基于流式细胞仪鉴定马铃薯倍性的高通量样品制备方法

【目的】染色体倍性鉴定是马铃薯种质资源评价的重要内容。建立马铃薯染色体倍性的高通量样品制备方法,可为后续大规模开展马铃薯倍性鉴定工作奠定基础。【方法】以30份马铃薯孤雌生殖诱导后代作为实验材料,比较使用低温钢珠打样法、液氮研磨法和刀片切碎法制备细胞核悬液的效果,并对已知二倍体马铃薯IVP101和四倍体马铃薯HTJ349-3进行倍性鉴定。【结果】低温钢珠打样法制备的细胞核悬液,荧光信号明显,细胞裂解充分,杂质少。同时,由于低温钢珠打法简单易操作,大大缩短了样品制备时间,其鉴定效率比起液氮研磨法提高45-60倍,比刀片切碎法提高105-180倍。利用该方法可以准确检测出马铃薯IVP101和HTJ349-3的染色体倍性。【结论】基于流式细胞仪的低温钢珠打样法,其检测结果同液氮研磨法、刀片切碎法制样方法一样准确,可实现高通量鉴定马铃薯染色体倍性。