聚乙二醇干扰素-α-2a治疗血清低水平HBsAg阳性的慢性乙型肝炎患者临床结局预测研究

目的分析聚乙二醇干扰素-α-2a(Peg-IFNα-2a)治疗低水平HBs Ag阳性的慢性乙型肝炎(CHB)患者的临床结局及其血清HBs Ag水平对疗效的预测价值。方法 2014年4月~2016年4月我院就诊的低水平HBs Ag阳性的CHB患者80例,采用随机数字表法将其分成两组,每组40例。患者入组前经核苷(酸)类似物(NAs)治疗获得病毒学应答。给予对照组恩替卡韦治疗,观察组接受恩替卡韦和Peg-IFNα-2a联合治疗48 w。采用受试者工作特征曲线(ROC)下面积(AUC)评估基线HBs Ag水平预测HBs Ag清除的效能。结果在治疗48 w末,观察组血清HBs Ag和HBV DNA水平分别为(1.5±0.3)lg U/ml和(0.1±0.1)lg U/ml,显著低于对照组的(2.0±0.2)lg U/ml和(1.3±0.3)lg U/ml(P<0.05),观察组HBs Ag清除率和HBV DNA转阴率分别为32.5%和92.5%,显著高于对照组的6.3%和55.0%(P<0.05);基线HBs Ag水平是HBs Ag清除的独立相关因素(OR:0.337,95%CI:0.026~0.652,P<0.05);经ROC曲线分析,以基线HBs Ag水平等于2.0 lg U/m L为截断点,基线HBs Ag水平预测治疗48 w血清HBs Ag清除的AUC为0.77,敏感度为0.85,特异度为0.68,阳性预测值为67.2%,阴性预测值为85.3%,正确性为72.5%。结论应用peg-IFN-α-2a治疗已经NAs治疗获得低水平HBs Ag阳性的CHB患者可进一步提高临床疗效,且基线HBs Ag水平能预测治疗结束时血清HBs Ag清除情况。

荧光定量PCR对低水平HBsAg血液样本的检测效果分析

目的探讨献血者携带低水平HBsAg时初、复检试剂的选择,以减少HBsAg漏检。方法从3万多人份用国产ELISA试剂(A)初检HBsAg阴性的血样中,留取S/CO值在临界下限30%的灰区样本50例,再用国产ELISA试剂(B)与进口ELISA试剂对50例样本同时复检,并进行HBVDNA定量分析。结果50例国产试剂(A)初检阴性的血样中,进口试剂阳性检出率40%,国产试剂(B)的阳性检出率16%,差异有显著性。进口试剂阳性检出率40%与FQ-PCR法阳性检出率32%的差异无显著性。国产试剂(B)的阳性检出率与FQ-PCR阳性检出率的差异有显著性。结论国产试剂检测低水平HBsAg样本的灵敏度低于进口试剂,易发生漏检。

低水平HBsAg患者肝组织HBsAg、HBcAg表达与血清HBsAg水平、HBVDNA载量的相关性

目的分析低水平HBsAg患者肝组织HBsAg、HBc Ag表达与血清HBsAg水平、HBV DNA载量的相关性,为低水平HBsAg患者的病情判断提供依据。方法选取2013年1月至2015年12月HBsAg水平低于1 400 IU/m L且高于0.05 IU/m L者作为研究对象,收集的63例低水平HBsAg患者均进行了肝组织活检。采用罗氏cobas e601全自动电化学发光免疫分析系统及配套试剂检测血清HBsAg,HBV DNA采用ROCHE公司全自动Ampli Prep/cobas Taq Man 48系统检测仪及配套试剂进行检测。结果 63例患者中,肝组织HBsAg表达阳性例数:阴性5例(7.94%)、+有47例(74.60%)、++有8例(12.70%)、+++有2例(3.17%)、++++有1例;而其HBc Ag表达阳性例数:阴性30例(47.62%)、+有28例(44.44%)、++有4例(6.35%)、+++有1例(1.59)、++++有0例。低水平HBsAg患者肝组织HBsAg表达与血清HBsAg水平通过spearman和kendall相关分析均呈显著正相关(spearman分析:r=0.261,P=0.039;kendall分析:r=0.217,P=0.036),而其与血清HBV DNA载量没有显著相关性;肝组织HBc Ag表达与血清HBsAg水平无显著相关性,而与血清HBV DNA载量通过spearman和kendall相关分析均有显著正相关性(spearman分析:r=0.305,P=0.015;kendall分析:r=0.259,P=0.017)。结论低水平HBsAg患者肝组织HBsAg表达与血清HBsAg水平呈显著正相关,而与HBV DNA载量无关;肝组织HBc Ag表达与血清HBV DNA载量有显著正相关性,而与血清HBsAg水平无关。

两种方法检测低水平HBsAg的方法学比较

目的对全自动微粒子免疫荧光法(MEIA)和酶联免疫吸附试验(ELISA)检测低水平乙型肝炎表面抗原(HBsAg)进行方法学比较。方法采用MEIA法检测乙型肝炎血清学标志物,从中筛选出的120例低水平HBsAg阳性标本,用ELISA法进行检测,并对确认结果进行评价。结果 MEIA检测结果为2<S/N<5时,ELISA的阳性率仅为14%;5<S/N<10时,ELISA的阳性率仅为35.13%;ELISA与MEIA两种方法阳性检出率差异有统计学意义(P<0.05);10<S/N<20时,阳性检出率差异无统计学意义(P>0.05)。结论 MEIA法对低水平HBsAg的阳性检出率较ELISA法高。

低水平HBsAg表达的慢性无症状HBV携带者Pre-S基因序列分析

目的探讨低水平HBsAg表达的慢性无症状HBV携带者(Asymptomatic chronic HBV carriers,ASCs)Pre-S基因序列特征及持续表达的分子机制。方法收集2015年2月至2016年12月浙江大学医学院附属第一医院、杭州市第六人民医院、解放军第九〇三医院的654份ASCs血清标本和临床资料,根据HBsAg水平分为低水平HBsAg组(≤10 IU/mL)和高水平HBsAg组(>10 IU/mL),并且在与低水平HBsAg组年龄匹配的基础上,从高水平组血清标本中随机抽样100份,对138例低水平HBsAg患者和100例高水平HBsAg患者进行Pre-S/S基因组扩增与测序,构建系统进化树确定基因亚型,以高水平HBsAg组的HBV Pre-S基因成功测序结果为基础建立中国东部地区ASCs主要基因型的Pre-S基因参考序列,并对低水平HBsAg组的ASCs Pre-S基因序列进行对比分析。采用SPSS 12.01统计软件对数据进行分析。结果138例低水平HBsAg组Pre-S/S成功测序63例,其中B基因型52例,C基因型11例;100例高水平HBsAg组标本中Pre-S/S成功测序94例,其中B基因型48例,C基因型46例。通过序列比较分析发现,B基因型中,低水平HBsAg组Pre-S蛋白共发现81个氨基酸突变位点,其中有意义突变4个,分别为Pre-S1区F56I/V、T76A/N/P,Pre-S2区P15L/S/T、Y21T/F/H/N;高水平HBsAg组Pre-S蛋白发现47个氨基酸突变位点,其中有意义突变3个,为Pre-S1区L34F、V49A和P59S/L;B基因型中低水平HBsAg组的Pre-S蛋白氨基酸突变位点总数高于高水平HBsAg组,差异具有统计学意义(χ2=14.008,P<0.05)。C基因型中,低水平HBsAg组Pre-S蛋白发现19个氨基酸突变位点,其中有意义突变3个,分别为Pre-S1区W66V/G和A79V,Pre-S2区V32A;高水平HBsAg组Pre-S蛋白发现39个氨基酸突变位点,其中有意义突变2个,为Pre-S1区A79V和Pre-S2区T49I;C基因型中Pre-S蛋白氨基酸突变位点总数在两组间差异有统计学意义(χ2=7.571,P<0.05)。结论ASCs Pre-S基因存在有意义的突变,这些突变可能与低水平HBsAg持续表达相关。

聚乙二醇干扰素α短期治疗HBsAg水平极低的非活动性HBsAg携带者的疗效观察

目的观察HBsAg水平极低的非活动性HBsAg携带者(Inactive hepatitis B surface antigen carriers,IHC经短期聚乙二醇干扰素α-2b(Peg IFNα-2b)治疗后的HBsAg清除率。方法自2017年4月至2018年12月,共38例IHC就诊于厦门长庚医院,既往未进行抗病毒治疗,且HBsAg水平均小于15 IU/mL。根据患者治疗意愿分为Peg IFNα治疗组(12例)或对照组(26例)。治疗组皮下注射Peg IFNα-2b180μg/周,疗程为24周。对照组未给予抗病毒治疗,中位随访55.7(25.3,79.2)周。运用卡方检验比较两组HBsAg的清除率和血清学转换率的差异,运用logistic回归分析基线特征、Peg IFNα-2b治疗与HBsAg清除间的相关性。结果 24周时,PegIFNα治疗组中83.3%(10/12)IHC获得HBsAg清除,41.6%(5/12)获得HBsAg血清学转换,对照组中有7.7%(2/26)IHC获得HBsAg清除,无一例发生HBsAg血清学转换,Peg IFNα治疗组的HBsAg清除率和HBsAg血清学转换率显著高于对照组(P<0.05)。Peg IFNα-2b治疗可增加IHC的HBsAg清除率(OR=60.00,95%CI:7.39~487.14)。结论 Peg IFNα-2b短期治疗HBsAg水平极低的IHC可以提高HBsAg清除率和HBsAg血清学转换率。