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三七粗多糖的分离纯化及其对人牙周膜干细胞、小鼠成骨细胞体外增殖活性的影响 被引量:8
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作者 李怀宇 钟媛媛 +6 位作者 李双 孙孔春 张晓红 姚艳云 刘艳红 侯世祥 陈彤 《华西药学杂志》 CAS CSCD 2019年第5期433-439,共7页
目的从工业三七药渣中提取、分离及纯化三七多糖,测定三七粗多糖及三七多糖洗脱组分的含量、分子量和p H,并考察其对人牙周膜干细胞、小鼠成骨细胞体外增殖活性的影响。方法以提取过三七总皂苷的工业三七药渣为原料,采用水提醇沉法得到... 目的从工业三七药渣中提取、分离及纯化三七多糖,测定三七粗多糖及三七多糖洗脱组分的含量、分子量和p H,并考察其对人牙周膜干细胞、小鼠成骨细胞体外增殖活性的影响。方法以提取过三七总皂苷的工业三七药渣为原料,采用水提醇沉法得到三七粗多糖,通过DEAE Sepharose Fast Flow阴离子交换层析柱分离纯化三七粗多糖;采用蒽酮-硫酸法测定三七粗多糖及三七多糖洗脱组分的含量,用高效凝胶渗透色谱法测定其分子量;采用MTT法测定三七粗多糖及三七多糖洗脱组分对人牙周膜干细胞、小鼠成骨细胞体外增殖活性的影响。结果水提醇沉法得到三七粗多糖的含量为69. 7%,得率2. 43%;通过DEAE Sepharose Fast Flow阴离子交换层析柱分离纯化三七粗多糖,得到水洗脱部分PNPSⅠ及Na Cl溶液梯度洗脱部分PNPSⅡ~Ⅴ;三七粗多糖、PNPSⅠ~Ⅴ重均分子量分别为38. 59、32. 00、96. 98、148. 60、154. 40、113. 60 k Da;在一定浓度范围内,三七粗多糖、PNPSⅠ~Ⅱ能促进人牙周膜干细胞的生长,PNPSⅢ~Ⅳ能抑制其生长;三七粗多糖、PNPSⅠ~Ⅳ具促进小鼠成骨细胞生长的作用。结论通过DEAE Sepharose Fast Flow阴离子交换层析柱分离纯化三七粗多糖,得到1种中性多糖和4种酸性多糖;三七粗多糖、PNPSⅠ~Ⅱ能促进人牙周膜干细胞的体外增殖,三七粗多糖、PNPSⅠ~Ⅳ具促进小鼠成骨细胞生长的作用。 展开更多
关键词 三七多糖 DEAE SEPHAROSE Fast Flow阴离子交换树脂 分离纯化 人牙周膜干细胞 小鼠成骨细胞MC3T3-E1 体外增殖活性 MTT法 碱性磷酸酶 骨钙素
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PCNA的反义寡聚核苷酸抑制子宫颈癌HeLa细胞的研究
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作者 黄浩 朱志华 +2 位作者 任刚 黄汉菊 方向明 《华中科技大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2003年第4期384-386,共3页
目的 检测脂质体介导增殖细胞核抗原 (PCNA)反义寡聚核苷酸抑制子宫颈癌细胞体外增殖活性效果。方法 应用细胞生长曲线和MTT比色法检测细胞增殖活性 ,并采用免疫组织化学方法 (SABC法 )检测PCNA蛋白的表达。结果 反义寡聚核苷酸处理... 目的 检测脂质体介导增殖细胞核抗原 (PCNA)反义寡聚核苷酸抑制子宫颈癌细胞体外增殖活性效果。方法 应用细胞生长曲线和MTT比色法检测细胞增殖活性 ,并采用免疫组织化学方法 (SABC法 )检测PCNA蛋白的表达。结果 反义寡聚核苷酸处理组细胞与对照组比较生长曲线差异有显著性 ,增殖显著受抑 (P <0 0 5 ) ,PCNA蛋白表达完全抑制。而正义寡聚核苷酸组则无此作用 (P >0 0 5 )。结论 提示PCNA反义寡聚核苷酸可以显著抑制子宫颈癌细胞体外增殖活性 。 展开更多
关键词 子宫颈癌 反义寡聚核苷酸 增殖细胞核抗原 癌细胞 体外增殖活性
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Selective support of a mouse thymus epithelial cell line(MTEC1)to the viability and proliferation of CD4^+CD8^-,CD4^-CD8^-,and CD4^+CD8^+thymocytes in vitro
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作者 CHENWEIFENG JAPINGATO 《Cell Research》 SCIE CAS CSCD 1992年第2期183-193,共11页
The MTEC1 cell line, established in our laboratory, is a normal epithelial cell line derived from thymus medulla of Balb/c mice and these cells constitutively produce multiple cytokines. The selection of thymic microe... The MTEC1 cell line, established in our laboratory, is a normal epithelial cell line derived from thymus medulla of Balb/c mice and these cells constitutively produce multiple cytokines. The selection of thymic microenvironment on developing T cells was investigated in an in vitro system. Un-separated fresh thymocytes from Balb/c mice were cocul-tured with MTECl cells or/and MTEC1-SN,then,the viability, proliferation and phenotypes of cultured thymocytes were assessed. Without any exogenous stimulus, both MTECl cells and MTECl -SN were able to maintain the viability of thymocytes, while only the MTECl cells, not the MTECl -SN, could directly activate thymocytes to exhibit moderate proliferation, indicating that the proliferative signal is delivered through cell surface interactions of MTECl cells and thymocytes. Phenotype analysis on FACS of viable thymocytes after coculture revealed that MTECl cells preferentially activate the subsets of CD4+ CDS', CD4+ CD8+ and CD4- CD8- thymocytes; whereas MTEC1- SN preferentially maintained the viability of CD4+ CD8- and CD4-CD8+ thymocyte subsets.For the Con A-activated thymocytes, both MTEC1 cells and MTEC1-SN provided accessory signal(s) to significantly increase the number of viable cells and to markedly enhance the proliferation of thymocytes with virtually equal potency, phenotyped as CD4+CD8-, CD4-CD8+, and CD4- CD8- subsets. In summary, MTEC1 cells displayedselective support to the different thymocyte subsets , and the selectivity is dependent on the status of thymocytes. 展开更多
关键词 thymic selection thymic epithelial cells thymocyte subsets cytokines flow cytometry.
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