用悬浮搅拌培养体系体外大量扩增人脐血造血干/祖细胞

目的 :建立一种简便、有效的脐血造血干 /祖细胞体外大量扩增培养体系。方法 :淋巴细胞分离液分离的脐血单个核细胞在SCF ,IL - 3,IL - 6三种细胞因子的作用下 ,于悬浮搅拌培养体系中培养 ,分析其总细胞数、CFU -GM、CD34+ 细胞的扩增倍数。结果 :脐血单个核细胞在悬浮搅拌培养体系中培养 12天后 ,其总细胞数、CFU -GM、CD34+ 细胞的扩增倍数分别为 6 .31± 1.5 2 ,2 0 .6 3± 1.5 4和 7.11± 1.12。结论 :悬浮搅拌培养体系是脐血造血干 /祖细胞体外大量扩增的有效培养体系。

间充质干细胞体外软骨定向诱导条件的研究进展

种子细胞来源一直是限制软骨组织工程发展的主要瓶颈。软骨细胞增殖能力有限,体外大量扩增后易发生老化及去分化,丧失软骨形成能力,且软骨细胞的增殖能力随年龄增长逐渐下降进一步限制了其在组织工程中的应用。如何寻找到最佳的种子细胞是目前组织工程研究的热点之一。

卵圆细胞体外扩增过程中分子标志物的变化及意义

为了探讨体外大量扩增卵圆细胞并保持其干细胞生物学特征的细胞培养方法，中山大学附属第一医院病理科陈琼荣（现在湖北省肿瘤医院病理科）等用RPMI 1640加上15％的胎牛血清和终浓度为20μg／L表皮生长因子（EGF）培养卯圆细胞株OC3，

人类免疫缺陷病毒-1感染者外周血单个核细胞体外培养的免疫学及病毒学特点

目的观察人类免疫缺陷病毒(HIV)感染者外周血单个核细胞(PBMC)体外培养过程中免疫学及病毒学的动态变化特点,并评价培养的细胞体系抗病毒活性。方法采集14例HIV感染者和6名健康人的PBMC,体外经多种细胞因子诱导培养,每3天观察细胞增殖情况,同时检测细胞表型、上清中细胞因子浓度和病毒载量。结果培养的健康人PBMC在(35±5)d最大增殖(61±8)倍;7例培养成功的HIV感染者PBMC在(21±6)d最大增殖(17±13)倍,另7例HIV感染者PBMC培养失败;同时发现HIV感染者PBMC体外培养最大增殖时间与其培养前外周血基础CD4/CD8比值呈明显正相关(P<0.05)。表型分析发现,培养的PBMC为优先CD8细胞增殖的异质T细胞群,主要由CD4、CD8及CD3CD56细胞组成;部分HIV感染者PBMC培养期间分泌白细胞介素(IL)1α、IL12、肿瘤坏死因子(TNF)α和IL10等细胞因子能力较高;而11/12例HIV感染者PBMC体外培养初期可扩增出大量病毒,但随着培养时间的延长,病毒载量逐渐降低甚至低于检测限。结论体外大量扩增基础CD4/CD8比值较高的HIV感染者外周血PBMC是可行的,扩增的细胞具备较强的Th1细胞免疫反应能力,为进一步开展艾滋病的免疫细胞治疗提供必要的实验数据。

脂肪组织来源的基质细胞向神经细胞分化及其在脑缺血疾病治疗中的应用进展

近年来，细胞移植治疗脑缺血疾病已成为研究热点，多种细胞已被用于基础研究及临床治疗中。目前常用的种子细胞是骨髓基质细胞（bone marrow stromal cells，BMSCs），它在一定的条件下可分化为成骨细胞、软骨细胞、脂肪细胞、肌母细胞和神经细胞。但骨髓穿刺具有创伤性，有一定的痛苦，且只能得到少量的细胞（大约1MSC／10s基质干细胞），需经体外大量扩增才能满足临床需要，是一个费时、昂贵、并有细胞污染和丢失风险的过程，因此。广泛、大量使用颇为受限。

组织工程软骨构建的研究进展

软骨组织是个＂三无＂组织,无血管、无淋巴、无神经的分布,营养是靠着软骨膜提供的,所以决定了软骨组织缺乏自我修复能力。软骨缺损大于5mm就不能自我愈合,以往没有更好的办法来解决这个问题，软骨组织工程的提出为软骨缺损的治疗带来了新思路。软骨组织工程主要的思路是体外大量扩增种子细胞，然后种植到合适的生物支架中，对支架进行塑形，体内植入缺损处修复缺损。这就决定了软骨组织工程的三大要素是种子细胞、生物支架和生长因子。

肿瘤免疫耐受机制的研究进展

随着对肿瘤免疫机制的不断研究，肿瘤的免疫治疗已成为研究的重点。近年来。免疫治疗恶性肿瘤的试验主要集中在应用最有效的提呈肿瘤抗原给特异性T细胞的方法（如DC疫苗），或体内、体外用刺激性细胞因子如IL-2、IL-12或IFN-α来增强机体的抗肿瘤免疫应答，或过继性输入体外大量扩增的肿瘤浸润性淋巴细胞．但临床总体效果不佳，主要原因之一是肿瘤机体内存在有免疫耐受机制。阐明肿瘤免疫耐受的机制将有助于利用特异而有效的免疫治疗和途径来杀灭肿瘤细胞。本文就以肿瘤的免疫耐受机制的研究进展作一综述。

骨髓间充质干细胞在关节软骨损伤中的应用

随着细胞生物学、分子生物学和材料学等基础科学的快速发展,组织工程研究和应用得以飞速发展,为软骨缺损修复这个医学难题开辟了全新领域。骨髓来源间充质干细胞（BMSCs）在体外大量扩增对其最终在体内形成软骨组织无明显影响并可分化成软骨和骨组织,正是由于这些特性,使之成为组织工程软骨构建中热门的种子细胞。

造血调控与造血干细胞移植

造血干细胞移植（HSCT）技术的日趋成熟和广泛应用已使其成为治疗某些血液病、恶性肿瘤、遗传性疾病和自身免疫性疾病的有效方法之一。作为最早开展研究的干细胞，造血干细胞在临床应用、细胞移植研究等方面取得了许多成果，但在造血干细胞的基础研究中还有不少尚待解决的问题，如造血干细胞的获取、扩增，造血重建能力的维持，体外对造血微环境的模拟等，而这些问题的深入研究将为临床细胞移植实践，如体外大量扩增造血干细胞解决移植细胞来源、优化治疗流程、改造体内造血微环境、选择植入时间窗等提高造血干细胞动员和植入效率等提供重要的理论支持。为此，现将目前造血干细胞生物学特性研究作一简单阐述，以期对临床移植工作有所启发。