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数字PCR法定量低浓度水平短链DNA标准物质的研究
被引量:
7
1
作者
闻艳丽
梁文
刘刚
《中国测试》
CAS
北大核心
2020年第1期44-49,共6页
该文研制一种低浓度水平的短链DNA标准物质,用于低浓度水平ctDNA检测过程的量值溯源,重点对低浓度水平的短链基因标准物质的定值方法进行研究。首先选取TP53基因的一段300 bp长度的序列作为标准物质的目标序列,以数字PCR方法为研究方法...
该文研制一种低浓度水平的短链DNA标准物质,用于低浓度水平ctDNA检测过程的量值溯源,重点对低浓度水平的短链基因标准物质的定值方法进行研究。首先选取TP53基因的一段300 bp长度的序列作为标准物质的目标序列,以数字PCR方法为研究方法,优化引物探针设计,通过考察PCR扩增的效率可以达到98.6%,满足数字PCR方法扩增的要求;然后采用转基因玉米NK603质粒分子国家标准物质验证数字PCR方法定值的准确度和精密度;其次考察数字PCR方法定量低浓度短链DNA标准物质TP53的重复性和重现性分别为2.99%和5.23%;最后采用数字PCR方法8家单位联合定值确定标准物质TP53的终浓度为(613.85±9.12)copies/μL(k=2),实现了对低浓度水平短链DNA标准物质的定值。
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关键词
DNA标准物质
TP53基因
低浓度水平
数字PCR法
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职称材料
题名
数字PCR法定量低浓度水平短链DNA标准物质的研究
被引量:
7
1
作者
闻艳丽
梁文
刘刚
机构
上海市计量测试技术研究院化学与电离辐射计量研究所
出处
《中国测试》
CAS
北大核心
2020年第1期44-49,共6页
基金
“国家质量基础的共性技术研究与应用”重点专项(2017YFF0204605)
国家自然科学基金面上基金(21775104)
文摘
该文研制一种低浓度水平的短链DNA标准物质,用于低浓度水平ctDNA检测过程的量值溯源,重点对低浓度水平的短链基因标准物质的定值方法进行研究。首先选取TP53基因的一段300 bp长度的序列作为标准物质的目标序列,以数字PCR方法为研究方法,优化引物探针设计,通过考察PCR扩增的效率可以达到98.6%,满足数字PCR方法扩增的要求;然后采用转基因玉米NK603质粒分子国家标准物质验证数字PCR方法定值的准确度和精密度;其次考察数字PCR方法定量低浓度短链DNA标准物质TP53的重复性和重现性分别为2.99%和5.23%;最后采用数字PCR方法8家单位联合定值确定标准物质TP53的终浓度为(613.85±9.12)copies/μL(k=2),实现了对低浓度水平短链DNA标准物质的定值。
关键词
DNA标准物质
TP53基因
低浓度水平
数字PCR法
Keywords
DNA reference material
gene TP53
low concentration level
digital PCR
分类号
TB99 [机械工程—测试计量技术及仪器]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
数字PCR法定量低浓度水平短链DNA标准物质的研究
闻艳丽
梁文
刘刚
《中国测试》
CAS
北大核心
2020
7
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