全腹腔镜下根治性膀胱切除术+体内构建回肠膀胱术手术结果对比

目的报道我院全腹腔镜下根治性膀胱切除(LRC)+体内构建回肠膀胱术(ICIC)的手术结果及与LRC+体外构建回肠膀胱术对比(EUIC)。方法从2017年1月至2019年12月,40例膀胱癌患者在我院行回肠膀胱LRC术。比较ICIC(n=8与体外回肠通道(ECIC)(n=32)的手术结果。结果ICIC组与ECIC组患者特征无明显差异。两者围手术期对比结果如下:中位总手术时间(441 min vs 313 min,P=0.000);尿流改道时间(254 min vs 118 min,P=0.000)有显著差异。术后排气时间(2 d vs 3 d,P=0.000),术后进食时间(3 d vs 4 d,P=0.000)术后两组有显著差异。与手术相关的30 d内并发症两组间无显著性差异。结论初始经验提示,与ECIC相比,LRC联合ICIC手术安全,术后排气与进食时间相对较早,可能利于快速康复。早期并发症的发生率无明显差异。结果需要进一步随访及大数据支持。

体外构建与体内构建组织工程骨的血管化研究

目的比较骨髓基质干细胞(BMSCs)与生物衍生骨体内、体外复合所构建的组织工程骨修复山羊胫骨大段骨-骨膜缺损的血管化进程以及血管化与成骨的关系,以探讨修复大段负重骨缺损的最佳途径。方法22只山羊制备成胫骨中段20mm的骨-骨膜缺损,随机分为2组,分别植入BMSCs与生物衍生骨体外构建和体内构建的组织工程骨,常规钢板螺钉内固定,在2、4、6、12周时间点分别用墨汁灌注透明标本、血管面积图像分析和X线片观察血管化过程及成骨情况。结果体外构建组与体内构建组血管化进程无明显区别,各时间点血管面积差异无显著性意义(P>0.05),12周均能达到完全血管化,但X线片见体外构建组新骨形成较快,缺损区密度高,体内构建组以上各变化较前者慢大约2～4周。结论BMSCs与生物衍生骨体外构建和体内构建的组织工程骨均能快速血管化并成骨,但是体内构建方式成骨较体外构建慢。

体外构建与体内构建组织工程的比较研究

目的比较骨髓基质干细胞(MSCs)与生物衍生骨体内、体外复合构建的组织工程骨修复山羊胫骨大段缺损能力,以探讨修复缺损最佳途径。方法制备山羊胫骨中段20mm的骨骨膜缺损,分别植入体内、体外构建的组织工程骨、自体骨及单纯生物衍生骨,分别行组织学、X线观察、骨密度测定和生物力学测试。结果体外构建组材料降解较快,成骨迅速,16周时已可见髓腔再通;体内构建组以上各变化较前者慢2～4周;而单纯生物衍生骨对照组材料降解、新骨形成均较慢;6周时,各组弯曲应力值差异无显著性(P>0.05),12、16周时体外构建组高于体内构建组(P<0.05),体内构建组高于单纯生物衍生骨对照组(P<0.05)。结论体内、体外构建的组织工程骨成骨迅速、量大,排斥反应小;但是体内构建方式成骨较体外构建慢。

皮肤组织工程研究的新进展

组织工程学是以细胞生物学、工程学和材料学相结合，在体外或体内构建组织或器官替代物，用于修复、维持或改善机体形态和功能的一门新兴的交叉学科^[1]。组织工程皮肤为急性或慢性皮肤损伤提供了全新的治疗理念。然而，目前的皮肤替代物仅仅是结构的模仿，且存在构建时间长、修复有限、无皮肤附件及瘢痕形成等缺陷。

间充质干细胞与组织工程血管

间充质干细胞在再生医学领域中具有重要的应用价值,其增殖能力强,免疫原性低,具有良好的分化潜能,是理想的组织工程血管种子细胞。本文系统总结了应用间充质干细胞构建组织工程血管的研究进展,介绍了间充质干细胞分离纯化和鉴定方法,分类阐述了间充质干细胞构建组织工程血管的几种方法,并探讨了其优缺点。

组织工程学——21世纪面临的机遇与挑战

组织工程学（tissueengineering）自1987年美国国家科学基金会正式提出至今，在短短不到20年中已取得了突飞猛进的发展，不仅在免疫缺陷的小动物体内构建出各种组织工程化组织，而且成功地修复了免疫功能完全的大型哺乳类动物的各种组织缺损。目前国际上已有组织工程皮肤、组织工程软骨产品面世，并得到美国FDA的批准；国际上已成立了近百家组织工程公司，可以构建组织工程化组织，组织工程化复杂生命器官的构建亦在国内外积极开展。同时，令人欣慰的是，部分组织工程化组织已初步应用于临床并取得了稳定而持久的疗效。

软骨组织工程的研究进展

目前,软骨组织工程已在基础研究方面取得了令人瞩目的成果,并在临床应用方面进行了初步尝试,为临床软骨缺损的修复提供了新的思路与途径,已经成为该领域主要的研究方向,但其大规模临床应用尚存在诸多困难。现结合近年的研究成果,就组织工程化软骨的种子细胞、生物支架材料、体内外构建以及临床应用等方面进行综述。

PCR依赖型方法构建高质量酵母基因突变文库

针对定向进化中利用亚克隆的方法建立酵母突变文库建库周期长、效率低、库容量低、丰度低等问题,建立了一种基于体内同源重组构建酵母整合型基因突变文库的新方法。步骤为：构建目标基因的重组表达质粒;以此为模版,设计长引物片段,PCR/易错PCR/DNA Shuffling等方法扩增得到两端带有与表达载体40~70 bp同源序列的突变基因;再利用PCR扩增得到表达载体;将扩增得到的目标基因和表达载体以一定的摩尔比混合电转化酵母,目标基因和表达载体在酵母体内同源重组成为完整的表达盒,整合入酵母基因组,获得基因突变文库。对构建的突变文库进行筛选,分别得到了酶活、蛋白表达量及热稳定性提高的突变株。该方法为完全PCR依赖型（PDM）,在体内构建表达盒,效率高,操作方便,将建库周期由2周缩短为3 d,将库容量从传统的103~104提高到105以上,库阳性率达到95%。

慢病毒肌肉注射介导人FⅧ基因在大鼠体内的表达

近来的研究表明，以HIV-1为基础构建的慢病毒（Lentivirus）载体因具有可感染非分裂细胞、转移基因片段容量较大、转染所需的病毒滴度可达10^7-10^8IU／ml、目的基因表达时间长、不易诱发宿主免疫反应等优点而受到人们关注。我们利用慢病毒制备含人凝血因子Ⅷ（hFW）基因的重组慢病毒，注射到正常大鼠大腿骨骼肌，测定大鼠血清中hFⅧ抗原和hFⅧ抗体水平，用PCR检测确认目的基因的存在，在正常大鼠体内构建慢病毒载体系统，探讨在动物模型中慢病毒介导肌肉注射基因治疗的可行性。

大鼠牙胚同种异体异位移植的组织学观察

目的:观察牙胚在同种异体大鼠体内不同部位的发育情况,为进一步组织工程化牙齿的构建探寻合适的体内生长环境。方法:将封闭群SD仔鼠第一磨牙牙胚分别植入SD成年大鼠肾被膜下、肠系膜内、腹膜外间隙、腹腔内和口腔黏膜下,3周取材,HE染色,观察移植牙胚的发育情况。结果:牙胚在肾被膜下和肠系膜内生长良好,釉质和牙髓牙本质复合体继续发育,牙本质小管结构清晰可见;腹膜外间隙和腹腔内牙胚均未进一步发育,且牙髓腔内和移植物周边淋巴细胞浸润明显;口腔黏膜下未回收到移植物。结论:封闭群SD大鼠肾被膜下和肠系膜内环境有利于同种异体牙胚的生长,可为组织工程化牙齿的体内构建提供新的发育环境。

微载体人胃癌动物模型的建立及其病理特征的探讨

目前将人肿瘤细胞系接种到免疫缺陷被小鼠体内构建的CDX（cell—line—derived xenograft）模型已经被广泛用于临床前抗癌药物药效的检测，但CDX模型存在许多缺点，如可用于造模的肿瘤细胞系数量有限、移植成功率低、裸鼠饲养条件高等，并且该模型不能模拟免疫反应对肿瘤的影响。

组织工程在妇科缺损性疾病中的应用

组织工程学（tissue engineering）是一门将细胞生物学和材料学相结合进行体外或体内构建组织或器官的新兴学科，是将少量种子细胞在体外扩增后种植于天然的或人工合成的细胞外基质上，经过一段时间的培养后，移植到体内，最终形成具有正常结构和功能的组织或器官，以达到替代修复病变和缺损的组织器官，重建解剖和生理功能”。