用K4M低温包埋剂和紫外线低温包埋机联合的免疫电镜法

目的研究低温包埋剂及其聚合的环境对免疫电镜技术的重复性和稳定性的意义。方法利用低温包埋剂Lowicryls K4M和紫外线低温包埋机(SPI#17020)处理免疫电镜组织标本。结果观察到组织的超微结构和抗原性保存完好。结论低温包埋剂Lowicryls K4M和紫外线低温包埋机的结合使用能较好地应用在免疫电镜技术中。

细胞内病毒抗原定位的低温包埋及胶体金标记

本文报告使用低温包埋剂Lowicryl K4M对感染细胞进行低温包埋和制作超薄切片,用包被SPA或IgG的胶体金作为第二抗体,采用间接法对两种RNA病毒(脊髓灰质炎病毒和轮状病毒)和两种DNA病毒(单纯疱疹Ⅰ型病毒及SV_(40))在感染细胞中作了定位标记实验。将结果同常规环氧树脂Epon 812包埋的感染细胞包埋前穿透标记和包埋后超薄切片标记进行比较。常规包埋法对细胞超微结构保存良好,但由于高温聚合对病毒抗原活性破坏较大,不能获得理想的金标记结果。使用皂角甙(Saponin)改变细胞膜进行包埋前穿透标记,虽能获得特异性标记,但皂角甙对细胞膜结构破坏严重,不利于进行病毒与细胞相互作用关系的研究,且作用条件及时间不易掌握。以上缺点可通过使用低温包埋法得到解决。

碳钢粉末包埋低温渗铝工艺的研究进展

在碳钢表面制备Fe-Al涂层,可有效提升碳钢的抗氧化性、耐腐蚀性和耐磨性等。目前,包埋低温渗铝在工业生产中应用广泛。介绍了粉末包埋渗铝的基本原理,分析了低温渗铝的机理。综述了渗铝配方和表面机械能助渗铝对低温渗铝的影响。同时,对碳钢粉末包埋低温渗铝的研究提出展望。

低温助渗剂Zn对N80套管钢低温渗铝层组织的影响

选用不同Zn含量配比的包埋渗剂,采用低温粉末包埋法对N80套管钢进行表面渗铝处理,依次对不同渗剂配方下所得到渗层的微观形貌、元素组成和显微硬度进行测试,分析了低温助渗剂Zn对所得渗铝层的影响。结果表明:与渗剂中添加Zn所得渗铝层相比,未添加Zn所得渗铝层均匀、致密,显微硬度较高;渗铝层厚度随Zn含量的改变呈现非线性的变化,当Zn∶Al=40∶60(质量比)时,所得渗铝层的厚度可以达到80μm;不同渗剂配比下所得渗铝层主要由Al元素和Fe元素组成,渗层组织从表面向基体方向Al含量呈梯度减少,当渗剂中加入助渗剂Zn后易生成富含低铝相渗层。

地高辛标记探针电镜原位杂交技术探讨

应用ＬｏｗｉｃｒｙｌＫ４Ｍ低温包埋，Ｄｉｇ标记ｃ－ｆｏｓｃＤＮＡ探针对人肝癌组织进行原位杂交，用金标抗Ｄｉｇ抗体进行检测，银增强放大信号处理。电镜观察表明，免疫胶体金颗粒特异性地标记在肝癌细胞胞浆及核内，呈散在分布，金颗粒大小基本一致，背景清晰。

流行性出血热患者活检肝脏的抗原定位和超微病理研究

采用免疫胶体金标记技术和低温包埋与常规电镜观察相结合的方法,研究了EHF患者活检肝脏标本,首次发现肝细胞内的EHF病毒,证实病毒可侵袭肝实质细胞。在早期患者肝狄氏间隙内见到Ag-Ab复合物,认为早期患者体内也存在免疫复合物反应。同时发现以肝细胞膜、内质网、线粒体等膜性结构损伤为特征的细胞损害,证明了病毒对肝脏的直接损伤作用。由此对EHF的发病机理提出了新的学说。

不脱钙骨组织免疫组织化学与原位杂交的方法研究

目的 :探讨在低温塑料包埋制备的不脱钙骨切片上运用免疫组化和原位杂交技术的可行性。方法 :采用改进的甲基丙稀酸甲酯低温塑料包埋法包埋SD大鼠胫骨近端 ,制备不脱钙的骨组织切片。切片行Goldner′s三色法染色观察骨小梁结构 ;采用免疫组化SABC法和原位杂交技术检测骨组织细胞中胰岛素样生长因子 1(IGF 1)mRNA和蛋白表达。结果 :三色法染色示骨小梁结构完整 ,部分骨小梁边缘可见红染的类骨质 ,成骨细胞与破骨细胞清晰可见。免疫组化和原位杂交示IGF 1mRNA和蛋白表达于成骨细胞 骺板软骨细胞及骨髓腔中部分单核细胞的胞浆中。此外 ,在骨小梁基质中也可见IGF 1蛋白的阳性表达。结论 :利用低温塑料包埋制备的不脱钙骨切片可同时进行免疫组化和原位杂交检测观察 ,该方法为骨质疏松等代谢性骨病的分子病理学研究提供了有效的技术平台。

农业其他

902500 经免疫电子显微镜接高压冰冻、冰冻取代和低温包埋研究外源蛋白在转基因植株中的原位定位[英]/Hippe,S.…//Eur.J.Cell Biol.-1989,50(1).