薇乔抗菌缝线体外打ROEDER结在腹腔镜胆囊切除术中的应用

目的探讨1号薇乔抗菌缝线体外打Roeder结在腹腔镜胆囊切除术的应用价值。方法回顾性分析2010年8月～2011年11月我院73例患者行1号薇乔抗菌缝线体外打Roeder结在腹腔镜胆囊切除术的临床资料。结果73例患者手术均获得成功,术中无需使用钛夹、生物可吸收夹、Hem-o-Lock及在腹腔内打结等方法处理胆囊管及胆囊动脉,手术平均时间54 mim,无中转开腹,术后无出血、胆漏、切口感染、脐疝等并发症,术后3～5 d出院,73例随访1～12个月,平均6个月,腹部戳口瘢痕不明显。结论 1号薇乔抗菌缝线体外打Roeder结行腹腔镜胆囊切除术后无异物残留,拓宽手术指征,安全可行,美容效果好,操作简单,利于推广。

结直肠癌外泌体诱导肿瘤相关巨噬细胞极化抑制CD8^(+)T细胞抗肿瘤活性

目的探讨结直肠癌外泌体诱导巨噬细胞极化对CD8^(+)T细胞抗肿瘤活性的影响。方法M0型巨噬细胞与PBS及HT-29和LoVo细胞外泌体(HT-29 exo和LoVo exo)共孵育48 h(PBS组、HT-29 exo组、LoVo exo组),实时定量PCR检测细胞中M2型巨噬细胞标志物CD206、Arginase-1、IL-10、CD163以及M1型巨噬细胞标志物iNOS和IL-1βmRNA表达量。CD8^(+)T细胞与PBS组、HT-29 exo组和LoVo exo组M0巨噬细胞共孵育48 h(PBS+M0组、HT-29 exo+M0组和LoVo exo+M0组),流式细胞术检测CD8^(+)T细胞中PD-1的表达。将PBS+M0组、HT-29 exo+M0组和LoVo exo+M0组CD8^(+)T细胞分别与HT-29及LoVo细胞共孵育24 h(PBS+M0/CD8^(+)T组,HT-29 exo+M0/CD8^(+)T组和LoVo exo+M0/CD8^(+)T组),ELISA检测细胞上清γ干扰素(IFN-γ)、穿孔素(perforin)和颗粒酶B(granzyme B)浓度,细胞毒性实验检测HT-29和LoVo细胞裂解率。结果与PBS组相比,HT-29 exo组、LoVo exo组细胞中CD206、Arginase-1、IL-10、CD163 mRNA表达显著上调(P<0.05),iNOS和IL-1βmRNA表达显著下调(P<0.05)。与PBS+M0组相比,HT-29 exo+M0组和LoVo exo+M0组CD8^(+)T细胞PD-1表达上调(P<0.001)。与PBS+M0/CD8^(+)T组相比,HT-29 exo+M0/CD8^(+)T组和LoVo exo+M0/CD8^(+)T组细胞培养上清中IFN-γ、perforin、granzyme B浓度以及HT-29和LoVo细胞裂解率均显著降低(P<0.001)。结论HT-29 exo和LoVo exo诱导的M2型巨噬细胞可抑制CD8^(+)T细胞抗肿瘤活性。

外泌体miR-47V2-3p在结直肠癌化疗耐药中的作用及机制研究

目的探讨外泌体miR-47V2-3p在结直肠癌化疗耐药中的作用及机制。方法纳入60只SD级小鼠,先建立结直肠癌模型,后将其分成氟尿嘧啶给药组、外泌体携带miR-47V2-3p模拟物组、外泌体携带miR-47V2-3p抑制剂组、氟尿嘧啶+外泌体携带miR-47V2-3p模拟物组、氟尿嘧啶+外泌体携带miR-47V2-3p抑制剂组和对照组6组各10只小鼠。小鼠均接种SW480细胞,通过原位杂交检测小鼠细胞miR-47V2-3p表达水平,同时检测SW480细胞增殖抑制率。结果与对照组比较,氟尿嘧啶给药组、外泌体携带miR-47V2-3p模拟物组、外泌体携带miR-47V2-3p抑制剂组、氟尿嘧啶+外泌体携带miR-47V2-3p模拟物组、氟尿嘧啶+外泌体携带miR-47V2-3p抑制剂组检测组织miR-47V2-3p表达水平和不同培养基浓度下SW480细胞增殖抑制率均升高,差异有统计学意义(P<0.05)。与氟尿嘧啶给药组比较,外泌体携带miR-47V2-3p模拟物组、外泌体携带miR-47V2-3p抑制剂组、氟尿嘧啶+外泌体携带miR-47V2-3p模拟物组、氟尿嘧啶+外泌体携带miR-47V2-3p抑制剂组检测组织miR-47V2-3p表达水平升高;与外泌体携带miR-47V2-3p模拟物组比较,氟尿嘧啶+外泌体携带miR-47V2-3p模拟物组、氟尿嘧啶+外泌体携带miR-47V2-3p抑制剂组检测组织miR-47V2-3p表达水平升高;与外泌体携带miR-47V2-3p抑制剂组比较,氟尿嘧啶+外泌体携带miR-47V2-3p模拟物组、氟尿嘧啶+外泌体携带miR-47V2-3p抑制剂组检测组织miR-47V2-3p表达水平升高;与氟尿嘧啶+外泌体携带miR-47V2-3p模拟物组比较,氟尿嘧啶+外泌体携带miR-47V2-3p抑制剂组检测组织miR-47V2-3p表达水平升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。氟尿嘧啶给药组、外泌体携带miR-47V2-3p模拟物组、外泌体携带miR-47V2-3p抑制剂组、氟尿嘧啶+外泌体携带miR-47V2-3p模拟物组、氟尿嘧啶+外泌体携带miR-47V2-3p抑制剂组不同培养基浓度下SW480细胞增殖抑制率依次逐渐降低,两两比较差异均有统计学意义(P<0.05)。结论针对结直肠癌,外泌体miR-47V2-3p在化疗耐药中起着关键作用,可影响化疗的敏感性及效果。

结直肠癌患者血清外泌体lnc-KIAA1586-2的表达及其临床意义

目的探讨血清外泌体来源lnc-KIAA1586-2在结直肠癌(colorectal cancer,CRC)患者中的表达水平及其临床意义。方法收集2019年1月至2020年12月临床明确诊断的110例CRC患者及同期100名健康体检者血清标本,同时收集所有患者的临床资料。qRT-PCR法检测血清外泌体中lnc-KIAA1586-2的表达水平,电化学发光法检测血清CEA与CA19-9的表达水平。采用ROC曲线评价不同指标的诊断效能,并分析其与患者临床病理特征的关系。采用Cox比例风险模型进行多变量回归分析。结果CRC患者血清外泌体中lnc-KIAA1586-2的相对表达水平(2.96±0.13)显著高于健康对照组(1.56±0.11)(t=9.53,P<0.001),患者术后血清外泌体lnc-KIAA1586-2相对表达水平显著下降。ROC曲线分析结果表明,血清外泌体lnc-KIAA1586-2诊断CRC的AUC为0.832,显著优于传统肿瘤标志物CEA、CA19-9的诊断效能。单因素分析发现血清外泌体lnc-KIAA1586-2相对表达量与肿瘤长径(χ^(2)=6.53,P<0.05)、TNM分期(χ^(2)=5.61,P<0.05)及淋巴结转移(χ^(2)=8.49,P<0.05)等均有显著相关性。进一步多变量回归分析发现,手术前血清外泌体lnc-KIAA1586-2的相对表达水平(HR=2.858,95%CI:1.218~4.984,P=0.012)可以作为CRC患者预后生存的独立预测因子。结论CRC患者血清外泌体lnc-KIAA1586-2相对高表达,具有良好的诊断效能,有望成为CRC患者诊断和预后评估的潜在生物标志物。

穴位及经筋结点体外冲击波疗法治疗膝骨关节炎的临床研究

随着社会人口老龄化,膝骨关节炎(knee osteo-arthritis,KOA)已成为严重威胁中老年人健康的慢性疾病,可引发膝关节疼痛及功能障碍[1]。KOA归属于中医骨伤学“膝痹”“筋痹”范畴,针灸治疗可有效减少KOA局部炎症反应、改善局部血供、调节疼痛介质水平、刺激软骨增殖,从而减轻疼痛症状、改善膝关节功能[2]。体外冲击波疗法(extra-corporeal shock wave therapy,ESWT)是一种力学生物刺激疗法,通过物理机械产生的效应松解组织粘连、扩张血管,促进组织损伤修复,已在肌腱末端病、骨不连、距骨软骨损伤及股骨头坏死等疾病中取得良好的治疗效果[3]。将ESWT结合传统穴位及经筋结点应用于骨肌系统疾病的治疗,结合中医学中经络穴位和经筋结点通经活络的治疗作用及ESWT的无创优点,不仅可免除患者针刺的痛苦,而且ESWT可将能量作用于深层的位点,持久有效刺激穴位及经筋结点,促进软骨及软骨下骨损伤修复[4]。本研究将穴位和经筋结点联合ESWT应用于KOA的治疗,现将结果报道如下。

外泌体miRNA在结直肠癌诊断、治疗和预后中的研究进展

根据全球癌症观察站2024年的最新数据,全球结直肠癌(colorectal cancer,CRC)发病率持续上升,是全球第三大常见癌症。2022年报告显示CRC新发病例数达到190万,占所有癌症病例的9.6%。预计到2050年,由于人口老龄化和风险因素的增加,CRC的新发病例将进一步显著增长[1]。

肿瘤干细胞源性的外泌体促进结直肠癌细胞的化疗耐药和侵袭

肿瘤干细胞作为肿瘤组织中一小群具有自我更新和多向分化潜能的细胞,可以启动原发肿瘤并介导治疗耐药、肿瘤复发和转移,但其在细胞间层面如何影响结直肠癌的机制仍尚不清楚。因此,本文探究了肿瘤干细胞及其分泌的外泌体对结直肠癌恶性表型的影响。首先,从结直肠癌肿瘤组织中分离出CD166+CD44+肿瘤干细胞(CSC),通过超速离心法提取肿瘤干细胞源性的外泌体(CSC-exo)和结直肠癌SW480细胞源性的外泌体(S-exo),并进行NTA粒径分析、电镜观察和Western印迹鉴定。将成功分离得到的CSC和CSCexo与结直肠癌SW480细胞共培养,共培养后的细胞通过CCK-8、细胞凋亡实验发现,经过CSC或CSCexo共培养后的SW480细胞凋亡率从20%下降至13%(P<0.01),并且侵袭能力显著增加(P<0.001)。此外,通过动物体内实验发现,S-exo治疗组的肿瘤生长速度比CSCexo治疗组的缓慢,CSCexo抑制了5-FU对结直肠癌肿瘤的药物疗效。PET/CT显像、免疫组化分析以及Western印迹结果显示,CSCexo增强了结直肠癌肿瘤对葡萄糖类似物18F-FDG的摄取和糖酵解酶HK2、PFKFB2、PKM2和LDHA的表达。此外,用siRNA干扰糖酵解酶的表达会阻断CSCexo引起的耐药现象。综上,本研究表明,结直肠癌干细胞传递外泌体影响肿瘤葡萄糖代谢途径,并促进化疗耐药和侵袭能力,揭示了恶性肿瘤微环境的形成和动态变化机制。

异鼠李素通过nSMase2依赖的外泌体生成途径抑制结肠癌肝转移的作用机制初探

目的探讨中药活性成分异鼠李素(isorhamnetin,ISO)对结肠癌肝转移和肿瘤外泌体分泌的干预作用,并进一步揭示其潜在作用机制。方法使用CCK-8法检测ISO对小鼠结肠癌细胞MC38细胞增殖的影响。使用NanoSightNS300系统检测ISO对MC38细胞外泌体释放的影响。通过实时荧光定量检测系统(quantitative PCR detecting system,qPCR)检测ISO对MC38细胞对中性鞘磷脂酶-2(neutral sphingomyelinase 2,nSMase2)、Rab27a等外泌体生成、分泌相关基因表达的影响。将12只C57BL/6小鼠随机分为对照组、MC38-外泌体组、ISO组、阳性对照组(外泌体抑制剂GW4869组),造模4周后检测小鼠肝脏转移灶数量及肝脏重量。通过qPCR检测肝转移灶中nSMase2、Rab27a等外泌体生成、分泌相关基因的表达情况。结果ISO能够抑制MC38细胞增殖,且在20μmol/L浓度以下时,抑制率低于10%,为无毒剂量;ISO能够减少MC38细胞外泌体的分泌,且具有时间依赖性(P<0.05);ISO能够抑制MC38细胞中外泌体生成相关基因nSMase2 mRNA的表达(P<0.001),而对外泌体分泌相关基因表达无明显抑制作用。与对照组比较,ISO组小鼠的肝脏重量明显降低(P<0.05),转移瘤数目明显减少;ISO能明显抑制小鼠结肠癌肝转移灶中外泌体生成相关基因nSMase2 mRNA的表达(P<0.001)。结论ISO可能通过nSMase2依赖途径抑制小鼠结肠癌细胞外泌体生成,进而抑制结肠癌肝转移。

外泌体参与结直肠癌肝转移发病机制的研究进展

结直肠癌是全世界最常见的第三大癌症,60%的患者在未经过有效治疗的情况下会发生肝转移。其发病率和死亡率均很高。尽管诊断和治疗技术取得了很大进展,但结直肠癌肝转移(colorectal cancer liver metastasis,CRLM)患者的生存率仍然很低。外泌体作为细胞间通讯中的重要介质被广泛研究,在CRLM发病过程中的每一步都有非常重要的影响。本文归纳了不同来源、不同内含物外泌体通过包括:促进上皮-间充质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)、调节细胞外基质(extracellular matrix,ECM)、增加血管生成和血管通透性、促进转移前生态位(pre-metastatic niche,PMN)形成、参与免疫抑制等途径来影响CRLM发病的机制,以期为未来CRLM提供潜在诊断及治疗靶点。

基于Rab27a研究厚朴三物汤对结直肠癌模型小鼠外泌体的影响

目的 探讨厚朴三物汤对C57BL/6J小鼠皮下瘤的影响和机制。方法 将小鼠结直肠癌MC-38细胞通过皮下注射入C57BL/6J小鼠体内建立结直肠癌皮下瘤模型,将造模成功的小鼠随机分组为模型对照组、厚朴三物汤低剂量组、厚朴三物汤中剂量组、厚朴三物汤高剂量组、5-氟尿嘧啶组(5-FU组)、联合组(5-氟尿嘧啶+厚朴三物汤中剂量组),每组小鼠各6只。分别给予生理盐水和厚朴三物汤灌胃或生理盐水和5-FU腹腔注射,每天1次,连续24 d。干预期间定期检测小鼠精神状态、饮食等一般情况、定期检测小鼠肿瘤体积的变化。取材后,对各组皮下瘤进行称重并采用HE染色观察小鼠皮下瘤病理组织变化;采用透射电子显微镜、Western blot、NTA对结直肠癌组织来源的外泌体进行鉴定;采用RT-qPCR和Western blot检测肿瘤组织中Rab27a和外泌体标志物CD63、TSG101、ALIX的mRNA和蛋白表达水平。结果 厚朴三物汤可以抑制小鼠肿瘤的生长,厚朴三物汤各剂量组、联合组的肿瘤生长缓慢,均受到不同程度的抑制,其中中药各剂量组以中剂量灌胃抗癌效果最佳,且与5-FU联用(联合组)呈协同作用;厚朴三物汤可以促使肿瘤发生坏死,表现出与5-FU组相同的抗癌作用,剂量越高,坏死程度越严重,并且厚朴三物汤与5-FU联用(联合组)呈协同作用;厚朴三物汤可以抑制小鼠Rab27a和外泌体中特异性标志物CD63、ALIX和TSG101的蛋白表达量和mRNA的相对表达量。结论 厚朴三物汤的抗结直肠癌机制可能与Rab27a调控的外泌体分泌减少有关。

外泌体在结直肠癌侵袭转移作用的研究进展

结直肠癌已经发生转移的病人疗效并不理想。外泌体在癌细胞的各个方面发挥重要作用,对结直肠癌侵袭转移过程的影响也被逐渐揭示。本文对外泌体在结直肠癌侵袭转移过程中的作用进行综述。

外泌体非编码RNA作为结直肠癌标志物的研究进展

结直肠癌是目前全球常见恶性肿瘤之一,其发病率和死亡率在我国逐年升高,早期发现及治疗对改善患者的生活质量有重要意义。而结肠镜下病理活检和结直肠癌血清标志物检测无法完全实现早期诊断。外泌体是一种直径为30~140 nm的双层膜囊泡结构,具有异质性和稳定性,存在于几乎所有的体液中。研究表明,外泌体非编码RNA(miRNA、circRNA、lncRNA)与肿瘤的发生发展有着密切关系。本文对近年来外泌体非编码RNA作为结直肠癌诊断、预后及耐药的标志物相关研究作一综述。

体外冲击波冲击结筋病灶点治疗臀肌筋膜炎42例临床观察

目的观察体外冲击波治疗臀肌筋膜炎临床疗效情况。方法 80例患者随机分成两组,治疗组42例采用体外冲击波冲击结筋病灶点治疗,对照组38例采用推拿疗法,观察两组治疗4周后的疗效和VAS改变情况。结果治疗组治疗后的VAS评分为(2.23±1.70),明显低于对照组(3.03±1.55),差异具有统计学意义(P<0.05);治疗组有效率95.24%,对照组有效率84.21%,两组比较,差异无统计学意义(P>0.05),治疗组愈显率83.33%,对照组愈显率57.84%,治疗组明显优于对照组(P<0.05)。结论采用体外冲击波冲击结筋病灶点治疗臀肌筋膜炎具有明显的优势。

结直肠癌细胞外泌体的制备及其促单核细胞增殖作用

目的:从结直肠癌细胞系中分离鉴定外泌体,初步研究结直肠癌来源的外泌体潜在的免疫学特性,为外泌体在结直肠癌免疫学治疗中的应用提供依据。方法:超速离心法从HCT116和SW480 2种结直肠癌细胞系培养上清中分离提取正常细胞外泌体和热休克细胞外泌体,进一步用220nm的滤膜进行纯化获得纯度较高的外泌体。采用透射电镜观察所提取外泌体表征形态,聚丙烯酰胺凝胶电泳法分析细胞和外泌体的蛋白组成,检测外泌体促进外周血单个核细胞(PBMCs)的增殖功能。结果:透射电镜下正常的外泌体和细胞热休克获得的外泌体形态相近,均呈现典型的圆形或椭圆形外泌体结构,直径为50～100nm。聚丙烯酰胺凝胶电泳,结直肠癌细胞裂解物与结直肠癌细胞系来源外泌体的蛋白组成不同,与未处理和经热休克处理的结直肠癌细胞比较,外泌体对PBMCs的增殖有更强的促进作用(P<0.05),热休克作用可使外泌体诱导的PBMCs的增殖程度显著升高(P<0.05)。结论 :超速离心法和滤膜过滤方法可有效地从结直肠癌细胞系中提取外泌体,细胞裂解物和外泌体的蛋白组成差异可能是造成免疫学特性差异的主要原因,将细胞经热休克处理可增强外泌体的免疫原性。

血清饥饿对结肠癌HCT116细胞外泌体分泌的影响

目的:本研究尝试使用添加无外泌体血清(E x o s o m e-d e p l e t e d F B S)的培养基培养细胞并提取外泌体,比较无外泌体血清和传统的无血清两种不同的培养条件对结肠癌H C T116细胞外泌体分泌的影响,旨在优化外泌体提取条件,使之有利于后续功能研究.方法:采用提取前24 h无血清和添加无外泌体血清培养基培养结肠癌细胞,普通光学显微镜下观察两种培养条件下细胞的生长和形态,用超速离心法分步提取分泌到细胞培养上清中的外泌体,透射电子显微镜下观察外泌体的形态,蛋白免疫印迹法分析外泌体标志蛋白,以及纳米颗粒追踪计数分析外泌体大小和含量.结果:与无血清培养条件相比,添加无外泌体血清培养的HCT116细胞生长状态良好,细胞无明显死亡现象.两种培养条件分泌的外泌体形态相近,均呈圆形或椭圆形,由脂质双分子层包裹的小囊泡,直径为40-100 nm.无外泌体血清培养条件分泌的外泌体大约是无血清培养的6倍,二种培养条件下提取的外泌体直径均为90 nm左右,与电镜结果一致.两种培养条件提取的外泌体中均检测到HSP70和CD63外泌体标志蛋白.结论:添加无外泌体血清培养HCT116细胞分泌的外泌体与无血清培养相比无明显差异,但添加无外泌体血清培养的细胞状态比无血清培养的细胞状态好,外泌体的分泌可能更接近生理条件下的生长环境,分泌的外泌体数量更多,因此无外泌体血清培养条件较无血清培养更适合结肠癌来源外泌体的提取和研究.

热休克诱导结直肠癌细胞外泌体的免疫效应

目的探讨热休克影响结直肠癌细胞外泌体诱导树突状细胞肿瘤相关蛋白因子的释放和细胞毒效应。方法临床经病理学确诊的结直肠管状腺癌细胞分离培养,43℃热休克1h,四步离心获得细胞上清外泌体。诱导树突状细胞刺激细胞毒反应。酶联免疫测定树突状细胞释放TNF-α、MIP-1α、RANTES,MTT法测定对结直肠癌细胞的杀伤作用。结果结直肠癌细胞热休克获得的外泌体刺激DC分泌TNF-α、MIP-1α、RANTES,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05)。热休克促进外泌体诱导的结直肠癌细胞杀伤活性,与未经热休克培养获得的外泌体诱导组比较差异有统计学意义(P<0.05),与结直肠癌细胞裂解物诱导组比较差异具有统计学意义(P<0.01),未经热休克培养获得的外泌体诱导组与癌细胞裂解物诱导组比较差异有统计学意义(P<0.05)。100μg/ml剂量诱导效应强于50μg/ml组。结论热休克培养可以通过促进效应细胞肿瘤相关蛋白因子释放,增强对结直肠癌细胞的杀伤活性,有剂量依赖性,为开拓高效无细胞疫苗来源提供了实验基础。

缺氧诱导的结直肠癌外泌体通过激活PTEN/PI3Kγ信号通路介导巨噬细胞极化

目的:探究缺氧条件下,结直肠癌细胞外泌体对巨噬细胞极化的影响及机制。方法:差速离心法提取正常条件下和缺氧条件下结直肠癌细胞HT-29所分泌的外泌体(HT-29 N-exo和HT-29 H-exo),透射电镜和Western blot鉴定外泌体,荧光显微镜下观察外泌体的摄取。将U937细胞与100 ng/mL的PMA共孵育的同时分别与1μg/mL的HT-29 N-exo和HT-29 H-exo以及等体积的PBS共孵育,记为PBS组、HT-29 N-exo组、HT-29 H-exo组。qRT-PCR检测各组细胞CD163、IL-10、IL-1Rα、TGF-β1、CCL2、TNF-αmRNA的表达,Elisa检测各组细胞IL-10和TNF-α分泌,流式细胞术鉴定各组细胞CD163和CD11b表达,Western blot检测各组细胞PTEN/PI3Kγ信号通路激活情况。结果:差速离心法所提取的外泌体符合其结构和生物学特征,并且可被U937细胞摄取;相比于HT-29 N-exo组,HT-29 H-exo组细胞CD163、IL-10、IL-1Rα、TGF-β1、CCL2表达显著增加(P<0.05),IL-10分泌显著增加,TNF-α表达以及分泌显著减少(P<0.01),CD163+CD11b+巨噬细胞数显著增加(P<0.001),PTEN/PI3Kγ信号通路显著激活(P<0.001)。结论:缺氧条件下结直肠癌细胞外泌体能够显著促进巨噬细胞M2型极化,其机制为激活PTEN/PI3Kγ信号通路。

海南五指山裸花紫珠通过IL-6/STAT3信号通路对结肠癌体外耐药的逆转作用及其机制研究

目的:探讨海南五指山裸花紫珠对结肠癌体外耐药的逆转作用及其机制。方法:以HCT-8细胞和HCT-8/5-Fu耐药株细胞作为考查对象,分别分为空白对照组、海南五指山裸花紫珠组、5-Fu组和联合组。采用CCK8实验检测细胞增殖;流式细胞术检测细胞凋亡;荧光定量PCR法检测细胞耐药基因;Western blot检测IL-6/STAT3信号通路相关蛋白表达。结果:海南五指山裸花紫珠和5-Fu可显著抑制HCT-8细胞和HCT-8/5-Fu细胞增殖,其作用呈浓度依赖性。海南五指山裸花紫珠25 mg/mL+5-Fu对HCT-8/5-Fu细胞耐药逆转倍数为1.88倍,海南五指山裸花紫珠50 mg/mL+5-Fu对其耐药逆转倍数为3.92倍。各给药组HCT-8细胞和HCT-8/5-Fu细胞凋亡率较空白对照组均显著升高(P<0.05)。与空白对照组比较,各给药组HCT-8细胞Bcl-2、HSP-27 mRNA表达均显著降低(P<0.05),海南五指山裸花紫珠组、联合组HCT-8/5-Fu细胞Bcl-2、HSP-27 mRNA表达均显著降低(P<0.05)。除5-Fu组HCT-8/5-Fu细胞外,各给药组IL-6、STAT3蛋白表达较空白对照组均显著升高(P<0.05)。结论:海南五指山裸花紫珠可通过激活IL-6/STAT3信号通路实现对结肠癌细胞体外耐药的逆转作用。

结直肠癌患者血清外泌体整合素的表达及其临床意义

目的探讨不同分期结直肠癌患者血清外泌体中整合素α_(5)、β_(5)、β_(6)的表达水平及其临床意义。方法收集2016年1月-2020年10月就诊于湖南省中医药研究院附属医院和湖南省肿瘤医院的50例结直肠癌患者的血清标本,按照TNM分期分为结直肠癌Ⅰ期组(n=5)、Ⅱ期组(n=19)、Ⅲ期组(n=14)与Ⅳ期组(仅肝转移,n=12)。另收集2018年8月-2020年5月于湖南省中医药研究院附属医院健康管理中心体检的10名健康者的血清标本作为健康对照组。对血清标本进行外泌体提纯,运用纳米微粒追踪分析(NTA)及Western blotting鉴定外泌体;采用Western blotting检测血清外泌体中整合素α_(5)、β_(5)、β_(6)的表达水平。随访追踪50例结直肠癌患者的生存期,采用Kaplan-Meier法绘制生存曲线,采用Cox比例风险回归模型进行生存分析。结果50例结直肠癌患者中,男26例(52.0%),女24例(48.0%),以中老年群体为主,平均年龄58岁;TNM分期Ⅰ期5例(10.0%),Ⅱ期19例(38.0%),Ⅲ期14例(28.0%),Ⅳ期(仅肝转移)12例(24.0%)。随访截至2021年2月,随访时间5~60个月,中位随访时间44个月,无病例脱落或失访。NTA分析结果显示,各组血清外泌体的粒径分布集中在50~150 nm。Western blotting检测结果显示,各组血清外泌体中ALIX、HSP70等标志性蛋白均有表达,证实提取物为外泌体;各组血清外泌体中整合素α_(5)、β_(5)、β_(6)均有不同程度表达,其中整合素α_(5)、β_(5)的表达水平随着TNM分期增加而升高,肝转移Ⅳ期患者α_(5)、β_(5)表达水平明显高于非Ⅳ期患者(P<0.05),而整合素β_(6)表达与TNM分期无明显关系(P>0.05)。Kaplan-Meier生存曲线分析显示,整合素α_(5)、β_(5)及TNM分期与结直肠癌患者的生存期有关(P<0.05);Cox比例风险回归模型分析结果显示,整合素α_(5)及病理分化程度是结直肠癌患者生存期的独立影响因素(P<0.05)。结论外泌体整合素α_(5)、β_(5)与结肠癌肝转移及TNM分期有关,外泌体整合素α_(5)及病理分化程度与结肠癌预后有关,外泌体整合素α_(5)、β_(5)可能成为潜在的血清标志物。

外泌体相关作用因子在结直肠癌诊治中的研究进展

结直肠癌是最常见的消化系统恶性肿瘤之一,且近年来呈现上升和年轻态趋势。针对结直肠癌的治疗,除传统的手术、放疗、化疗等手段外,免疫治疗和靶向治疗已成为当前临床的研究热点,其中肿瘤源性外泌体在结直肠癌诊治过程中的优势逐渐凸显,参与了肿瘤的发生发展、侵袭和转移过程,可作为结直肠癌的诊断标志物、细胞间信息媒介和药物载体,在结直肠癌的免疫治疗和靶向治疗中发挥重要作用。但外泌体(exosome,Exo)在临床应用中还面临着诸多挑战和问题。本文将对Exo在结直肠癌诊治过程中相关因子的作用,包括作为生物标志物、载体功能、介导耐药、免疫调节、促血管生成等功能进行系统性综述,使其更好应用于结直肠癌的早期诊断、治疗和预后监测等,也为其他肿瘤的诊治提供借鉴。