体外循环肺缺血再灌注损伤的实验研究

研究兔体外循环中肺的缺血再灌注损伤并探讨其可能机制。采用兔体外循环模型 ,测定肺组织的丙二醛 (MDA) ,髓过氧化物酶 (MPO) ,一氧化氮 (NO)含量、肺血管通透性 (EB值 )及肺组织湿干比 (W /D值 )。CPB组肺组织MDA含量 (139 4± 17.0 )mmol/ g明显高于对照组 (2 7.6± 1.8)mmol/ g ,P <0 .0 1;MPO含量 (9.4± 0 .6 )u/ g明显高于对照组 (1.9± 0 .7)u/ g ,P <0 .0 1;NO含量 (8.4± 3.8) μmol/ g明显低于对照组(2 0 .9± 1.7) μmol/ g ,P <0 .0 1;W /D值 (8.5± 2 .1)明显高于对照组 (4 .5± 0 .9)P <0 .0 1;EB值 (3.2 33±0 .0 7)明显高于对照组 (1.394± 0 .0 6 ) ,P <0 .0 1。动物实验提示CPB中肺的缺血再灌注是肺损伤的重要原因 。

还原型谷胱甘肽预处理对体外循环肺缺血再灌注损伤的保护作用

目的 :观察还原型谷胱甘肽预处理对体外循环缺血再灌注损伤的保护作用。方法 :16例人工瓣膜置换患者随机分成对照组及预处理组。预处理组在术前 36h静脉给予生理盐水稀释的GSH ;对照组则给予生理盐水 ,测定CPB前、复跳后 5 ,10 ,15min时 ,左、右心腔血中丙二醛 (MDA) ,凝血VⅢ因子 (FVIII)及游离血红蛋白(FHb)浓度并计算其差值。取CPB前、复跳后 10min ,1h及 6h时桡动脉血测定氧合指数。结果 :两组氧合指数术后均降低 ,但预处理组明显低于对照组。左心腔血浆中MDA ,FVⅢ及FHb浓度均高于右心腔。预处理组中各指标增高值均低于对照组 ,差异均有显著性。两组中 ,MDA增高值与FVⅢ增高值 ,FHb增高值与MDA增高值及FHb增高值与FVⅢ增高值之间均呈直线相关 (r分别为 0 .774 ,0 .75 3及 0 .80 2 )。结论 :还原型谷胱甘肽预处理可减轻CPB时肺缺血再灌注早期损伤。其机制可能是通过减少FHb生成 ,降低自由基反应而实现的。

小白菊内酯调控NF-κB表达改善体外循环犬肺缺血再灌注损伤

目的研究小白菊内酯(PTL)对体外循环(CPB)犬肺缺血再灌注(IR)损伤的影响,并探讨其作用机制。方法18只健康成年中华田园犬,体重10~12 kg,采用随机数字表法分为假手术组(Sham)、肺缺血再灌注组(IR)和小白菊内酯组(PTL)。假手术(Sham)组不进行CPB,其余两组均建立CPB左肺缺血再灌注损伤模型。取CPB前(T_(1))、停机时(T_(2))和实验结束时(T 3)股动脉血行血气分析,计算呼吸指数(RI)和氧合指数(OI);ELSIA检测T_(1)、T_(2)和T_(3)时点血浆和T 3时点左肺肺泡灌洗液中IL-1β、IL-6和TNF-α含量;HE染色观察肺组织病理情况;qRT-PCR检测肺组织TNF-αmRNA表达水平;Western blot检测肺组织NF-κB p65、NF-κB p65和TNF-α蛋白表达水平。结果CPB后犬出现肺损伤,与IR组比较,T_(3)时点PTL组肺组织病理损伤减轻,RI明显降低(P<0.05),血浆、肺泡灌洗液中IL-1β、IL-6和TNF-α含量,肺组织TNF-αmRNA相对表达水平,TNF-α、NF-κB p65蛋白表达水平明显降低(P<0.05),OI明显升高(P<0.05)。结论PTL可改善CPB犬肺损伤,其机制可能与抑制NF-κB p65激活,减轻炎症反应有关。

人脐带间充质干细胞来源外泌体抗小鼠肾缺血再灌注损伤的机制

背景:人脐带间充质干细胞来源外泌体参与多种损伤修复过程,其对肾缺血再灌注损伤的影响以及具体机制还没有完全阐明。目的:探讨人脐带间充质干细胞来源外泌体治疗肾缺血再灌注损伤的分子机制。方法:①培养人脐带间充质干细胞,使用外泌体提取试剂盒获取外泌体并鉴定;②采用活体荧光成像技术检测外泌体在肾缺血再灌注损伤小鼠肾脏中的分布;③C57/BL6雄性小鼠30只,按随机数字表法分为5组:假手术组、肾缺血再灌注组、假手术组+Compound C组、肾缺血再灌注+外泌体组、肾缺血再灌注+外泌体+Compound C组,每组6只。除假手术组外,其余组均夹闭双侧肾蒂45 min,再灌注24 h建立肾缺血再灌注小鼠模型;假手术组+Compound C组和外泌体+Compound C组于造模前30 min腹腔注射AMPK抑制剂Compound C;外泌体组和外泌体+Compound C组在肾蒂夹闭前15 min经尾静脉注射外泌体。再灌注24 h检测各组小鼠血清肌酐和尿素氮水平、肾组织白细胞介素6和肿瘤坏死因子α水平、肾组织凋亡相关因子的表达。结果与结论:①人脐带间充质干细胞外泌体具有典型的茶托形态,直径分布在40-160 nm范围内,表达外泌体表面特异性标志膜蛋白;②与假手术组相比,肾缺血再灌注损伤小鼠肾脏更易聚集人脐带间充质干细胞外泌体;③外泌体预处理可减轻肾缺血再灌注小鼠肾损伤,降低肾小管上皮细胞凋亡水平,并且这种保护作用可被AMPK抑制剂所逆转。结果表明,人脐带间充质干细胞来源外泌体发挥肾缺血再灌注损伤的保护作用可能与激活AMPK/YAP1通路抗细胞凋亡有关。

骨髓间充质干细胞外泌体通过PI3K/Akt通路修复大鼠皮瓣缺血再灌注损伤的实验研究

目的探讨骨髓间充质干细胞外泌体(exosomes derived from bone marrow mesenchymal stem cell,BMSCs-Exos)通过PI3K/Akt通路修复皮瓣缺血再灌注损伤的机制。方法培养大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs),提取细胞上清液中的外泌体并通过电镜、粒径分析及免疫印迹实验进行鉴定。建立以腹壁浅动静脉为血管蒂的大鼠腹部皮瓣缺血再灌注损伤模型;将大鼠随机分为4组:Sham组、IR+PBS组、IR+Exo组及IR+Exo+LY组。术后观察并拍照记录大鼠皮瓣大体情况,第7天计算皮瓣坏死区比例;获取大鼠皮瓣组织样本,HE染色和组织评分评估皮瓣组织损伤程度,免疫组化评估皮瓣p-Akt、VEGFA表达水平和CD34标记的微血管密度。结果相比Sham组,IR+PBS组皮瓣坏死区比例增加,组织结构破坏加重,p-Akt及VEGFA表达水平下降,微血管密度降低;IR+Exo组皮瓣坏死和组织破坏水平降低,p-Akt及VEGFA表达上升,微血管密度增加;而PI3K抑制剂降低了BMSCs外泌体的修复作用,表现为皮瓣坏死增加,p-Akt及VEGFA表达下调,微血管密度减少。结论BMSCs外泌体对大鼠腹部皮瓣缺血再灌注损伤具有显著的保护和修复作用,PI3K/Akt信号通路可能是BMSCs外泌体治疗皮瓣缺血再灌注损伤的关键通路。

缺血及再灌注早期右美托咪定处理对体外循环下瓣膜置换术病人心脑保护作用及氧化应激反应的影响

目的:探究缺血及再灌注早期右美托咪定(Dex)处理对体外循环(CPB)下瓣膜置换术病人心脑保护作用及氧化应激反应的影响。方法:选择2018年2月—2020年2月我院收治的122例行CPB的瓣膜置换术病人作为研究对象,采用随机数字表法将病人分为对照组与观察组,每组61例。对照组采用常规方法处理,观察组采用Dex处理。比较两组麻醉后开胸前(T1)、CPB开始前即刻(T2)、CPB停机即刻(T3)、停机后2 h(T4)、停机后6 h(T5)、停机后24 h(T6)时的血流动力学、心肌损伤、脑氧代谢指标、脑损伤标志物及氧化应激指标。结果:两组T1时平均动脉压(MAP)、心率(HR)、中心静脉压(CVP)、血清肌酸激酶同工酶(CK-MB)、心肌肌钙蛋白I(cTnI)、内皮素-1(ET-1)、心型脂肪酸结合蛋白(H-FABP)、颈内静脉血氧饱和度(SjvO_(2))、动脉-静脉血氧含量差(Da-JvO_(2))、脑氧摄取率(ERO_(2))、血清中星形胶质源性蛋白(S-100β)、神经元特异性烯醇化酶(NSE)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、一氧化氮(NO)水平比较,差异均无统计学意义(P>0.05);两组T2~T6时MAP、HR、CVP、Da-JvO_(2)、ERO_(2)、NO、SOD明显低于T1时,CK-MB、cTnI、ET-1、H-FABP、SjvO_(2)、S-100β、NSE、MDA明显高于T1时(P<0.05);观察组T2~T6时MAP、HR、CVP、Da-JvO_(2)、ERO_(2)、NO、SOD明显高于同时间对照组,CK-MB、cTnI、ET-1、H-FABP、SjvO_(2)、S-100β、NSE、MDA明显低于同时间对照组(P<0.05)。结论:在缺血及再灌注早期给予Dex处理能够减轻对CPB下瓣膜置换术病人血流动力学、心肌损伤、脑氧代谢、脑损伤及应激指标的影响,提高手术的安全性。

人骨髓间充质干细胞及其外泌体在肝移植术后肝缺血再灌注损伤中潜在治疗作用的研究进展

肝缺血再灌注损伤(HIRI)是传统肝移植术中不可避免的病理生理过程,其严重程度受到来自供体和受体的多方面因素影响,最严重者可导致术后早期移植肝无功能。人骨髓间充质干细胞(BMSCs)及其外泌体已在临床试验中被证实具有促进组织修复与免疫调节的能力,这一治疗作用在HIRI的防治中具有较好的应用前景。该文旨在综述BMSCs及其外泌体在移植肝HIRI防治中潜在作用机制的研究进展及未来研究方向。

间充质干细胞来源外泌体在脑缺血再灌注损伤中神经保护作用的研究进展

脑卒中是导致我国成年人残疾、死亡的首位原因,其中80%以上的脑卒中为缺血性脑卒中。缺血再灌注损伤是导致缺血性脑卒中病人残疾、死亡的常见原因。目前,针对缺血再灌注损伤的临床药物主要包括自由基清除剂、钙离子拮抗剂和兴奋性氨基酸拮抗剂等,疗效不理想。近年来,越来越多的研究者开始尝试应用干细胞治疗,但动物实验发现移植的干细胞在脑内存活率较低,很少有干细胞能分化为神经元。令人意外的是,研究发现干细胞可以通过旁分泌外泌体发挥神经保护作用。但天然外泌体靶向能力差,目前已经研发的工程性外泌体针对神经细胞具有主动靶向能力。本文对间充质干细胞来源外泌体在脑缺血再灌注损伤中的神经作用研究进展作一综述。

干细胞外泌体减轻肝缺血再灌注损伤的研究进展

肝缺血再灌注损伤(HIRI)是肝脏在血流供应减少或者血流被阻断一定时间后恢复血供时引起的损伤,也是肝移植术和肝脏肿瘤切除术后常见的并发症,该过程会显著增加移植免疫排斥与感染导致的肝功能损伤的风险,因此,如何缓解HIRI亟待解决。外泌体(exosomes,Exo)是许多细胞都可以分泌的一种微小囊泡,具有诸多特性,可以作为细胞间进行沟通的一种媒介。间充质、骨髓干细胞来源的外泌体因具有抗炎和抗凋亡等作用,使得器官缺血再灌注损伤的缓解和修复成为了可能,因此具有一定潜在的临床应用价值。

氧控制性再灌注抗犬体外循环肺缺血再灌注早期损伤

【目的】探讨氧控制性再灌注(OCR)对体外循环肺缺血再灌注(I/R)早期损伤的作用。【方法】14只健康犬随机分为对照组(I/R,n=7)和实验组(OCR,n=7)。对照组全程FiO2 80%;实验组在主动脉开放即刻调整FiO2至40%,随后每5 min依次上调10%,最后达80%,其余时段均维持FiO2 80%。检测动脉血气,观察两组犬在麻醉后、主动脉开放前、开放后5、10、15、20、25 min以及停机前动脉血氧分压的变化。在开胸后即刻(T1)、主动脉开放25 min(T2)、主动脉开放90 min(T3)分别留取血液标本及肺标本。酶联免疫吸附法检测血清白介素6和肿瘤坏死因子α含量;检测肺组织干湿重比;比色法检测肺组织髓过氧化物酶活性、丙二醛含量;Western Blot检测肺组织核因子kappa B蛋白含量;光镜观察并盲法评分比较肺组织病理学变化。【结果】实验组动脉血氧分压在主动脉开放后5、10、15、20 min均明显低于对照组(P<0.05)。两组相比,实验组血清白介素6和肿瘤坏死因子α含量在T2和T3时点较对照组降低(P<0.05)。实验组肺组织干湿重比、髓过氧化物酶活性、丙二醛含量和核因子kappa B蛋白表达在T2和T3时点较对照组降低(P<0.05)。实验组肺损伤评分在T2和T3时点低于对照组(P<0.05)。【结论】氧控制性再灌注可抑制体外循环肺缺血再灌注早期炎性细胞浸润,抑制核因子kappaB蛋白表达。提示氧控制性再灌注对体外循环肺缺血再灌注早期损伤具有一定的保护作用。

盐酸戊乙奎醚对体外循环心脏手术缺血再灌注心肌保护作用的Meta分析

目的采用Meta分析评价盐酸戊乙奎醚对体外循环(CPB)心脏手术缺血再灌注心肌的保护作用。方法通过计算机检索中国知网(CNKI)、中国生物医学文献数据库(CBM)、万方数据知识服务平台、维普网,内容为CPB心脏手术中使用盐酸戊乙奎醚的随机对照研究(RCTs),检索时间为建库至2021年11月,采用RevMan 5.3软件对收集的资料进行Meta分析。结果纳入研究12项,患者464例,其中盐酸戊乙奎醚组239例,对照组225例。与对照组比较,盐酸戊乙奎醚组术后24 h[WMD=-0.37,95%CI(-0.49~-0.24),P<0.00001]及术后48 h[WMD=-0.98,95%CI(-1.38~-0.58),P<0.00001]心肌肌钙蛋白I(cTnI)水平显著降低;盐酸戊乙奎醚组术后24 h[WMD=-22.13,95%CI(-29.40~-14.86),P<0.00001]及CPB停止即刻[WMD=-24.62,95%CI(-33.02~-16.22),P<0.00001]肌酸激酶同工酶(CK-MB)水平显著降低;主动脉开放30 min,2组cTnI及CK-MB水平比较差异均无统计学意义(P>0.05)。结论盐酸戊乙奎醚能降低CPB心脏手术患者cTnI及CK-MB水平,对缺血再灌注心肌具有保护作用。

七氟醚后处理下调RAGE抑制犬体外循环肺缺血/再灌注损伤

目的探讨七氟醚后处理对犬体外循环肺缺血/再灌注损伤的效果及晚期糖基化终末产物受体(receptor for ad-vanced glycosylation end products,RAGE)在此过程中的作用。方法 12只健康犬依据主动脉开放后是否吸入七氟醚随机分为两组:对照组(control,n=6)在主动脉开放后常规机械通气和实验组(test,n=6)在主动脉开放后吸入1MAC七氟醚,持续10min。在开胸后即刻(T1)、主动脉开放90min实验结束前(T2)留取肺组织标本和肺静脉血标本。标检测肺组织湿干重比(wet/dry weight,W/D);比色法检测肺组织髓过氧化物酶活性(myeloperoxidase activity,MPO);光镜观察并盲法评分比较肺组织病理学变化;分别采取RT-PCR方法、Western blot检测肺组织RAGE的表达;酶联免疫吸附法检测血清白介素6(IL-6)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)含量。结果两组相比,实验组肺组织W/D、MPO、肺损伤评分、RAGE基因表达和蛋白表达、IL-6和TNF-α含量在T2时较对照组降低(P<0.05);组内比较,所有指标实验结束时均较基础值明显升高(P<0.05)。结论七氟醚后处理对体外循环缺血/再灌注导致的肺损伤具有一定的保护作用,可能与其抑制RAGE合成与激活有关。

体视学定量法评估氧控制性再灌注对犬体外循环肺缺血再灌注早期损伤的保护作用

利用体视学定量法,评估氧控制性再灌注对体外循环肺缺血再灌注早期损伤的保护作用。14只健康犬随机分为缺血再灌注组(IR,n=7)和氧控制性再灌注组(OCR,n=7)。IR组全程FiO2 80%;OCR组在主动脉开放即刻调整FiO2至40%,随后每5 min依次上调10%,最后达80%,其余时段均维持FiO2 80%。在开胸后即刻(T1)、主动脉开放25 min(T2)、主动脉开放90 min(T3),留取肺组织标本进行HE染色。每张切片随机取10个视野,用Image-Pro图像分析软件,分别测试肺泡间隔中性粒细胞(PMN)计数、肺泡间隔面积密度(PASAD)、肺泡腔体积密度和肺实质红细胞体积密度,检测肺组织湿干重比(W/D)。两组肺组织各参数在T1差异无显著性(P>0.05),OCR组肺泡间隔中性粒细胞计数、肺泡间隔面积密度和红细胞体积密度在T2和T3时点较IR组降低(P<0.05),OCR组肺泡腔体积密度在T2和T3时点较IR组明显增大(P<0.05)。OCR组肺组织湿干重比(W/D)在T2和T3时点较IR组明显降低(P<0.05)。采用体视学定量法,提示氧控制性再灌注对体外循环肺缺血再灌注早期损伤具有保护作用。

腺苷对犬体外循环后肺缺血-再灌注损伤的作用

目的 研究腺苷是否能减轻体外循环后肺组织损伤。 方法 12条犬随机分为实验组和对照组。建立体外循环模型 ,实验组使用腺苷 (5 0 μg/kg·min)中心静脉持续滴注 ;对照组滴注生理盐水。分别于各时间点测定血流动力学、右心功能和动脉血气分析 ;测定肺组织含水量、丙二醛含量 ,并进行病理分析。 结果 两组心率、体循环平均动脉压、左心房压、中心静脉压比较无差异 ,与对照组比较实验组体外循环后肺血管阻力降低 ,右心功能改善 ,动脉血氧分压明显升高 ;肺组织含水量较少 ,肺组织丙二醛含量较低 (P<0 .0 5或 P<0 .0 1)。病理检查 :实验组犬肺泡结构正常 ,无明显中性粒细胞浸润。 结论 腺苷能够减轻体外循环后肺缺血 -再灌注损伤 ,改善右心功能 ,在一定剂量范围内并不对体循环血流动力学构成明显影响。

自体肺体外循环对肺缺血再灌注损伤的保护作用研究

目的:探讨自体肺体外循环对肺缺血再灌注损伤的保护作用。方法:16只健康成年杂种犬随机分为实验组和对照组,每组8只。实验组为自体肺体外循环组,利用犬自体肺作为氧合器,对照组利用鼓泡式氧合器。实验组同时行左心和右心转流,对照组行常规转流。两组采用相同的心肌保护(冷晶体停跳液),两组体外循环均持续1h,于体外循环前、停机第5、30、60、90min后分别测定:右、左心房白细胞记数,并记算其比值;肺动脉压;动脉血氧分压。两组于体外循环前、体外循环结束后,分别取肺标本(3cm×3cm×2cm)行病理学检查。结果:体外循环后右、左心房白细胞比值自体肺组低于常规体外循环组;体外循环后自体肺组肺动脉压低于常规体外循环组,其中第30、60、90min时间点有显著性差异;自体肺组体外循环后动脉血氧分压高于常规体外循环组,差异有显著性。肺标本组织学检查示:体外循环后自体肺组肺标本毛细血管轻度淤血,轻度中性粒细胞及淋巴细胞聚集;无肺水肿、肺不张;肺泡腔隙基本正常,无明显肺组织损伤性改变。人工肺组体外循环后毛细血管、小静脉严重淤血,中性粒细胞显著聚集。结论:自体肺体外循环组有较好的肺保护作用,减轻了缺血再灌注对肺的炎症损伤。

外源性阿片肽预处理对体外循环后猪肺缺血再灌注损伤的保护作用

目的:观察外源性阿片肽(DADLE)对体外循环(CPB,cardiopulmonary bypass)后猪肺缺血再灌注损伤的保护作用,探讨其可能的保护机制。方法:选取28只雄性幼猪,随机分为4组(n=7),分别为假手术组(Sham组)、体外循环模型组(CPB模型组)、DADLE预处理组(DADLE组)和ATP敏感钾离子通道阻断剂(Glibenclamide)阻断组(KATP阻断组)。Sham组仅予以开胸和主动脉及上下腔静脉插管操作,其余3组均建立CPB模型,并给予各自不同的预处理。CPB术前及再灌注不同时间点(10、30、60 min)比较各组动物气道峰压(peak inspiratory pressure,PIP)、动脉血氧分压(PaO2)、血清中丙二醛(maloudialde-hyde,MDA)含量。CPB术前及再灌注60 min各组取相同部位肺组织测定肺湿干重比(wet/dry weight ratio,W/D);再灌注60min时处死动物,计算肺损伤程度(lung tissue damage,LTD)并观察肺泡上皮超微结构的改变。结果:CPB术前各组间PaO2、PIP、MDA和W/D无显著差异;Sham组各时间点上述指标无明显变化。再灌注60 min,CPB模型组和KATP阻断组PaO2明显低于Sham组和DADLE组,而PIP、MDA、W/D和LTD显著高于Sham组和DADLE组(P<0.05或0.01);DADLE组LTD高于Sham组(P<0.05),其余指标无明显差异;CPB模型组和KATP阻断组间上述指标无显著差异。肺泡上皮超微结构观察发现CPB模型组和KATP阻断组肺泡上皮细胞损伤重于Sham组和DADLE组。结论:外源性阿片肽预处理可能通过促进ATP敏感钾通道的开放保护肺功能,从而减轻CPB术后的肺缺血再灌注损伤。

乌司他丁上调水通道蛋白1保护新生猪体外循环肺缺血/再灌注损伤

目的探讨乌司他丁对新生猪体外循环肺缺血/再灌注后的保护作用以及水通道蛋白1(aquaporin 1,AQP1)在此病理过程中的表达。方法 12只健康新生猪依据主动脉开放前是否通过肺动脉注射乌司他丁,随机分为两组:对照组(control,n=6)和实验组(test,n=6),实验组在主动脉开放前通过肺动脉注射乌司他丁10 000 U.kg-1(0.154 mol.L-1生理盐水稀释至30 ml)。在开胸后即刻(T1)、主动脉开放90 min实验结束前(T2)留取肺泡灌洗液、肺组织标本和肺静脉血标本。光镜观察并盲法评分比较肺组织病理学变化;检测肺泡灌洗液中性粒细胞(PMN)计数;酶联免疫吸附法检测肺静脉血清白介素6(IL-6)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)含量;肺组织湿干重比(wet/dry weight,W/D);免疫组化和Western blot检测肺组织AQP1表达。结果两组相比,实验组肺组织病理变化明显减轻;肺泡灌洗液中性粒细胞(PMN)计数、IL-6、TNF-α和肺组织湿干重比明显降低以及AQP1表达明显提高(P<0.05)。结论乌司他丁对新生猪体外循环肺缺血/再灌注损伤具有一定的保护作用,可能的作用机制与其促进AQP1蛋白表达有关。

体外循环犬单肺缺血再灌注损伤模型的建立

目的建立体外循环单肺缺血再灌注损伤动物模型。方法 6只健康杂种犬阻断左肺动脉,终止左肺血供及通气,造成左肺缺血,并循体外循环60 min后开放左肺动脉,恢复左肺血供及通气形成再灌注损伤,左肺再灌注2.5 h后结束实验,右肺全程维持血供及通气。于CPB前(T1)、阻断左肺动脉并循60 min(T2)、再灌注2.5 h(T3)三个时间点观察肺组织病理学变化并进行评分,对比肺动态顺应性(CD)、氧和指数(OI)、呼吸指数(RI)变化比例。结果①病理学变化:CPB后左、右肺组织见大量炎性细胞浸润,肺泡间隔增宽,肺泡壁断裂甚至坏死;左肺病理改变较右肺严重;②病理切片评分:CPB后左、右肺病理评分逐渐升高;T1时点左、右肺组织评分无差异,T2、T3时点左肺评分明显高于右肺;③CD、OI、RI变化比例:CPB后CD、OI明显下降,RI明显升高;左肺CD、OI下降程度、RI升高程度较右肺明显。结论本实验动物模型建立成功,能全面地模拟临床心脏手术过程,对CPB肺保护相关研究有着积极的推动作用。

人脐带间充质干细胞来源外泌体通过调控SLC7A11/GPX4通路缓解大鼠肾缺血再灌注损伤

目的基于铁死亡SLC7A11/谷胱甘肽过氧化物酶4(glutathione peroxidase 4,GPX4)通路探讨人脐带间充质干细胞(human umbilical cord mesenchymal stem cells,HucMSCs)来源外泌体(HucMSCs exosome,HucMSCs-exo)减轻大鼠肾缺血再灌注(ischemia reperfusion,I/R)损伤的作用及机制。方法培养HucMSCs细胞,差速离心法获取外泌体,透射电镜观察外泌体形态,纳米颗粒追踪技术检测外泌体粒径,Western blot鉴定表面标志蛋白物。夹闭双侧肾蒂45 min,再灌注24 h建立肾I/R大鼠模型。雄性7~8周龄SD大鼠30只,体质量200~230 g,按随机数字表法分为5组:假手术组(Sham组)、假手术组+SLC7A11抑制剂erastin(Sham+erastin组)、肾缺血再灌注组(I/R组)、肾缺血再灌注+外泌体组(Exo组)、肾缺血再灌注+外泌体+erastin组(Exo+erastin组),每组各6只。Sham+erastin组和Exo+erastin组于造模前30 min腹腔注射erastin 10 mg/kg;Exo组和Exo+erastin组在肾蒂夹闭前15 min经尾静脉注射HucMSCs-exo 20μg。恢复再灌注24 h后取材检测,检测血清尿素氮(BUN)以及肌酐(Cr)水平;光镜下观察HE染色后大鼠肾组织病理学改变并进行Paller评分,检测肾组织铁死亡标志物二价铁离子(Fe2+)、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽(GSH)含量和活性氧(ROS)水平;Western blot检测肾组织中SLC7A11/GPX4通路相关蛋白表达。结果与Sham组比较,I/R组血清BUN水平、Cr水平上升(P<0.05);肾组织病理损伤明显,Paller评分、Fe2+和MDA含量上升(P<0.05),ROS水平升高(P<0.05),GSH含量下降,SLC7A11和GPX4蛋白表达下降(P<0.05)。与I/R组比较,Exo组明显降低血清BUN水平、Cr水平(P<0.05);肾组织病理损伤减轻,Paller评分、Fe2+含量、MDA含量和ROS水平下降(P<0.05),同时增加GSH含量、SLC7A11及GPX4蛋白表达(P<0.05)。给予SLC7A11抑制剂erastin后可显著减弱HucMSCs-exo对铁死亡的抑制和肾I/R损伤的保护作用。结论HucMSCs-exo可明显减轻肾I/R损伤发挥保护作用,其机制可能与上调SLC7A11/GPX4信号通路抑制铁死亡有关。