一例驼鸟低致病性禽流感病毒与沙门菌、产气荚膜梭菌混合感染的诊治

禽流感病毒可感染鸡、火鸡、鸭、鹅、麻雀、雉鸡、鹧鸪、驼鸟、孔雀、鸽子等多种家禽和野禽。高致病性禽流感是由A型正黏流感病毒引起的一种以导致呼吸系统症状及严重败血症为主要临床症状的传染病,病原主要是H5和H7亚型禽流感病毒。低致病性禽流感是由正黏病毒H9亚型弱毒株引起的,常伴随大肠杆菌、沙门菌等病原微生物的混合感染。

低致病性禽流感H9的诊断和治疗措施

中科基因诊断中心有限公司、全国大专院校、检测公司近几年对家禽疫病的持续监测结果表明,当前影响家禽最重要的传染病是病毒性疾病,约占监测总数的85%。其中禽流感、传染性支气管炎病、传染性喉气管炎病、新城疫和腺病毒成为重点传染病。低致病性禽流感H9疫情蔓延最广,造成的经济损失最多。

1株具有预防低致病性禽流感作用的植物乳杆菌BLCC2-0125应用研究

为验证1株保藏的具有较强免疫功能的植物乳杆菌在预防低致病性禽流感方面的作用,以图有效防控H9N2禽流感的流行;本研究在口服及喷雾植物乳杆菌BLCC2-0125后,进行了H9N2病毒的攻毒,通过肠黏膜sIgA抗体、气管黏膜sIgA抗体、血清IgG抗体水平、IFN-γ水平及H9抗体对口服及喷雾免疫BLCC2-0125后效果进行了综合评价;结果发现,BLCC2-0125口服及喷雾的使用方式能够快速有效诱导高水平肠黏膜sIgA及气管黏膜sIgA的产生,并诱导了细胞因子的产生,激活了细胞免疫反应,同时还能够促进体液免疫的产生,IgG和高水平的血清H9抗体可中和侵入机体的病毒,以弥补对二十多日龄肉鸡全身禽流感抗体缺乏期的保护;因此BLCC2-0125可以提供黏膜免疫、细胞免疫及体液免疫的综合保护,为机体在病毒感染早期提供强有力的保障,为更有效的诱导全身免疫反应提供了基础,对综合防治低致病性禽流感具有重要的意义。

2014一2022年上海市宝山区低致病性禽流感病毒H9亚型流行情况的调查分析

为掌握2014-2022年上海市宝山区低致病性禽流感病毒H9亚型流行情况和分布状况,对宝山区活禽市场、家禽养殖户和珍禽养殖园等场所开展禽流感病毒H9亚型病原学检测数据分析。结果显示:宝山区低致病性禽流感病毒H9亚型阳性率有上升趋势,季节性分布明显,秋、冬季节阳性率较高。本调查结果反映了宝山区低致病性禽流感病毒H9亚型病原学检测情况,可为低致病性禽流感病毒H9亚型的预警和防控提供参考。

2002—2009年中国华东地区家禽低致病性禽流感的病原学检测与分析

【目的】为确定中国华东地区家禽中禽低致病性禽流感(Low pathogenic avian influenza,LPAI)的流行和分布状况。【方法】2002年7月至2009年9月在江苏省扬州市活禽市场(live poultry markets,LPMs)采集来自不同省份的家禽泄殖腔拭子11 645个,用鸡胚尿囊腔传代接种法分离病毒,进行了长达8年的LPAI的病毒学监测。【结果】禽流感阳性样品1 158个,总分离率9.94%。所分离到的亚型及各亚型分离率从高到低依次为H3、H6、H11、H1、H4、H9、H10、H8。【结论】禽流感的分布季节性非常明显,以冬、春为高,各亚型又有其不同分布特点。到目前为止,已经从家鸭中分离到8种HA亚型,依次为H1、H3、H4、H6、H8、H9、H10、H11;7种NA亚型,包括N1、N2、N3、N4、N5、N6、N8,两者之间有17种组合,与野鸭的带毒情况十分相似。家鸭还很容易发生混合感染,2007年以来以H6亚型为主,H3、H11、H4、H9等很多亚型都可与其混合感染,这为禽流感病毒(avian influenza viruses,AIVs)基因重组产生新的亚型及毒力的变异提供了很好的载体。

2006--2008年华东地区家禽不同HA亚型低致病性禽流感的病原学监测

目的采用血清学试验和RT-PCR方法在2006-2008年5月期间从华东地区家禽中分离到473株禽流感病毒(AIVs),其中家鸭AIVs的分离率最高(14.7%),鸡AIVs分离率最低(2.92%)。共分离到H1、H3、H4、H6、H9、H10、H11七种HA亚型低致病性禽流感病毒(LPAIVs),其中H3亚型LPAIVs在家禽中的分布占优势。禽流感病毒的分离呈现一定的季节性,一般春秋冬三个季节分离率相对较高。

华东地区家禽低致病性禽流感的病原学检测与带毒情况的分析

从2008年10月到2009年9月采集不同家禽的泄殖腔拭子共2420个,禽流感阳性样品178个,分离到AIVs毒株83株,总分离率7.36%。所分离到的亚型及各亚型分离率从高到低依次为H6、H3、H4、H9、H11、H1、H8。禽流感的分布季节性非常明显,以冬、春为高,各亚型又有其不同分布特点。水禽被认为是流感病毒的重要宿主,尤其是家鸭。到目前为止,作者已经从家鸭中分离到8种HA亚型,依次为H1、H3、H4、H6、H8、H9、H10、H11,7种NA亚型,包括N1、N2、N3、N4、N5、N6、N8。两者之间有18种组合,与野鸭的带毒情况十分相似。家鸭还很最容易发生混合感染,并以H6亚型为主,很多亚型都可与其混合感染,尤其是H3、H9亚型,这为基因重组产生新的亚型及毒力的变异提供了好的载体。

低致病性禽流感病毒与禽病原性大肠杆菌的联合感染试验

以10^(5.17)ELD_（50）的低致病性禽流感病毒(mildlypathogenic avian influenza virus,MPAIV)气管内注射10日龄SPF鸡,24h后,重复感染一次;48h后,气管内注射禽病原性大肠杆菌353(018)、120(018)、037(078)、166(078)、058(02)、536(088)、132(011)和173(026)株,3×10~7CFU/羽,连续观察5d.结果:MPAIV单独感染组死亡率为13.33%;各大肠杆菌单独感染组的死亡率分别为353:100.00%、120:60.00%、037:80.00%、166:86.67%、058:100.00%、536:93.33%、132:86.67%和173:20.O0%;MPAIV与上述各分离株的联合感染组的死亡率分别为100.00%、93.33%、86.67%、93.33%、100.00%、100.00%和100.00%.

高致病性与低致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒二重RT-PCR检测方法的建立及应用

为建立高致病性与低致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒(HP/LP-PRRSV)快速鉴别诊断方法,本研究根据GenBank已登录的HP-PRRSV与LP-PRRSV的Nsp2基因序列,分别设计了特异性的上游引物(HP-Upper-p1/LP-Upper-p2)和共用下游引物(Co-Lower-p3)。以HP-PRRSV和LP-PRRSV混合物总RNA为反转录模板,建立了HP-PRRSV和LP-PRRSV的二重RT-PCR检测方法;并进行了特异性、敏感性和重复性试验;利用所建立的检测方法对临床疑似样品进行了检测。结果显示,本试验成功建立了HP-PRRSV和LP-PRRSV二重RT-PCR检测方法,该方法灵敏度高,最低检出限均为100拷贝/μL;重复性好,特异性强,可特异性地扩增HP-PRRSV细胞培养物和LP-PRRSV疫苗毒,但对Marc-145细胞和其他8种病原对照扩增不出任何条带;自25份临床疑似PRRSV感染病料中共检测出了21份PRRSV阳性样品,其中HP-PRRSV阳性样品共计20份,LP-PRRSV阳性样品4份。结果表明,本研究成功建立了HP-PRRSV和LP-PRRSV二重RT-PCR检测方法,可适用于高致病性与低致病性猪繁殖与呼吸综合征的快速鉴别诊断。

2016～2017年防城港市活禽市场低致病性禽流感病毒监测分析

为了解中越边境地区活禽市场低致病性禽流感病毒(Low pathogenic avian influ-enza virus,LPAIV)的分布情况,从2016年10月至2017年9月在防城港市不同活禽市场共采集家禽口腔/泄殖腔棉拭子876份,采用鸡胚接种进行病毒分离,然后通过HA和HI试验对分离结果进行鉴定。结果显示LPAIV样品阳性数为41份,阳性率为4.68%。同时发现LPAIV季节分布较为明显,冬春季分离率较高。分离的LPAIV中以H6、H9、H3、H1、H4亚型为主。鸡、鸭、鹅样品中LPAIV的分离率分别为3.91%、8.82%和16.67%。不同种属家禽LPAIVs的分离率存在差异,水禽LPAIV分离率明显较高。研究结果显示活禽市场是LPAIV的一个重要存储库,加强活禽市场禽流感病毒监测对禽流感的防控及公共卫生安全具有重要意义。

环洞庭湖区鸭场低致病性禽流感监测分析

为了解环洞庭湖区鸭场低致病性禽流感隐性带毒情况,2011~2012年先后3次对东洞庭湖、南洞庭湖和西洞庭湖区的149个鸭场进行监测,在40个鸭场检测到低致病性禽流感病毒,场间阳性率为26.8%,其中有2个鸭场混合感染多种低致病性禽流感病毒。在鸭拭子和环境拭子中共分离到有H3、H4、H6、H9、H10、H11和H12等7种亚型的低致病性禽流感病毒,其中H3和H4亚型的分离率较高,拭子的病毒分离率为3.88%,表明在洞庭湖区鸭场低致病性禽流感隐性带毒情况较为严重。

山西省低致病性禽流感病毒检测及基因分析

在山西主要养鸡区规模化养鸡场采集病死或扑杀鸡的喉气管、脑、胸肌、心肌和肺组织等;活禽静脉采集血液、气管拭子或泄殖腔拭子,雏禽采集新鲜的粪便等,共采集疑似低致病性禽流感样品608份。经血凝试验、血凝抑制试验及RT-PCR鉴定,并进行HA基因测序和核苷酸序列同源性分析。结果显示,疑似样品中有68份含有禽流感病毒,其中65份属于H9亚型,各样品毒株间HA基因核苷酸序列同源性为96.5%~98.1%,与我国现有疫苗的HA基因核苷酸及部分现有毒株序列同源性为88.9%~93.8%,说明HA基因已发生较大的遗传漂变。

2015—2019年广西柳州市活禽市场低致病性禽流感病毒监测

为了解广西柳州市活禽市场低致病性禽流感病毒的流行及分布情况,2015年6月—2019年5月持续在柳州市8个活禽市场采集鸡鸭喉头/泄殖腔棉拭子样品1 425份(麻花鸡500份、麻鸭925份),通过SPF鸡胚培养,采用HA和HI试验进行鉴定,并对结果进行统计分析。结果显示:共检出阳性样品156份,阳性率为10.95%(156/1 425);分离出6种亚型,阳性率从高到低依次为H3、H4、H9、H6、H11和H13,其中H13亚型为广西地区首次报道发现,样品来源于麻鸭;从种属分布和混合感染情况来看,鸭群中6种亚型均有感染,但以H3、H4亚型为主,主要表现为混合感染,而鸡群中只有4种亚型,以H9亚型为主。结果表明,柳州市活禽交易市场低致病性禽流感病毒亚型复杂,尤其是麻鸭,且有新亚型出现,病毒变异重组风险加剧,需要坚持活禽市场禽流感病毒长期监测。

传染性支气管炎病毒与低致病性禽流感病毒共感染增强鸡支气管堵塞的研究

为明确鸡支气管堵塞的发病原因,通过建立H9N2亚型、H7N9亚型低致病性禽流感病毒(LPAIV)以及传染性支气管炎病毒(IBV)单独或共感染SPF鸡的动物模型,对其临床症状、死亡率和组织病理变化进行分析。结果显示:H9N2和H7N9亚型LPAIV分别单独感染组在感染后仅引起轻微的一过性临床症状,未出现呼吸道症状,未观察到试验鸡的死亡;而IBV单独感染组及与LPAIV(H9N2 AIV、H7N9 AIV)共感染组均能引起鸡的呼吸困难、张口喘、支气管堵塞等严重的呼吸道症状,并造成鸡死亡。IBV与LPAIV共感染组鸡的死亡率(IBV+H9N2AIV:40%;IBV+H7N9 AIV:45%)明显高于IBV单独感染组(15%)。临床剖检病死鸡均可观察到组织学病变,其中共感染组发病鸡支气管堵塞更加严重。研究结果揭示了IBV与LPAIV共感染增强鸡支气管堵塞的现象,对鸡呼吸道感染的科学防控具有参考意义。

2013-2019年广西边境地区低致病性禽流感病毒监测分析

为了解广西边境地区低致病性禽流感病毒(low pathogenic Avian influenza virus,LPAIV)的流行情况,本研究对2013-2019年在广西边境地区的规模养殖场和活禽市场采集的33964份家禽棉拭子样品,采用鸡胚接种方法进行病毒分离,并结合血凝抑制试验和RT-PCR等方法鉴定禽流感病毒的亚型。结果显示,共有3892份样品分离到LPAIV,2013-2019年的样品病毒分离率分别为17.39%、11.23%、13.59%、9.31%、9.09%、9.12%和15.21%,总分离率为11.46%,其中2013年样品的病毒分离率最高。分离到的LPAIV包括H1、H3、H4、H6、H9、H10和H117种亚型,样品病毒分离率分别为0.14%、4.37%、0.19%、4.06%、2.69%、0.01%和0.003%。其中活禽市场分离到H1、H3、H4、H6、H9、H10和H117种亚型流感病毒,样品病毒分离率分别为0.19%、5.53%、0.21%、5.29%、3.41%、0.01%和0.004%,总分离率为14.64%;而养殖场分离到H3、H4、H6和H94种亚型流感病毒,样品病毒分离率分别为1.26%、0.12%、0.79%和0.78%,总分离率为2.95%,养殖场的分离率远低于活禽市场(14.64%)。鸡源样品的病毒分离率为5.77%,水禽样品的病毒分离率为15.10%,环境样品的病毒分离率为21.67%,水禽和环境样品的病毒分离率远高于鸡。结果表明,当前广西边境地区家禽携带多种亚型LPAIV,水禽是高风险禽群,应进一步加强监测和防控;活禽市场污染严重,应进一步加强对活禽市场的监管力度,建立和实施更加科学有效的活禽市场运营机制。

我国低致病性禽流感研究概况

近年的研究显示,我国H3、H4、H6、H9亚型等低致病性禽流感病毒的分离呈现上升的趋势,说明低致病性禽流感的感染越来越严重。从低致病性禽流感病毒分离株基因序列的研究来看,多种LP-AIV毒株之间发生了基因交换,尤其是内部基因之间的交换。同时也出现HP-AIV H5、H7亚型毒株与LP-AIV H9、H6亚型内部基因的交换,从而产生了危害更大的新毒株。2013年的H7N9亚型禽流感病毒片段重配研究结果显示,有6个基因片段源于H9N2亚型禽流感病毒,提示低致病性禽流感的危害越来越严重。

低致病性禽流感病毒对养禽业的危害

文章对致病性禽流感病毒的特性、对养禽业的危害以及致病性禽流感的预防作了综合性叙述,重点对低致病性禽流感病毒的危害、免疫抑制性、毒性的变异性作了叙述,对生产、科研具有一定的参考意义。

湖南省2015～2017年主要活禽批发市场低致病性禽流感病毒监测情况

为了解湖南省主要活禽批发市场低致病性禽流感病毒的流行情况,将采集的拭子样品接种鸡胚培养后,进行病毒分离,并结合血凝抑制试验和RT-PCR鉴定禽流感病毒的亚型。结果显示:在2015～2017年采样的3 208份拭子中分离出397株低致病性禽流感病毒,总分离率为12.37%,其中环境拭子中的低致病性禽流感病毒的分离率最高,达22.22%,其次是鸭拭子为11.62%,鸡拭子为10.70%。本试验共分离出H1、H3、H4、H6、H9、H10和H11共7种亚型的低致病性禽流感病毒,其中H9、H6和H3亚型分离率分别达到6.51%、2.21%和1.96%。监测表明:湖南省活禽批发市场中低致病性禽流感病毒隐性感染情况普遍存在。

孔雀低致病性禽流感病毒株的分离与鉴定

用鸡胚分离方法从发病孔雀脑组织中分离病毒；将分离病毒进行血凝试验、血凝抑制试验、致病指数试验和半数致死量试验。结果表明，该株病毒可凝集鸡红血球，血凝性可被已知的禽流感（H9N2）抗体所抑制，脑内致病指数在1．6-2．5范围内，半数致死量，致病指数为50％，表明该病毒为低致病力禽流感毒株。

低致病性禽流感所致产蛋下降的中药防治效果

低致病性禽流感不仅导致蛋鸡产蛋性能下降而且长时间难以恢复,已严重威胁蛋鸡养殖业健康发展。因此,研制恢复低致病性流感病后产蛋的有效中兽药,对蛋鸡养殖具有十分重要的意义。试验选用低致病性禽流感H9N2病愈后,产蛋不能回复的鸡群,连续7d在饲料中以日粮的1.0%添加中药复方(暂定名为红花益母增蛋散),观察其恢复产蛋性能的效果。试验随机分为3个处理,即红花益母增蛋散组、药物对照组和空白对照组。结果,红花益母增蛋散组平均净增产蛋率比空白对照组的平均净增产蛋率提高10.6%,差异显著(P<0.05)、比药物对照组的提高7.4%,差异显著(P<0.05);红花益母增蛋散组破、软蛋分别比药物对照组和空白对照组的降低66.7%和71.4%。试验结果,红花益母增蛋散防治禽流感所致的降蛋,具有良好的效果。