低温乙醇工艺各组分血浆蛋白含量检测分析

目的分析低温乙醇工艺分离血浆蛋白过程中各组分特定蛋白的含量,评价现有工艺能力,为后续工艺改良和产品质量提升提供支持。方法生产过程中,对每一步血浆蛋白分离产生的组分沉淀和上清进行取样,检测各种血浆蛋白含量,分析不同血浆蛋白在分离制作过程中的动态变化。结果在现有工艺条件下,人血白蛋白收率较高,各步骤损失较少;IgG在FⅢ制作过程中有超过20%的损失;IgA和可能导致IgG裂解的纤溶酶原均主要在FⅢ制作过程中被去除;FⅠ、FⅣ和FⅢ制作工序可实现不同血浆蛋白的选择性分离。结论现有低温乙醇工艺可以实现人血白蛋白的高收率生产,而人免疫球蛋白类制品收率在FⅢ制作过程损失较大,但FⅢ制作过程可有效去除IgA和纤溶酶原。

人血白蛋白低温乙醇工艺中脂蛋白的残留分析

目的分析本公司用低温乙醇工艺从合格原料血浆到人血白蛋白成品分离过程中脂蛋白的残留量。方法使用日立7600-ISE(2P)全自动生化分析仪,分别对原料血浆、分离过程、纯化过程以及人血白蛋白成品留样检测。结果所检测的几种脂蛋白经过组分Ⅰ+Ⅱ+Ⅲ、组分Ⅳ分离过程基本被去除,经进一步纯化后制品中脂蛋白残留量为零。结论本公司生产的人血白蛋白成品未检测出残留脂蛋白。

低温乙醇工艺去除人细小病毒B19能力分析

目的分析低温乙醇工艺及压滤技术在分离血浆蛋白制品时对人细小病毒B19（human parvovirus B19）的去除能力。方法收集采用低温乙醇工艺及压滤技术生产血浆蛋白制品时的主要工艺过程样品,定量检测合并血浆B19含量,并对B19含量≥10~3 IU/ml的合并血浆所对应的过程样品进行B19定量检测,分析主要工艺过程对B19病毒的去除能力。结果合并血浆至F_（Ⅰ＋Ⅱ＋Ⅲ）上清阶段以及F_（Ⅰ＋Ⅱ＋Ⅲ）沉淀溶解液至F_（Ⅰ＋Ⅲ）上清阶段能去除〉4 log的B19病毒,F_（Ⅰ＋Ⅲ）上清至IVIG阶段能去除〉2.86 log的B19病毒。结论低温乙醇工艺及压滤技术在分离人血白蛋白和免疫球蛋白中对B19病毒具有良好的去除能力。低温乙醇工艺配合产品后期的病毒去除/灭活技术可有效保证人血白蛋白和免疫球蛋白的B19病毒安全性,但对因子类产品则需控制合并血浆的B19病毒载量,以保证制品的B19病毒安全性。

人血高密度脂蛋白制备新工艺

以血浆制备白蛋白 (Cohn 6法 )后所产生的 F - 1沉淀为原料 ,采用低温乙醇工艺 ,经过 3步分离纯化 ,再用截留分子量 5 0 k D的超滤膜超滤脱醇浓缩后 ,加入 (10± 1) %(g/ m l)蔗糖作保护剂进行巴斯德病毒灭活 ,制得人血高密度脂蛋白。制品经 SDS- PAGE显示 ,纯度 85 %～ 95 %,载脂蛋白 A 分子量 2 7.3k D,活性 4.0× 10 6u/ g蛋白以上 ,载脂蛋白 A 回收率在 6 0 %以上。

血浆蛋白分离组分沉淀物料平衡限度的建立

目的:建立低温乙醇工艺生产血液制品过程中各组分沉淀物料平衡限度范围。方法:根据2015-2018年连续生产的91批人血白蛋白及静注人免疫球蛋白(pH4)过程中各组分沉淀产出量,计算出单位重量血浆产出各组分沉淀的产出率,确定组分沉淀物料平衡限度,计算公式为:血浆量(kg)×(-Х±3SD)。结果:FⅠ,FⅡ+Ⅲ,FⅢ,FⅡ,FⅣ,FⅤ沉淀量的物料平衡范围分别为血浆量×(0.07187±3×0.00228)、血浆量×(0.09383±3×0.00193)、血浆量×(0.07419±3×0.00267)、血浆量×(0.02560±3×0.00238)、血浆量×(0.08601±3×0.00393)、血浆量×(0.10218±3×0.00187)。结论:低温乙醇工艺分离血浆蛋白过程中,各组分沉淀产出量均在物料平衡限度范围内,建立了组分沉淀量的物料平衡检查方法,对提高血液制品的质量控制具有重要意义。

静注人免疫球蛋白生产工艺对凝血因子Ⅺ的去除效果

目的评价低温乙醇及压滤生产工艺对静注人免疫球蛋白(intravenous immunoglobulin,IVIG)中凝血因子Ⅺ(FⅪ)的去除效果。方法取9批次低温乙醇工艺不同阶段分离的血浆蛋白及3批次FⅡ沉淀精制和制剂阶段的样品,采用部分凝血酶时间(nonactivated partial thromboplastin time,NAPTT)试验检测样品中FⅪ的含量。结果FⅠ+Ⅱ+Ⅲ分离对FⅪ的去除效率约为6%,FⅠ+Ⅲ分离对FⅪ的去除效率约为154%,FⅡ分离对FⅪ的去除效率约为10%。半成品中FⅪ含量稳定,且均低于30 mIU/mL。结论低温乙醇及压滤生产工艺能稳定有效地去除IVIG中的FⅪ,确保产品质量安全。