干预可进一步增加其水平，以10IU／ml时最强[（⑥组与③组比较：（173．53±14．66）上班比（61．64±4．88）μg／L，P〈0．05]，并伴有BMSC内MAPK磷酸化增强。结论体外模拟的AKI微环境对BMSC有定向趋化作用，EPO干预可增强其趋化效果，其机制可能与SDF-1水平增加及SDF-1-CXCR4轴下游的信号蛋白MAPK的磷酸化有关。