低温α-淀粉酶产生菌GS230发酵条件与酶学性质研究

对分离自连云港海域的低温α-淀粉酶产生菌Pseudoalteromonas sp.GS230进行了产酶条件的优化和酶学性质的研究。结果表明,该酶在0.4%可溶性淀粉、0.25%牛肉膏、1.5%蛋白胨以及5%接种量、培养32 h产酶量达到最高。对低温α-淀粉酶性质进行研究发现,该酶的最适作用温度和pH值分别是30℃和pH 8.0、0℃时相对酶活达28%。对酶稳定性的研究发现,该酶对热敏感,30℃半衰期为1.5h,Ca2+可以提高酶的稳定性;在反应体系中添加5 mmol/L Ca2+,30℃保温1.5h,残余酶活达93%。Na+、K+、Ca2+等对酶有激活作用,而Pb2+、Cu2+、Fe3+等强烈抑制酶活性。

高黎贡山土壤低温淀粉酶产生菌的筛选

为获取工业生产上有潜在应用价值的低温淀粉酶产生菌,从高黎贡山百花岭南斋公房采集的土样中定向筛选得到10株产淀粉酶菌株,选择其中透明圈有效值最大的GD-6菌株进行摇瓶发酵。结果表明,该菌株最适产酶温度为20℃,最佳产酶pH为7.0,160 r/min摇瓶培养24 h后,产酶活性为420.9IU/(mL·min)。

耐高温α-淀粉酶产生菌 B.sp-JF_1 的诱变选育

通过采用紫外线（ＵＶ）、亚硝基胍（ＮＴＧ）和甲基磺酸乙酯（ＥＭＳ）等理化方法对可产生耐高温α－淀粉酶的高温菌Ｂａｃｉｌｕｓｓｐ－ＪＦ１进行诱变选育，得到酶活提高为原菌２．２３倍的一株突变株，命名为Ｂａｃｉｌｕｓｓｐ－ＪＦ１ＵＥＮ－Ｔｒｒ－３。

土壤中产α-淀粉酶菌株的分离和筛选

目的:从土壤中筛选产α-淀粉酶活力较强的菌株并对其酶学性质进行初步研究。方法:结合选择性分离培养,碘液检测法,酶活力测定和形态学检测等方法从土壤中分离出产酶活力较强的菌株,并对其所产α-淀粉酶的最适反应温度和pH值进行研究。结果:共分离到4株能产α-淀粉酶的菌株,其中菌株4产酶活力最高。该菌株所产α-淀粉酶最适反应温度为50～60℃,最适pH值为6.2。结论:分离到1株产α-淀粉酶酶活力较强的芽孢杆菌,所产α-淀粉酶属于中温淀粉酶,最适pH值为6.2。

去甲基万古霉素菌种低温冷冻、冷干保藏条件优化及10年菌种保藏效果

【目的】针对去甲基万古霉素产生菌不耐保藏的问题,改进菌种保藏方法,对超低温液氮保藏、-80°C低温冷冻保藏、冷干保藏方法跟踪考察10年保藏稳定性,评价不同保藏方法对去甲基万古霉素产生菌的保藏适用性。【方法】采用甘油作基础保护剂进行超低温液氮保藏和-80°C低温冷冻保藏,采用脱脂牛奶作基础保护剂进行冷干保藏,针对超低温液氮保藏进行降温速率考察,研究非渗透性冷冻保护剂海藻糖、聚乙烯吡咯烷酮(PVP)等对3种保藏方法的冻存影响,对优选出的保藏方法进行10年跟踪考察。【结果】3种保藏方法冻后菌种存活率依次为:-80°C低温冷冻保藏>超低温液氮保藏>冷干保藏。液氮保藏最适降温速率为快速冷冻。优选出最佳保护剂配方:超低温液氮保藏为甘油8.0%,海藻糖3.5%;-80°C低温冷冻保藏为甘油6.0%,PVP 5.0%;冷干保藏为脱脂牛奶,6.0%海藻糖。采用优化保藏条件,液氮保藏10年存活率稳定在70.6%,菌种发酵水平为入藏水平的92.9%。【结论】在优化条件下,尤以超低温液氮保藏适合于去甲基万古霉素产生菌长期保藏。