肿瘤血管生长因子抑制剂的研究

目的 探讨低分子多糖对肿瘤血管生长因子的抑制作用。方法 血管生长因子抑制试验采用鸡胚绒毛尿囊膜法。体内抑瘤试验选用肉瘤S - 1 80、肝癌H2 2 、艾氏腹水癌等瘤株 ,灌胃给药 ,每天 1次 ,连续 1 0d ,观察对实体瘤的抑制作用及对艾氏腹水癌的生命延长作用。体外细胞毒试验选用K56 2 白血病、Hela宫颈癌细胞株 ,采用体外细胞毒试验 (MTT)法 ,计算对肿瘤细胞株平均细胞生长抑制率及对细胞生长的抑制浓度。结果 低分子多糖能明显抑制鸡胚绒毛尿囊膜的肿瘤血管生成 ,对肉瘤S - 1 80的抑制率在 31 7%～ 51 2 % ,对肝癌H2 2 的抑制率在 30 1 %～52 1 % ,对艾氏腹水癌及肝癌H2 2 腹水癌作用不明显。对K56 2 白血病细胞株 ,低分子多糖的半数抑制浓度IC50 为 2 0μg/ml,对Hela宫颈癌细胞株的半数抑制浓度IC50 为 2 3 4μg/ml。 结论 低分子多糖是较好的肿瘤血管生长因子抑制剂 ,对肿瘤细胞株体内抑瘤试验。

四元复合体介导C-MYC反义RNA抑制肝癌细胞生长增殖

目的探讨四元复合体介导的C-MYC反义RNA转移系统对肝癌细胞系HepG2.2.15致瘤性的体内外抑制作用。方法C-MYC反义RNA四元复合体体外瞬时转染HepG2.2.15细胞,流式细胞术检测C-MYC蛋白的表达水平、细胞凋亡率及细胞周期的变化,MTT法测定细胞增殖代谢活性。以HepG2.2.15细胞制备荷瘤裸鼠模型,局部瘤内注射C-MYC反义RNA四元复合体或联合注射IFN-α,称量瘤重,免疫组化方法检测肿瘤组织C-MYC蛋白的表达。结果C-MYC反义RNA可显著降低细胞C-MYC蛋白的表达水平,使细胞生长停滞于G0/G1期。体内抑瘤实验显示,反义治疗组瘤体C-MYC蛋白表达降低,瘤重(1.72±0.16)g,显著低于生理盐水对照组(P<0.05)。联合IFN-α注射组抑瘤效果更佳。结论肿瘤组织靶向性C-MYC反义RNA转移系统在体内外均可有效降低C-MYC蛋白的表达,抑制细胞的生长增殖。体内联合IFN-α可取得更佳的抑瘤效果。

羊栖菜多糖通过Ca^2＋影响S180荷瘤小鼠红细胞膜功能的研究

目的：从红细胞膜功能角度探讨羊栖菜多糖抗肿瘤作用机制，特别是红细胞内[Ca^2＋]的变化、膜电荷密度和膜电位变化。方法：实验共设6组。体内抑瘤实验和生命延长实验；激光共聚焦测定荷瘤小鼠红细胞内[Ca^2＋]的变化，分光光度法对荷瘤小鼠红细胞脆性的变化和唾液酸含量进行测定，结合高效毛细管电泳法对荷瘤小鼠红细胞电泳淌度的测定结果，探讨荷瘤小鼠红细胞膜表面电荷密度的变化情况；用荧光偏振法测定荧光偏振度值和微粘度研究细胞膜脂的流动性；按Zamudio法进行NADH-细胞色素C氧化还原酶活性的测定，计算荷瘤小鼠红细胞的封闭度；测定荷瘤小鼠红细胞膜Na＋，K＋-ATPase及Ca2＋，Mg2＋-ATPase活性，用流式细胞仪测量荷瘤小鼠红细胞膜膜电位的变化趋势。结果：（1）羊栖菜多糖能够抑制S180荷瘤小鼠的肿瘤生长和延长H22荷瘤小鼠的生存时间；（2）羊栖菜多糖能够降低S180荷瘤小鼠红细胞内[Ca2＋]、红细胞脆性，提高S180荷瘤小鼠红细胞膜流动性和封闭度；（3）羊栖菜多糖能够提高S180荷瘤小鼠红细胞膜表面的唾液酸含量、Na＋，K＋-ATPase及ca2＋，Mg2＋-ATPase活性；（4）羊栖菜多糖能够提高S180荷瘤小鼠红细胞膜膜电位水平和红细胞表面的电泳淌度，即增加表面的电荷密度。结论：羊栖菜多糖能提高荷瘤小鼠红细胞膜功能，增强红细胞免疫功能，通过对体内循环复合物的免疫粘附作用，达到抗肿瘤效果，这可能是羊栖菜多糖抗肿瘤作用机制之一。

CCR5亲和短肽抗肿瘤活性研究

目的探讨趋化因子受体CCR5亲和短肽(AFDWTFVPSLIL)对肿瘤生成作用的影响。方法通过MTT实验、细胞凋亡实验检测短肽对血管内皮细胞生长的影响,通过鸡胚绒毛尿囊膜(CAM)实验检测短肽对血管生成的影响,通过体内抑瘤实验检测短肽对实体瘤生长的作用。结果短肽能通过诱导人脐静脉血管内皮细胞的凋亡来抑制内皮细胞的生长;并能抑制CAM膜的血管生成。短肽也能在体内抑制小鼠B16黑色素瘤的生长活性,其抑瘤率达68.6%。结论初步证明短肽具有抗肿瘤生成作用,且这种作用可能是通过抑制肿瘤的血管生成来实现。

中药三龙丹的药效学研究

目的探讨中药三龙丹抗肿瘤的作用机理,为临床用药提供理论依据。方法①体内抑瘤实验:取大白鼠左前腋下接种W256瘤种0.3ml/只,次日开始给药。阴性对照组给予生理盐水;阳性对照组给予环磷酰胺;中药组分别给予不同剂量的三龙丹药物。②体外抑瘤实验:将受试药物三龙丹稀释成1:10、1:20、1:40、1:80、1:160、1:320、1:640、1:1280的浓度,然后接种于多孔培养板内的HEL和NKM上,37℃、CO2培养,观察细胞病变,计算抑瘤指数。③三龙丹对SOD和MDA的影响:取小鼠40只,随机分成4组,给药方法同体内抑瘤实验,连续用药30天,然后每只小鼠摘眼球取血,用微量快速检测法测定SOD和MDA的含量。结果实验表明,中药三龙丹对W256肿瘤具有显著的抑制作用;该药在1:80药物浓度时(最大抑瘤浓度)抑制肿瘤靶细胞的效应最大;同时,还能明显提高小鼠血中SOD的活性和降低MDA代谢产物。结论中药三龙丹对体内肿瘤W256、体外靶细胞NKM和小鼠血中SOD、MDA具有显著的影响。

中药三龙丹的药理研究

目的 探讨中药三龙丹抗肿瘤的药理作用及其机理研究。方法 体内抑瘤实验 :取大白鼠左前腋下接种W 2 5 6瘤种 0 .3ml/只 ,次日开始给药。阴性对照组给予生理盐水 ;阳性对照组给予环磷酰胺 ;中药组分别给予不同剂量的三龙丹药物。体外抑瘤实验 :将受试药物三龙丹稀释成 1∶10、1∶2 0、1∶40、1∶80、1∶16 0、1∶32 0、1∶6 40、1∶12 80的浓度 ,然后接种于多孔培养板内的HEL和NKM上 ,37℃、CO2 培养 ,观察细胞病变 ,计算抑瘤指数。三龙丹对SOD和MDA的影响 :取小鼠 30只 ,随机分成 3组 ,给药方法同体内抑瘤实验 ,连续给药 30天 ,然后每只小鼠摘眼球取血 ,用微量快速检测法测定SOD和MDA的含量。结果 实验表明 ,中药三龙丹对W 2 5 6肿瘤具有显著的抑制作用 ;该药在 1∶80药物浓度时 (最大抑瘤浓度 )抑制肿瘤靶细胞的效应最大 ;同时 ,还能明显提高小鼠血中SOD的活性和降低MDA低谢产物。结论 实验证实 ,中药三龙丹无论在体内还是体外均具有明显的抑瘤作用。