光果柱花草转基因毛状根及其原生质体制备体系的建立

光果柱花草(Stylosanthes leiocarpa)是柱花草属(Stylosanthes Sw.)中可用于林果园间作的一个野生种。截至目前,光果柱花草的转基因体系尚未建立。本研究以光果柱花草的子叶节为外植体,比较不同的发根农杆菌菌株与潮霉素B浓度对毛状根诱导率及转基因阳性率的影响。结果发现,以K599为诱导菌株且培养基添加8 mg·L^(-1)潮霉素B为筛选压,是最优的毛状根诱导条件,诱导率达23.33%,阳性率为100%。在此基础上,利用转基因毛状根制备原生质体,结果表明,添加2.5%纤维素酶和2%离析酶,以及8 h的酶解时间为最优条件,原生质体的产量达2.745×10^(5)个·g^(-1),活力为91.02%,制备的原生质体100%为转基因细胞。本研究成功建立了一种发根农杆菌介导的光果柱花草转基因毛状根诱导体系及原生质体制备体系,为后续光果柱花草的基因功能研究奠定了基础。

油莎豆原生质体制备的组织筛选及条件优化

为高效获得油莎豆原生质体,采用单因素试验方法进行油莎豆原生质体制备的组织部位(幼芽、幼根、幼叶、幼叶鞘、分蘖节和匍匐茎)筛选以及酶解条件(酶组合用量、酶解时间、渗透压稳定剂用量和酶液pH值)优化。结果表明,油莎豆原生质体制备的最佳组织部位为幼嫩的分蘖节;最优酶解条件:酶组合用量为2.0%纤维素酶+0.9%离析酶、酶解时间为6h、渗透压稳定剂甘露醇用量为11%、酶液pH值为6.0。此条件下,0.2 g油莎豆幼嫩分蘖节加至4 mL酶液中,原生质体的产量可达22.91×10^(5)个/g,活力可达90.72%。综上,获得了高效制备油莎豆原生质体的方法,可为后续油莎豆原生质体融合、种质创新以及杂交育种奠定基础。

氧化锆陶瓷增韧机制及其粉体制备的研究进展

氧化锆陶瓷优异的韧性、高硬度、高抗弯强度及良好的生物相容性,在结构陶瓷、功能陶瓷和电子陶瓷方面得到广泛应用。本文综述了氧化锆的增韧机制,氧化锆增韧机制可分为相变增韧、应力微裂纹增韧、铁弹性增韧及耦合反应增韧。氧化锆粉体特性对陶瓷品质有直接影响,制备高品质氧化锆粉体是获得性能优异氧化锆陶瓷的前提,制备氧化锆粉体的方法有液相法、气相法以及固相法等,本文介绍氧化锆粉体的主要制备方法,并总结各种方法的优缺点。

进料时间及表面活性剂对撞击流微反应器在粉体制备中的影响

本文利用撞击流微反应器制备纳米硫酸钡,除考虑进料流量和表面活性剂对粉体制备的影响外,还应考虑进料时间以及表面活性剂的用量对粉体制备的影响。实验结果表明:在不同进料时间条件下所制得的硫酸钡晶体的粒度大小十分接近,进料时间的长短只能影响到产品的数量,而不能影响产品的质量。加入微量的六偏磷酸钠对粉体的粒度没有太大的影响。随着加入量的不断增加,制得的粉体的粒度明显减小。但当加入量达到一定程度时,继续增加表面活性剂的用量对实验结果的影响不大。

球磨法在锆英砂粉体制备中的应用

随着科技发展以及生产技术的提高,促进了粉体破碎与研磨技术的发展。而锆英砂作为一种硬度高且脆的矿物,为了达到粒径分布要求,其加工方法非常多样。而球磨法作为其中一种,能够满足锆英砂粉体制备的要求。笔者对于球磨法应用在锆英砂粉体制备中的方法进行分析和探讨。

草菇原生质体制备、再生及转化研究

用酶解法对草菇原生质体制备及再生条件进行了研究.结果表明:液体静置培养4 d的菌丝,以0.6 mol/L的甘露醇作渗透压稳定剂,溶壁酶质量浓度15 mg/mL,34℃下酶解3 h,原生质体制备率最高;草菇原生质体预培养16 h后涂布在再生培养基上,再生率最高.同时,采用PEG法将潮霉素抗性基因转入草菇的原生质体中,经过抗性筛选,得到了具有潮霉素抗性的草菇转化子.

纳豆菌原生质体制备与再生条件的研究

研究了菌体培养时间、溶菌酶作用条件(酶作用温度、浓度和时间)对纳豆菌BNK菌株原生质体制备和再生的影响。在此基础之上,考察了不同再生培养基、渗透压稳定剂及原生质体保护剂对再生率的影响。确定了菌株BNK原生质体制备和再生最佳条件为:菌体培养9h收集,0．8mg/ml溶菌酶,30℃作用40min制备原生质体,将原生质体液涂布于以甘露醇为渗透压稳定剂、添加有淀粉的PYG培养基中再生,此时原生质体制备率达98．2%,再生率为28．4%。

粉体的燃烧合成技术及其在钛酸钡粉体制备中的应用

综述了燃烧法合成陶瓷粉体的原理、方法及其在钛酸钡粉体制备中的应用 ,比较了各种燃烧法合成钛酸钡粉体工艺的优缺点 ,并指出目前经济、有效地制备钛酸钡粉体的方法是以有机燃料和金属硝酸盐为原料的低温燃烧合成法。

牙体制备形态对Cerec全瓷冠边缘适合性的影响分析

目的:观察牙体制备形态对Cerec系统制作的全瓷冠边缘适合性的影响。方法:将标准模型上的下颌第一磨牙制备成2种向聚合度(6°和12°)和2种边缘形态(120°浅凹形边缘和90°直角肩台),分成4个制备体组,每组翻制8个基牙制备体试件。分别用Cerec3设计制作成全瓷冠,用轻重2种硅橡胶材料固定于相应的试件上,剖开后,在体视显微镜下分别测定每个轴面的边缘轻体硅橡胶材料的厚度,用SPSS11.0软件包对结果进行单因素方差分析。结果:4组试件的轻体硅橡胶材料厚度为A组(172.8±42.6)μm,B组(181.9±46.6)μm,C组(187.1±46.5)μm,D组(191.7±46.4)μm,4组之间无显著性差异(P>0.05)。近中面和远中面、近中面和颊面、近中面和舌面、远中面和颊面、远中面和舌面之间均有显著性差异(P<0.05),颊面和舌面之间无显著性差异(P>0.05)。远中面的轻体硅橡胶材料厚度最大为(278.1±28.8)μm,最小的是颊面,为(135.8±14.6)μm。结论:所有修复体的边缘适合性均处于临床可接受的范围内,向聚合度为12°时的边缘适合性优于6°时,120°浅凹形边缘优于直角肩台。

不同因素对两株细菌原生质体制备的影响

为了获得较多的原生质体用于原生质体融合,进行了酶解时间与浓度、稳定剂、菌龄、pH值等因素对革兰氏阳性菌株芽胞杆菌KR和革兰氏阴性菌株假单胞菌B13的原生质体制备影响的研究,结果表明:在以0.6mol/L蔗糖为稳定剂,pH8.0,溶菌酶浓度8mg/ml,37℃,酶解80min的条件下,芽胞杆菌KR原生质体得率为31.6%;在以.0.6mol/L NaCl为稳定剂,pH7.0,溶菌酶浓度6mg/ml,37℃,酶解45min假单胞菌B13原生质体得率最高,为95.2%。

全尾膏体制备过程中尾矿颗粒运移行为研究进展与趋势

我国重要大宗金属矿产资源平均品位低,加之近年来我国矿产资源需求的持续增长、资源综合利用率的不断提升,导致尾矿粒度越磨越细、尾矿排放量越来越大,尾矿已成为我国金属矿山的重大危险源。目前,对于全尾矿的处置技术基本上为地表低浓度排放和井下充填,但是由于尾矿制备和输送浓度过低而存在许多问题,尾矿膏体堆放和膏体充填是尾矿最有效最具前景的处理方式,以此来实现安全生产和保护环境。超细全尾颗粒沉降速度慢,渗透性差,导致浓密困难,因此带有超细颗粒的全尾矿快速脱水浓密是膏体制备的技术关键。详细介绍了全尾膏体制备过程中全尾颗粒沉降、絮凝沉降、颗粒运移以及沉降机理的研究现状,分析了目前研究存在的问题以及其发展趋势。

稗草生防潜力菌Helminthosporium gramineum f. sp. echinochloae的原生质体制备和再生

禾长蠕孢菌(Helminthosporium gramineum f. sp. echinochloae,HGE)是稗草生防潜力菌,为建立HGE的遗传转化体系,研究了菌龄、胞壁降解酶、稳渗剂等对其原生质体制备和再生的影响。结果表明,HGE菌原生质体制备的适宜条件为:26℃下采用1.0%崩溃酶处理菌龄为6h的HGE菌丝体2h,0.7mol/LNaCl为稳渗剂。原生质体再生的适宜条件为:32℃下采用0.5%崩溃酶处理菌龄为16h的HGE菌丝体4h,0.7mol/LNaCl为稳渗剂,R1为高渗再生培养基。

碱性普鲁兰酶产生菌的原生质体制备与诱变选育

研究报道了BacillusspSX-12原生质体制备与再生最佳条件.实验表明,在液体完全培养基中加入2%的甘氨酸培养10h,原生质体制备最佳条件为:溶菌酶浓度0.5mg/mL,酶解温度37℃,酶解时间1.5h时原生质体形成率为93.8%.原生质体形成最佳高渗稳定剂为甘露醇,再生率26.4%.在原生质体制备的最佳条件下,用紫外线诱变技术选育产碱性普鲁兰酶的高产菌株.筛选到1株高产菌株SX-12C67,酶活由出发菌株的2.42μ/mL提高到6.87μ/mL,提高了约1.8倍.

尖孢镰刀菌辣椒专化型原生质体制备条件优化

以尖孢镰刀菌辣椒专化型(Fusedum oxysporum f.sp.capsicum)为供试菌株,研究了其原生质体制备的最佳条件,明确了菌龄、酶的种类、酶解时间、酶解温度及转速等因素对原生质体制备的影响。结果表明,当利用孢子培养的14 h的菌丝体以15 mg/mL崩溃酶、0.7 mol/L的NaCl作为渗透压稳定剂,140 r/min,32℃酶解4 h时,可最大限度的收集原生质体,其在再生固体培养基SR上再生率为32.3%。

冬虫夏草原生质体制备与再生条件的研究

采用正交分析方法,对影响冬虫夏草菌株原生质体制备与再生的主要因素进行研究。结果表明,最佳条件组合为培养3d的菌丝体,在2.0%溶壁酶+1.0%蜗牛酶的酶液中,0.6mol/L的KCl作为原生质体制备的渗稳剂,0.6mol/L的甘露醇作为再生培养基的渗稳剂,32℃酶解2h。在此条件下,原生质体得率可达到2.98×108/ml,再生率可达到42.09×10-2。

保加利亚乳杆菌与嗜热链球菌抗噬菌体菌株的原生质体制备及融合

为获得具有抗噬菌体功能且发酵性能优良的乳酸菌融合子,采用单亲灭活及正交分析方法,研究了保加利亚乳杆菌与嗜热链球菌抗噬菌体菌株的原生质体制备及融合条件。结果表明:保加利亚乳杆菌原生质体制备的最适条件是以磷酸盐缓冲液和甘露醇制作的高渗溶液为原生质体稳定剂,1.0 mg/m L的溶菌酶36℃处理30 min,原生质体的形成率为(89.02±2.31)%,再生率为(4.62±0.22)%。嗜热链球菌抗噬菌体菌株原生质体制备的最适条件是以Tris-HCl和蔗糖制作的高渗溶液为原生质体稳定剂,0.1 mg/m L的溶菌酶42℃处理30 min,原生质体的形成率为(99.15±0.23)%,再生率为(5.79±0.17)%。单亲灭活保加利亚乳杆菌与嗜热链球菌抗噬菌体菌株原生质体融合的最适条件为聚乙二醇6000(质量浓度为400 g/L,添加0.01 mol/L Ca Cl2、0.02 mol/L Mg Cl2)40℃促融2 min,融合率可达(1.85±0.12)×10-6。所得融合子各项性能优良,适合于酸奶生产。

高产纤维素酶菌株原生质体制备及再生条件

研究青霉菌Penicillium Q5和枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis K3原生质体制备与再生的最佳条件。采用酶解法制备了青霉菌和枯草芽孢杆菌的高质量的原生质体。试验对亲本菌株的菌丝生长,酶浓度,酶解时间和灭活时间进行了优化。亲本菌株Q5,培养液中加入浓度0.5%甘氨酸和含量10%的蔗糖处理后,在质量浓度均为10 mg/mL的溶菌酶和蜗牛酶(1︰1)酶解作用下,35℃处理3 h,原生质体生成量达到最大值,为7.35×106cfu/mL;亲本菌株K3,用4 U/mL的青霉素处理,在1 mg/mL的溶菌酶作用下,35℃处理1 h,原生质体形成率与再生率的乘积达到最大值,此时K3原生质体量为1.46×107cfu/mL。青霉菌在65℃热灭活的时间为1 h,紫外灭活时间为3 min;枯草芽孢杆菌在65℃热灭活的时间是2.5 h,紫外灭活时间为5 min。这为后续原生质体融合选育具有抗逆性的高产纤维素酶菌株打下基础。

电子陶瓷用钛酸钡粉体制备技术进展及市场供需述评

本文阐述了钛酸钡粉体的主要制备技本，介绍了市场供需状况和粉体的电子行业标准等，并提出了建议。

充填膏体制备及泵送监控系统设计及应用

针对目前充填膏体制备及泵送监控系统存在配料误差大、系统故障率高等问题,基于PROFIBUS-DP现场总线设计了新型充填膏体制备及泵送监控系统,该系统可实现充填料浆原材料配料称重、搅拌、泵送等整套工艺自动化监控。在峰峰集团矿井膏体充填开采实践表明,该控制系统有效提升了充填膏体制备及泵送的可靠性和充填效率。

红酵母原生质体制备和再生条件研究

［目的］初步探讨红酵母原生质体制备和再生的条件。［方法］以红酵母为试材，研究渗透压稳定剂pH值、酶浓度、酶解时间、预处理时间4个因素对红酵母原生质体制备率和再生率的影响。［结果］pH值在6.5～7.0，原生质体的制备率和再生率随着渗透压稳定剂pH值的升高而上升。当酶浓度从0.2%上升到1.0%时，原生质体制备率上升较快，而原生质体再生率下降较慢。随着酶解时间的增加，原生质体的制备率逐渐增加，而原生质体的再生率逐渐下降。在5～15 min，原生质体制备率和再生率均随着预处理的时间的增加而降低。［结论］当渗透压稳定剂pH值为7.0，蜗牛酶酶浓度为1.0%，酶解时间为60 min，预处理时间为5 min时，原生质体的制备率和再生率能分别达到较高的值。