重组人粒细胞集落刺激因子对大鼠海马慢性持续性低血流灌注后的修复作用

目的通过对大鼠海马的持续性低血流灌注,观察大鼠海马CA1区锥体细胞、胶质细胞对粒细胞集落刺激因子(G-CSF)动员骨髓干细胞向中枢神经系统迁移的反应,探讨G-CSF对大鼠持续性低血流灌注状态下海马CA1区的病理学修复机制。方法建立大鼠持续性低血流灌注模型(2VO术),术后20周给予重组人粒细胞集落刺激因子(rhG-CSF)动员骨髓干细胞,应用免疫组织化学SP技术和图像分析技术,分析海马CA1区CD34阳性细胞、锥体细胞的数量及其分布状况、以及胶质原纤维酸性蛋白(GFAP)阳性细胞的数量和胞质突起的长度变化。结果连续给予rhG-CSF后大鼠海马CA1区可见CD34阳性细胞存在,提示其动员了骨髓干细胞向中枢神经系统迁移。相对于对照组(生理盐水治疗组),在持续性大脑低灌流状态下,大鼠海马CA1区锥体细胞数量明显增多,GFAP阳性细胞数量明显增多、其胞质突起分支增加、长度明显缩短。结论大鼠海马经持续性低血流灌注后,rhG-CSF可通过动员骨髓细胞向中枢神经系统的迁移,促进海马区锥体细胞、胶质细胞的增生或(和)激活,增强修复能力,为慢性持续性低血流灌注脑损伤的治疗提供了新的思路。

低血流灌注状态下的光电脉搏容积波降噪算法研究

目的设计一种降噪算法改善低血流灌注状态下提取的光电脉搏容积波信号质量。方法首先对原始信号进行经验模态分解(Empirical Mode Decomposition,EMD),计算各固有模态函数(Intrinsic Mode Function,IMF)的连续均方误差,判断噪声主导的IMF后对其进行小波阈值降噪,最后将信号重构即可得到降噪后的低灌注脉搏波。结果使用自行设计系统采集的低灌注脉搏波信号对上述算法进行验证:在灌注系数为0.15%时,该算法可有效抑制噪声干扰并还原脉搏波信号特征。结论该算法可有效改善低灌注状态下提取的脉搏波信号质量,有助于增加该状态下心率、血氧饱和度等生理参数的测量精度。

脑血流低灌注患者丁苯酞治疗前后DSA评估脑血管侧支循环变化

目的观察脑血流低灌注患者应用丁苯酞注射液前后脑血管造影评估侧支循环的变化。方法收集2019-07—2023-04在威海市立第三医院神经内科住院治疗的10例脑血管低灌注(主要指存在大血管狭窄或次全闭塞)患者,应用丁苯酞注射液前行数字减影血管造影(DSA)评估侧支循环情况,记录同时间节点的血管染色影像,完成后给予丁苯酞注射液10~14 d,再次行DSA评估侧支循环情况,并记录同时间节点的血管染色影像,对治疗前后的影像进行对比,观察用药前后侧支循环的变化。结果10例患者中分别选取5个时间节点的影像对比,50组中42组对比可见差异,主要表现为同范围内同一分支血管的粗细有改善,长度有增长。结论对于脑血流低灌注患者,应用丁苯酞注射液10~14 d前后脑血管造影对比,同供血范围内可发现分支血管增粗、变长,造影剂染色变深,侧支循环可出现不同程度的改善。

低灌注兔模型脑血流动力学的多层螺旋CT灌注成像研究

目的探讨多层螺旋CT在实验性低灌注兔模型脑血流动力学研究中的价值。方法健康新西兰大白兔16只,随机分成正常对照组6只及低灌注模型组10只。采用结扎双侧颈总动脉及右侧椎动脉的方法,创建实验性低血流灌注模型。所有兔在术后4-6小时行CT平扫选择显示上矢状窦最大的两个层面,经股静脉以2ml/s速率注入造影剂行头颅CT灌注扫描,经后处理获得灌注图像。对感兴趣区平均脑血流量、平均脑血容量及达峰时间等血流动力学参数进行测量与分析。取兔脑与CT灌注扫描相对应层面的切片行HE染色。结果低灌注模型组大白兔脑组织CBV为（20.43±2.88）ml·100mg^-1,CBF为（45.75±9.96）ml·min^-1·100mg^-1,TP为（2.61±0.29）s;正常对照组CBV为（33.37±11.06）ml·100mg^-1,CBF为（58.85±20.58）ml·min^-1·100mg^-1,TP为（2.08±0.20）s;统计学分析表明,两组研究对象间的三个参数均具有显著性差异,且TP对低灌注模型组脑血流动力学参数变化的反映更加敏感。结论结扎双侧颈总动脉及单侧椎动脉制作兔低血流灌注模型稳定可靠。经股静脉团注对比剂行CT灌注扫描可较敏感地反映低灌注模型脑组织的血流动力学状态,为缺血性脑梗死的早期预防和诊断、治疗提供重要信息。

小鼠慢性脑血流低灌注状态的行为学检测及病理学观察

目的观察小鼠慢性脑血流低灌注状态下行为学及其病理学变化。方法62只C57BL/6小鼠均分为模型组和假手术组。模型组:采用内径为0.18mm的微型弹簧圈套C57BL/6小鼠双侧颈总动脉,造成血管狭窄导致全脑血流低灌注状态;假手术组:仅暴露双侧颈总动脉,不圈套微型弹簧。在成模30d时两组各取8只小鼠,采用八臂迷宫实验检测小鼠认知功能的改变,并在成模7、14d和30d时分别处死动物,采用Kluver-Barrera染色观察神经纤维改变及免疫组化观察胶质细胞增生程度,同时用Evans Blue荧光观察血脑屏障通透性的变化。结果建模30d后模型组八臂迷宫实验工作记忆错误显著多于假手术组(P<0.05)。在成模7d时未见显著病理变化,在14、30d时观察到模型组脑白质区域神经纤维稀疏[胼胝体神经纤维损伤分级分别为(1.13±0.05)和(1.96±0.08),P<0.05],星形胶质细胞和小胶质细胞显著增生[胼胝体星型胶质细胞计数分别为(104.52±12.31)和(192.57±24.23),小胶质细胞计数分别为(98.25±15.27)和(172.36±18.29),P<0.01],EvansBlue荧光观察到脑内微血管血液成分外渗。结论慢性脑血流低灌注状态导致小鼠的认知功能下降、胼胝体等白质神经纤维稀疏及胶质细胞增生。

周细胞在慢性脑血流低灌注血-脑脊液屏障损伤中的作用

目的探讨慢性脑血流低灌注损伤对大脑皮质血-脑脊液屏障及周细胞的影响及可能机制。方法采用大鼠双侧颈总动脉结扎(two-vessel occlusion,2-VO)模型,手术后3、14和30 d检测脑血流量变化。采用荧光免疫组织化学法染色检测周细胞以及纤维蛋白原表达,原代培养周细胞进行细胞增生实验,透射电镜观察血-脑脊液屏障超微结构。结果各模型组均出现脑血流下降,30 d时脑血流仍显著低于对照组。各模型组均有不同程度的纤维蛋白原的血管外渗漏;电镜结果可见基底膜增厚、血管外周围间隙致密物质沉积、星形胶质细胞突起水肿和红细胞血管外渗漏。周细胞数量在术后3、14和30 d均增多;体外实验低浓度纤维蛋白原可促进周细胞增生,而高浓度(20 g/L)纤维蛋白原对周细胞有毒性作用。结论慢性脑血流低灌注破坏大脑皮质血-脑脊液屏障,刺激周细胞增生,纤维蛋白原的渗出可能是引起周细胞增生的主要原因。

脑血流低灌注老龄大鼠中脑皮质血流的改变与血清总胆固醇和高密度脂蛋白的动态变化

目的:通过建立脑血流低灌注模型,观察老龄大鼠脑血流的变化以及在脑血流低灌注下血清中总胆固醇(Total cholesterol,TC)和高密度脂蛋白(High density lipoprotein,HDL)的动态变化。方法:采用持久性双侧颈总动脉结扎法(2VO)致老龄大鼠脑血流灌注不足,测定术后7、14、21、28 d大鼠脑皮质血流;检测、比较术后不同时间段大鼠血清中TC和HDL浓度差异。结果:术后第14天大鼠脑颞区血流出现明显减少;术后21、28 d大鼠脑局部皮质血管有再生侧支形成,大鼠脑颞区血流仍未恢复;术后第14天血清中HDL、TC含量明显高于假手术组(P<0.05),随着缺血时间延长,又逐渐降低。结论:血清TC和HDL浓度在脑缺血灌注不足的不同时间段经历了先增强后减弱的动态变化,提示脑血流低灌注老龄大鼠因大脑血流灌注不足可出现体内胆固醇代谢失衡并出现应激调节现象。

慢性脑血流低灌注对大鼠脑内β-淀粉样肽的影响

目的研究慢性脑血流低灌注对大鼠脑内β-淀粉样肽（Aβ）及淀粉样前体蛋白（APP）表达和分布的影响。方法双侧颈总动脉结扎大鼠制作慢性脑血流低灌注动物模型,应用免疫组织化学方法检测皮质和海马CA1区APP、Aβ1-40、Aβ1-42的表达与分布;刚果红染色检测血管的淀粉样变;放射免疫分析法检测手术后10d、30d、90d和180d大鼠脑皮质及海马的Aβ含量;免疫印迹法检测大脑皮质和海马的APP含量。结果免疫组织化学染色显示低灌注90d模型组海马CA1区APP、Aβ1-40的表达较对照组明显增加（两者均P〈0.05）,低灌注180d模型组皮质和海马CA1区APP、Aβ1-40和Aβ1-42的表达均增加（除皮质Aβ1-40P〈0.01外,其余均P〈0.05）;Aβ1-40阳性反应产物均匀分布于胞质内,Aβ1-42阳性反应产物在神经元胞质内呈颗粒状聚集。刚果红染色显示,术后180d脑实质内小血管发生淀粉样改变。放射免疫分析法和免疫印迹法结果显示,大鼠术后90d海马Aβ和APP含量开始增高（两者均P〈0.05）,180d皮质Aβ和APP的含量增高（AβP〈0.05,APPP〈0.01）。结论慢性脑血流低灌注可引发大鼠脑内Aβ含量的升高,可能在阿尔茨海默病（AD）早期发病过程中有重要意义。

晚期糖基化终产物受体和低密度脂蛋白受体相关蛋白在慢性脑血流低灌注大鼠皮层和海马的改变

目的研究慢性脑血流低灌注对脑内受体介导的β-淀粉样肽（Aβ）转运蛋白晚期糖基化终产物受体（RAGE）和低密度脂蛋白受体相关蛋白1（LRP-1））含量及分布的影响。方法采用双侧颈总动脉永久性结扎大鼠模型,应用免疫组织化学和免疫印迹方法对脑内RAGE和LRP-1进行定位和定量检测。结果免疫组织化学结果显示,与对照组相比,RAGE在皮层及海马组织中血管内皮细胞上的表达从低灌注10d起增多,而神经元上表达从低灌注30d起减少,且这种变化一直持续到低灌注180d;LRP-1的分布变化则与之相反。免疫印迹结果显示,皮层和海马中RAGE含量在低灌注术后10d即开始明显增加,且在缺血的不同时间点与相应的对照组比较都明显增多（P〈0.05）;LRP-1变化较晚,在缺血180d时明显增多（P〈0.05）。结论慢性脑血流低灌注可使RAGE、LRP-1在脑组织中的表达增高,同时在神经元、血管中的分布发生改变,这种变化可导致Aβ在脑内的聚集,可能在阿尔茨海默病（AD）早期发病过程中起重要作用。

慢性脑血流低灌注大鼠血和脑内β-淀粉样肽的变化

目的研究慢性脑血流低灌注对大鼠血和脑内β-淀粉样肽(β-amyloid peptide,Aβ)含量的影响。方法老年(10月龄)雄性SD大鼠双侧颈总动脉结扎,分别于手术后10d、30d、90d和180d进行Morris水迷宫实验;用放射免疫分析法检测血清、大脑皮质及海马的Aβ含量;用Western blot方法检测大脑皮质和海马的β-淀粉样肽前体蛋白(β-amyloid precursor protein,APP)的含量。结果Morris水迷宫实验显示,大鼠在术后30d、90d、180d均出现学习记忆功能下降,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05);血清Aβ水平在术后10d显著增高(P<0.01),30d、90d、180d血清Aβ水平仍高于对照组(P<0.05);术后90d和180d海马的Aβ和APP增高(P<0.05),180d皮质的Aβ和APP增高(P<0.05)。结论慢性脑血流低灌注引发大鼠脑及血中Aβ的升高,可能在阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)早期发病过程中有重要意义。

HO-1和HO-2在大鼠慢性脑血流低灌注状态下肝脏中的动态变化及意义

目的:观察血红素加氧酶(heme oxyenase,HO)2种同工酶HO-1和HO-2在慢性脑血流灌注不足大鼠的肝脏中的动态变化并探讨其意义。方法:42只成年雄性SD大鼠,4月龄,体质量250~300 g,随机分为模型组和假手术组。假手术组只分离出双侧颈总动脉但不结扎,模型组行永久性双侧颈总动脉结扎术,然后将大鼠分别在术后1、7、14、21、28 d处死,分别用逆转录-聚合酶链式反应(reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR)和Western blot检测HO-1和HO-2的表达,并检测HO的活性变化。结果:RT-PCR和Western blot显示,与假手术组比较,HO-1 mRNA和蛋白水平在术后1 d即有增加,并在第7天达到高峰(P=0.000,P=0.000);伴随着脑血流供应的代偿性恢复,HO-1 mRNA和蛋白的表达在术后14、21、28 d都逐渐降低,但是和假手术组相比,在术后14 d和21 d时,差异都有统计学意义(P=0.000,P=0.000)。这样的变化与HO的活性变化一致(P=0.000)。然而RT-PCR和Western blot发现HO-2 mRNA和蛋白水平在慢性脑血流灌注不足的肝脏中没有变化(P=0.604,P=0.329)。结论:血红素加氧酶和HO-1 mRNA以及蛋白的表达在慢性脑血流灌注不足的肝脏中增加,而HO-2 mRNA和蛋白的表达变化无统计学意义。提示HO-1通过增加血红素加氧酶活性保护肝脏免收慢性脑血流关注不足引起的损伤。

S-腺苷甲硫氨酸抑制慢性脑血流低灌注大鼠脑组织中NO的生成

目的:研究慢性脑血流低灌注对脑组织中一氧化氮(nitric oxide,NO)生成的影响,以及S-腺苷甲硫氨酸(S-adenosylmethionine,SAM)对NO生成的干预作用。方法:采用双侧颈总动脉结扎(two-vesselocclusion,2-VO)大鼠模型模拟慢性脑血流低灌注过程,并给予SAM干预治疗。采用western blot方法检测大鼠脑皮层诱导型一氧化氮合成酶(inducible nitric oxide synthase,i NOS)的表达,用Griess反应检测NO的含量,用免疫组织化学方法观察胶质细胞的形态学改变。结果:慢性脑血流低灌注早期星形胶质细胞及小胶质细胞激活,i NOS及肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)的表达增高;在脑血流低灌注慢性期,星形胶质细胞及小胶质细胞的激活减少,TNF-α含量下降,然而i NOS表达持续增高,同时伴有NO含量增高。SAM干预可抑制慢性脑血流低灌注诱导的i NOS的高表达,减少NO的含量。结论:SAM可以通过抑制NO产生在脑血流低灌注引发的晚期氧化应激损伤中发挥神经保护作用。

脑血流低灌注对大鼠突触后致密物结构及PSD-95蛋白表达的影响

目的研究脑血流低灌注对大鼠学习记忆、脑组织突触后致密物(postsynaptic density,PSD)超微结构及PSD-95蛋白表达的影响。方法利用双侧颈总动脉永久性结扎制备SD大鼠脑血流低灌注模型。将SD大鼠随机分为假手术组和脑血流低灌注模型组。采用Morris水迷宫检测大鼠学习记忆情况。采用透射电镜结合Image Pro Plus图像分析系统定量分析大鼠海马突触数量、PSD长度和厚度。采用免疫组化观察大鼠脑组织PSD-95的表达。结果脑血流低灌注大鼠空间参考记忆及工作记忆能力减退,在第2至4天游泳训练时间段,搜寻隐藏平台路径较假手术组明显增加(P<0.05);撤离平台后,在原平台象限游泳时间及路径较假手术组降低,准确穿越原平台所在位置次数减少(P<0.05);当平台移动到第Ⅱ、Ⅳ象限时,搜索移动平台路径较假手术组明显延长(P<0.05)。与假手术组比较,脑血流低灌注大鼠海马突触数量明显减少,PSD长度变短,厚度变薄(P<0.05);海马CA1区、丘脑前内侧核、颞叶皮层PSD-95积分吸光度降低(P<0.05)。结论脑血流低灌注所致学习记忆功能减退与海马突触后致密物结构损伤、PSD-95蛋白表达下降有关。

体动和低灌注影响脉搏血氧饱和度准确性的临床研究

目的 体动和低血流灌注是影响脉搏血氧饱和度 (SpO2 )监测值准确性的常见因素。本研究旨在观察和比较三种不同类型的脉搏血氧饱和度仪在人为的体动干扰以及局部低血流灌注的情况下 ,其SpO2 监测值的变化。方法 6 0位成年健康志愿者参加本研究。在志愿者同一只手的食指、中指和无名指末端分别连接并固定好NellcorN 2 0 0、Novametrix 710 0和VitalSAT(ICC)三种脉搏血氧饱和度仪的传感器探头。 30名志愿者参加了体动试验 ,另外 30名志愿者参加低血流灌注的试验。全程连续监测记录SpO2 值 ,并与静止状态下对照。计算并比较三种脉搏血氧饱和度仪在不同状态下SpO2 值的读数错误频数、读数丢失频数及准确频数。结果 三种脉搏血氧饱和度仪的读数错误频数和读数丢失频数在体动时均有显著提高 ;读数丢失频数在低灌注时显著增加。VitalSAT(ICC)所监测的SpO2 值的错误频数及丢失频数均明显低于NellcorN 2 0 0和Novametrix 710 0。结论 体动及低灌注可影响SpO2 监测值的准确性。VitalSAT(ICC)由于采用了先进的信号萃取技术 (MasimoSET) ,在体动及低灌注状态下的准确性明显优于两种传统氧饱和度仪。

无症状性大脑中动脉狭窄患者脑血流低灌注与认知障碍的研究

目的 探讨无症状性大脑中动脉狭窄患者脑血流低灌注与认知障碍相关性。方法 选取2020年10月-2021年10月本院收治的大脑中动脉中重度狭窄患者60例,将其按照PWI(磁共振灌注加权成像)结果分为PWI正常组、PWI代偿组、PWI失代偿组,每组各20例,评估其认知功能。结果 PWI正常组MMSE、MoCA总评分、视空间及执行能力、计算力、语言、抽象、延迟回忆评分明显高于PWI代偿组和PWI失代偿组,比较差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 无症状性大脑中动脉狭窄导致的脑血流低灌注与认知障碍有关。

单纯脑白质疏松症与宾斯旺格病的脑血流变化对比研究

目的:观察单纯脑白质疏松症(leukoaraiosis,LA)与宾斯旺格病(binswangerdisease,BD)脑血流动力学及局部脑血流的变化,探讨LA和BD是否存在经颅多普勒(TCD)与单光子发射计算机断层(SPECT)异常改变程度上的不同和异常部位的不同。方法:对49例LA和18例BD和30例正常老年人均行TCD检查,观察脑血流动力学改变情况,并对其中10例LA和9例BD患者行SPECT检查,观察局部脑血流灌注(regionalcerebralbloodflow,rCBF)情况。结果:①单纯LA组与BD组患者颈内动脉系统平均血流速度均显著低于正常对照组(t=2.98～5.64,P<0.01),BD组患者颈内动脉系统平均血流速度又显著低于单纯LA组(t=2.67～5.40,P<0.01),BD组椎基底动脉系统平均血液速度显著低于单纯LA组及正常对照组(t=2.69～4.80,P<0.01)。②SPECT检查发现所有BD患者均存在白质rCBF减少,而单纯LA组患者只有5例存在rCBF减少,其减少程度亦较BD轻。结论:①BD患者的脑血流低灌注程度较单纯LA重。②单纯LA患者脑血流低灌注主要表现在颈内动脉系统,而BD患者颈内动脉系统和椎基底动脉系统均存在严重的脑血流低灌注。

慢性脑血流低灌注相关的脑白质病变与认知功能障碍关系的临床分析

目的:探讨慢性脑血流低灌注相关的脑白质病变与认知功能障碍的相关性。方法:选择2016年5月至2017年10月我院收治的慢性脑供血不足患者120例,设为观察组;选择无神经系统病变患者120例,设为对照组。两组患者入院后均行脑部CT灌注成像检查,同时完成患者脑白质损伤评分。采用蒙特利尔认知评估量表、简易智能精神状态量表、日常生活活动量表对两组患者认知功能情况进行评估,采用相关性分析软件对脑白质损伤评分与认知功能障碍评分进行相关性分析。结果:观察组慢性脑血流低灌注相关脑白质损害评分、达峰时间、平均通过时间、局部脑部血流量、局部脑血容量,均低(少)于对照组(P <0. 05);观察组慢性脑血流低灌注相关脑白质损害蒙特利尔认知评估量表、简易智能精神状态量表评分及日常生活活动量表评分均低于对照组(P <0. 05);相关性分析结果表明,脑CT灌注下脑白质损害评分、达峰时间、平均通过时间、局部脑部血流量、局部脑血容量与蒙特利尔认知评估量表、简易智能精神状态量表评分及日常生活活动量表评分呈正相关(P <0. 05)。结论:慢性脑血管低灌注所致的脑白质损伤患者常伴有不同程度的认知功能障碍,脑CT灌注成像检查能评估患者病情严重程度,对早期轻度认知功能障碍的发现尤为重要,能为临床治疗提供影像学依据,并指导临床早期治疗,有效延缓患者痴呆的发生。

脑出血后脑血流低灌注的临床研究进展

脑出血是指原发性非外伤性脑实质内出血，全世界每年发病率在（10～30）／10万，占所有脑卒中的10％～15％。脑出血在亚洲及低收入国家中的发病率约为欧美发达国家的2倍，且呈逐年增高的趋势。