褪黑素提高二苯酮-3暴露小鼠早期胚胎体外发育潜能的研究

目的探究褪黑素(MT)在二苯酮-3(BP-3)暴露小鼠早期胚胎体外发育中的保护作用。方法将小鼠合子期受精卵分别在KSOM培养液(对照组)、0.8μmol/L BP-3培养液(BP-3组)以及1×10^(−7) mol/L MT+0.8μmol/L BP-3混合培养液(MT组)中进行培养。通过检测三组胚胎的囊胚率、基因转录水平、蛋白表达水平,以及DNA损伤程度来探讨MT对BP-3暴露小鼠早期胚胎体外发育潜能的挽救作用。结果MT提高了BP-3暴露小鼠胚胎体外发育潜能。与对照组相比,MT处理显著提高了BP-3组胚胎ATP5A和ATP5B的蛋白表达,降低了DNA损伤(P<0.05)。此外,抗氧化基因Gpx1及多能性相关基因Pou5f1、Cdx2的转录水平在MT组囊胚中出现了明显上调、促凋亡基因Bax表达下降。与对照组相比,BP-3处理增强了囊胚中γ-H2AX信号强度(P<0.05),而添加MT可以有效缓解DSBs(P<0.05)。结论生理浓度BP-3暴露具有生殖毒性,但添加适当浓度的MT可明显改善BP-3暴露小鼠早期胚胎的体外发育潜能及其质量。

灵长类卵母细胞体外发育潜能的调控

灵长类卵母细胞细胞质成熟调控研究较为滞后 ,使得体外成熟的灵长类卵母细胞的胚胎发育潜能十分低下。提高其潜能对治疗人类不育症有重要的应用价值 ,并可推动灵长类胚胎发育的研究。基于猕猴卵母细胞质成熟调控研究 ,讨论了无血清成熟培养基中雌激素和孕激素、能量物质、氨基酸对卵母细胞质成熟的影响 ,以及动物年龄和生殖周期与发育潜能的关系。从分子水平进一步解释这些因素的作用 。

未成熟卵体外培养发育潜能探究

目的体外受精-胚胎移植(In vitro fertilization and embryo transplantation,IVF-ET)周期所获卵子均未成熟时,其体外培养发育潜能探究。方法 25例IVF-ET周期所获卵子均未成熟(未成熟卵149枚),通过实验室体外过夜培养所有未成熟卵子(M1期,142枚;GV期,7枚),培养成熟卵子(M11期,98枚)行体外单精子胞内注射(Intracytoplasmic sperm injection,ICSI)后进行72h体外培养;回顾性分类统计IVF-ET周期中IVF、ICSI和Half ICSI的正常受精率、正常卵裂率和优胚率,比较它们间的差异。结果 IVF周期与Half ICSI周期中的IVF部分在受精率、正常卵裂率和优胚率均无统计学差异;ICSI周期与Half ICSI周期中的ICSI部分在受精率、正常卵裂率和优胚率均无统计学差异;所获卵子均未成熟周期与ICSI周期在受精率和优胚率有统计学差异,在正常卵裂率无统计学差异;所获卵子均未成熟周期与HalfICSI周期中的ICSI部分在受精率和优胚率有统计学差异,在正常卵裂率无统计学差异。结论所获卵子均未成熟周期的未成熟卵子经体外培养能部分成熟,并具有继续发育潜能,但其受精率和优胚率均明显低于体内成熟卵子的相应指标;且他们最终临床结局较差。