上皮性肿瘤细胞中Snail与E-cadherin的表达及其与体外侵袭性的关系

目的研究上皮性肿瘤细胞Snail与Ecadherin的表达以及与瘤细胞表型、转移潜能的关系。方法采用Northernblot、共聚焦激光显微镜研究6株不同组织来源、不同分化程度及转移潜能的上皮性肿瘤细胞、1株正常上皮细胞、1株成纤维细胞中Snail与EcadherinmRNA和蛋白表达与定位;Boyden小室体外侵袭实验反映细胞的转移潜能。结果在分化程度较高的癌细胞和对照正常上皮细胞中,EcadherinmRNA与蛋白表达较强,而Snail表达缺如;在分化程度低、转移潜能高的癌细胞和对照成纤维细胞中,Ecadherin、SnailmRNA及蛋白表达与上述情况相反。Ecadherin多定位于细胞胞浆和胞膜,Snail主要定位于胞核和胞浆。结论在上皮性肿瘤细胞中Ecadherin和Snail在mRNA与蛋白表达水平上存在逆反关系,且与细胞分化、转移潜能相关。

基因重组hNK4对Hela等多种肿瘤细胞生长侵袭抑制研究

目的该实验研究不同浓度的rhNK4因子对多种肿瘤细胞生长侵袭能力的影响。方法通过基底膜侵袭实验检测并分析基因重组NK4对人宫颈癌、乳腺癌、卵巢癌等肿瘤细胞体外的抑瘤侵袭性。结果实验证明rhNK4因子对人卵巢癌、宫颈癌、乳腺癌细胞有明显的抑瘤侵袭性,对人卵巢癌细胞、宫颈癌细胞、人乳腺癌细胞和人膀胱癌细胞的抑制率分别为48.2%,29.6%,,58.4%和30.1%。结论基因重组NK4因子具有抑制人宫颈癌、乳腺癌等多种肿瘤细胞侵袭的能力,有较强的抑瘤侵袭性。

膜型基质金属蛋白酶-1对乳腺癌细胞浸润能力的影响

目的研究膜型基质金属蛋白酶-1(MT1-MMP)对乳腺癌细胞株浸润能力的影响,并初步探讨其作用机制。方法用20μg/ml刀豆素(ConA)刺激乳腺癌细胞株MDA-MB-453,促使其表达MT1-MMP蛋白,并用免疫细胞化学和Western blot法检测;然后加入外源性MMP-2原酶(proMMP- 2),并用明胶酶谱分析法检测proMMP-2被激活的情况;最后用侵袭实验检测细胞株的浸润能力。实验中将细胞株分为4组:空白对照组、ConA组、MMP-2组和ConA+MMP-2组,各组实验结果进行对比分析。结果利用ConA刺激后,ConA组和ConA+MMP-2组的细胞均表达MT1-MMP蛋白,另两组无MT1-MMP蛋白表达。明胶酶谱分析实验发现,MMP-2组只检测到72 000原酶形式的MMP-2, ConA+MMP-2组同时检测到72 000原酶形式和64 000活酶形式的MMP-2,其余两组检测不到任何形式MMP-2。侵袭实验结果显示,ConA+MMP-2组细胞穿过Marigel胶的细胞数目明显多于其他组。结论MT1-MMP能显著增强乳腺癌细胞株的浸润能力,其机制主要是通过激活MMP-2原酶,降解肿瘤周围的基质成分实现的。