脐血造血细胞体外扩增及其粘附特性变化

目的探讨脐血造血细胞体外扩增过程中的粘附特性变化 ,为扩增最佳时机的选择提供实验依据。方法用长期培养法体外扩增脐血造血细胞 ,并用流式细胞仪测定其表面粘附分子变化。结果CD11b表达于第 10天显著增加 ,第 30天达 34.3 % ;CD44表达于第 2 0天达最高水平 ;CD5 4表达则于第 5天明显增加 ,第 30天达14.9% ;CD34+造血细胞在第 15天达高峰 ,之后渐下降 ,并维持在一定水平。CD44及CD5 4表达与CD34+造血细胞变化存在相关性。结论脐血造血细胞体外扩增过程中 ,CD44和CD5 4的持续高表达有利于造血细胞移植后的归巢 ;移植的最佳时机以长期培养第 14天为宜。

肺癌患者外周血树突状细胞的体外扩增及生物学特性的观察

目的 从肺癌患者外周血诱导扩增的树突状细胞 ,观察其形态、表型、抗原递呈功能和对LAK细胞抗肿瘤作用的影响。方法 肺癌患者外周血单个核细胞经GM -CSF、IL - 4诱导扩增成为树突状细胞 ,FACS检测其表型 ,MLR测定其抗原递呈能力及对LAK细胞增殖的影响。TAA冲击的DC与LAK细胞混合培养诱导的CTL ,用MTT法测定其细胞毒。结果 肺癌患乾外周血诱导的树突状细胞具有典型的形态、表型特征和激发MLR的能力 ,TAA冲击的DC能显著地提高LAK细胞的增殖能力和增强对靶抗原细胞的细胞毒效应。结论 从肺癌患者外周血中可获得典型的树突状细胞 ,经TAA冲击的DC能从LAK细胞中诱导出特异性CTL细胞 ,以该DC为基础的疫苗联合LAK细胞 。

脐血干/祖细胞短期体外扩增后归巢相关粘附特性的研究

目的 探讨体外扩增对脐血 (UCB)造血干 祖细胞 (HSPC)原有粘附功能的影响。方法 将从新鲜UCB标本中纯化的CD34+ 细胞接种于无血清、无基质的悬浮扩增体系 ,分别于培养第 7天、第10天和第 14天从扩增产物中再次纯化CD34+ 细胞 ,比较扩增前后CD34+ 细胞表面VLA 4 (CD4 9d)、VLA 5(CD4 9e)、LFA 1(CD1 1a)、L selectin (CD6 2L)、PECAM 1(CD31 )、ICAM 1(CD54)和HCAM(CD4 4)等归巢相关粘附分子 (CAMs)的表达情况 ,并检测CD34+ 细胞与纤连蛋白 (FN)间的自发粘附率和基质细胞来源因子 1(SDF 1)诱导粘附率。结果 ①在第 14天的培养扩增中 ,表达上述CAMs的各CD34+ 细胞亚群均有不同程度 (15～ 72倍 )的扩增 ;②扩增后CD34+ 细胞表面粘附分子CD4 4、CD1 1a、CD4 9e和CD4 9d的表达与原代CD34+ 细胞持平或高于培养开始时水平 ,而CD6 2L、CD54和CD31 的表达则有不同程度下调 ;③在前 10d的扩增中 ,CD34+ 细胞与FN间的自发粘附率和SDF 1诱导粘附率均呈上升趋势。结论 所建立的短期培养体系不仅可以支持表达重要CAMs的UCBCD34+ 细胞亚群的有效扩增 ,而且扩增后的HSPC总体上保持原有的粘附功能。

影响造血干细胞归巢机制的研究

造血干细胞移植(HSCT)已成为血液学基础研究和临床研究中一个活跃领域,是目前治疗一些难治性血液病及急重度放射病的有效措施。造血干细胞(HSC)植入率是影响HSCT成功的关键之一,干细胞归巢的能力反映其植入效率,归巢受HSC性能和受体造血微环境影响,其中主要涉及细胞粘附分子(CAMs)表达、细胞周期状态、基质细胞与细胞因子作用和龛位腾空等。本文就这方面的研究进展进行综述。