细胞外钙调素对百合花粉细胞内钙离子浓度的影响

以川百合 (LiliumdavidiiDuchartre)花粉为材料 ,利用低温装载法在完整花粉粒中成功地装载了酯化形式的钙离子荧光指示剂fluo_3AM ,利用激光共聚焦显微技术研究了细胞外钙调素对细胞内游离钙离子浓度的影响。结果发现外源纯化钙调素可以使细胞内游离钙离子的浓度升高 ,在一定范围内促进效果与钙调素浓度呈正相关。不能透过细胞膜的钙调素拮抗剂W7_agarose和植物钙调素抗血清处理都可以使花粉细胞质中游离钙离子浓度降低 。

杂种鹅掌楸花粉发育过程中细胞游离Ca^(2+)的动态变化

利用钙离子荧光探针Fluo-3/AM低温装载技术,在激光扫描共聚焦显微镜下观察杂种鹅掌楸花粉发育不同阶段细胞内游离Ca2+的分布,以其相对荧光强度的强弱来衡量细胞内游离Ca2+水平的动态变化。研究发现在初生造孢细胞中Ca2+荧光较弱,次生造孢细胞和小孢子母细胞时期Ca2+荧光增强。早期四分体小孢子细胞质中Ca2+荧光强度较强,胼胝质壁无荧光;后期细胞质中的Ca2+荧光减弱,而胼胝质壁处Ca2+荧光增强。小孢子内Ca2+分布不均匀,细胞质中的Ca2+荧光较弱,细胞壁处Ca2+荧光较强,二细胞花粉时期,细胞呈现较强的Ca2+荧光。在花药壁组织内Ca2+分布也呈现规律性的变化:造孢组织时期,花药壁组织Ca2+荧光强度在不同壁层组织中分布均匀;小孢子母细胞时期,药壁中层细胞Ca2+荧光最强,绒毡层细胞次之;单核小孢子时期,绒毡层细胞呈解体状态,Ca2+荧光最强,并保持到二核花粉时期直至绒毡层完全消失,但此时花药纤维层发育形成,表现出较强的Ca2+荧光。花药组织中Ca2+分布动态显示出Ca2+由外而内流动的迹象,而且细胞内游离Ca2+分布特征与花粉发育过程的重要转变环节密切相关。

镉对油菜花粉细胞内钙离子浓度的影响

应用激光扫描共聚焦显微系统(LSCM)和fluo-3 AM荧光探针标记技术,观察了不同浓度Cd2+对油菜花粉细胞内游离Ca2+的影响。发现油菜花粉经水合培养后,胞内Ca2+呈极性分布,萌发沟附近浓度较高,花粉管萌生部位浓度最高;胞外环境中Cd2+可使细胞内游离Ca2+的浓度升高,表明油菜花粉受重金属Cd2+毒害后,可通过调动胞质内游离Ca2+的变化而做出对外界刺激的应答。这一实验结果为探索重金属对植物的毒害机理提供了新的证据。