利用低熔点琼脂糖纯化DNA转化粗糙脉孢霉

本文报道了利用低熔点琼脂糖纯化ＤＮＡ转化粗糙脉孢霉的方法，这个方法快速、高效，纯化ＤＮＡ还可用于限制酶切、修饰反应。

低熔点琼脂制备果冻的研究

琼脂是生产果冻的一种主要胶体原料,普通琼脂需加热到90℃以上才溶解,不方便在果冻生产中使用。用低熔点琼脂替代普通琼脂,与其他食品胶体复配后制备果冻样品,并对其进行感官检验和质构特性分析,研究用低熔点琼脂生产果冻的可行性。优化得到果冻胶体配方为:低熔点琼脂0.60%,魔芋胶0.40%,Kappa卡拉胶0.16%,Iota卡拉胶0.50%和高酯果胶0.60%。采用该配方,无论是羧甲基法还是热变性法生产的低熔点琼脂均能制备得到与商业果冻产品感官和质构性质类似的果冻样品。本研究说明,低熔点琼脂可当作果冻生产的胶体原料使用,为创新果冻生产工艺及提高果冻品质提供实验参考。

实现PCR热启动的一种简便实验室技术

将Taq酶加入热的低熔点琼脂糖凝胶中,趁热将液态的凝胶加入扩增管底部,待凝胶冷却凝固后,Taq酶便得以包埋。扩增过程中只有当温度升高至70℃以上时,凝胶才能融化释放Taq酶,从而实现PCR过程中的热启动。这一方法简单方便、节约经费,是一种值得在实验室大力推广的实用技术。

脉冲电泳技术及其应用

叙述了分离大分子DNA的脉冲电泳技术原理、装置及其实际应用的经验。

脉冲场凝胶电泳技术及应用

脉冲场凝胶电泳(PFGE)是一种重要的用于分离大分子量线状DNA的电泳技术。介绍了PFGE的基本原理、方法、影响因素,并对其在微生物分子分型、DNA辐射损伤修复、细胞凋亡和转基因技术等研究方面的应用作了简要的综述。

凝胶内长片段基因克隆的实验方法研究

目的量少、片段长的目的基因受纯化回收效率低的影响而难于克隆,本实验的目的是探索快速高效克隆量少,片段长DNA的实验方法。方法以lnc RNA AL110200 5’RACE大片段PCR产物为目的基因,应用高纯度、高分辨率的低熔点琼脂糖,分离得到含5.0 kb和2.0 kb的凝胶,直接用于连接和转化反应,通过克隆PCR和Sanger测序法鉴定克隆的正确性。结果经测序验证了5.0 kb和2.0 kb重组克隆的正确性,说明应用高纯度的低熔点琼脂糖凝胶可以快速克隆长达5.0kb基因片段。结论该方法是一种省时、高效、易行的长片段基因克隆方法。