转基因植物核酸检测策略与体外扩增技术研究进展

转基因生物(Genetically modified organisms,GMOs)特别是转基因作物的商品化应用在世界范围内迅猛发展,在推动农业、医药和工业等领域的飞速发展的同时也逐步吸引越来越多公众注意力,生物安全问题成为突出的争论话题。转基因作物及其产品的快速准确检测成为社会发展的急切需求,转基因技术的多样化也要求检测策略和检测技术的不断改进。系统综述针对各种作物转基因技术和转基因产品的检测策略和技术,全面比较各种技术的特点和适用范围,并对目前面临的问题和发展趋势进行分析。

体外扩增技术检测结核分枝杆菌的新进展

与传统结核分枝杆菌检测方法相比,体外扩增技术具有灵敏度高、特异性高、操作简便等优点,广泛应用于结核分枝杆菌的临床检验。本文介绍了最近得到应用的几种检测结核分枝杆菌的体外扩增技术,并对其进行了评价。

DNA体外扩增技术在法庭科学性别鉴定中的应用研究(Ⅰ)

在刑事犯罪案件中，如杀人、强奸等案件，出于罪犯在实施犯罪时的暴力行为．以及受害人的反抗行为，常常使罪犯或受害人一方或双方的身上留有对方的血液甚至组织块，这是认定犯罪的极为重要的有时甚至是唯一的证据。在对类案件进行检验时．常常遇到受害人和罪犯血型，酶型及其他生物表型相同但性别不同的情况。

造血干细胞体外扩增的研究进展

造血干细胞数量限制了其临床应用。随着各种造血调控因子的问世、细胞分选技术的进步及体外扩增技术的不断改进和完善,有望通过体外扩增技术来解决成人HSC移植的数量问题。造血干细胞体外扩增主要因素包括细胞因子调控造血,滋养层细胞支持造血,三维空间立体培养优化造血等影响因素。

体外核酸扩增技术检测沙眼衣原体和淋球菌采用不同标本的比较分析

目的探讨体外核酸扩增技术(NAATs)检测不同标本沙眼衣原体(CT)和淋球菌(NG)的价值。方法选取2019年1月至2020年6月于本院就诊的3926例疑似STD女性患者为研究对象,无菌操作采集尿液和宫颈拭子标本,采用NAATs法测定CT、NG。比较尿液和宫颈拭子标本中CT感染率、CT感染率一致性,并分析CT感染年龄分布情况。结果尿液和宫颈拭子标本中CT、NG感染率比较差异无统计学意义;Kappa检验显示,尿液和宫颈拭子标本中CT、NG感染的一致性良好(Kappa值=0.814、0.856,P=0.000、0.000);CT感染多发生于31~40岁人群,其次为41~50岁人群;NG感染多发生于>50岁人群,其次为41~50岁人群。结论NAATs能检出不同标本中CT、NG感染情况,并及时发现合并感染,为临床诊治提供参考,进而改善患者预后。

NASBA技术及其在检验检疫中的应用

序列特异性核酸体外扩增技术(nucleic acid specific-based amplification,NASBA)是在PCR基础上发展起来的一种扩增RNA的新技术,作为一种新型研究手段,具有便捷、准确性好、灵敏度高、周期短的特点,尤其适用于RNA的分析研究。核酸分析技术是出入境检验检疫工作的重要手段,可用于食品病原微生物、动植物产品中的有害生物、病原的分析及鉴定。本文简要介绍了NASBA技术的基本原理,在论证对比NASBA技术与普通PCR方法、荧光PCR方法及其他恒温扩增等核酸分析技术的差异及相似性后,根据其使用特点进一步对NASBA在进出境检验检疫的食品安全检测及动植物检疫的应用予以综述及展望。

PCR技术在血液病诊断中的应用

多聚酶链反应(Polymerase Chain Reaction,PCR)技术是一种快速、敏感的DNA体外扩增技术。能在几小时内将单个分子的核酸扩增几百万倍,对于遗传性疾病的分子诊断和分子病理学研究是一项重大的革命。这种方法所需的组织样本只需少量的RNA或DNA,甚至在单根头发丝,漱口液或一滴干血中进行分析。应用PCR技术可将基因组DNA进行扩增,亦适应于RNA的扩增,还可进行细胞内特异的核酸片段的扩增(原位PCR)。PCR技术在临床诊断中的应用已经深入到各个学科和领域。

后基因组时代病原微生物诊断新技术

微生物基因组研究和进展深深促进临床微生物实验室诊断新技术的发展。包括核酸杂交、核酸体外扩增和基因芯片等临床诊断新技术给临床实验室感染诊断带来一片光明。

PCR增强剂在核酸体外扩增检测技术的研究进展

聚合酶链式反应(PolymeraseChainReaction,PCR)是一种通过体外酶促合成DNA片段,后通过对DNA片段进行鉴别的技术,是一种核酸体外扩增检测技术,该技术自上世纪80年代应用以来,在临床上得到广泛应用。采用PCR?技术进行疾病检测中,PCR增强剂起到了至关重要的作用。本文将综述近年来PCR增强剂在核酸体外扩增检测技术的研究进展,以为聚合酶链式反应技术在临床中的应用提供数据及技术支持。

接种乙肝疫苗后不出现抗体怎么办?

接种乙肝疫苗是预防乙肝最好的措施,目前我国生产的基因工程乙肝疫苗的免疫效果非常显著。接种后免疫获得成功的标志是乙肝表面抗体(抗HBs)成为阳性,成年人接种疫苗后,保护性的表面抗体阳转率95％左右,学龄前儿童为96.6％,新生儿为96.2％。但仍会有5％左右的人接种后表面抗体不转阳,也就是说没有起到预防作用,对于这部分人怎么办?根据目前已经掌握的资料,可以采取以下措施:

多聚酶链式反应在法医学中的应用

多聚酶链式反应(Polymerasa Chain reaction，PCR)是分子生物学中新近发展起来的一种先进的DNA片段体外扩增技术，只需有合适的试剂和普通的实验室设备，可以在几小时之内，将特定的DNA片段扩增几百万倍，使极微量的DNA扩增到检测分析所需要的量。该法操作简便，易于普及。所以自Mullis创建此法以来，很快得到重视和发展。多聚酶链式反应在法医工作中对检测分析微量检材内的DNA颇为有利，故综合介绍如下。

干细胞分化与调控研究新进展

干细胞（stem cells）是一类具有自我更新、高度增殖和多向分化潜能的细胞．理论上具有无限分裂能力。在特定条件下，可分化成特定组织。实验室干细胞定向分化研究一直是医学与生物工程的活跃领域之一．近年来随着各种细胞标志物、调控因子的被发现和应用．细胞分化筛选及体外扩增技术的不断改进与完善．以及精密设备和仪器的使用，有关干细胞体外分化与调控得到了广泛的研究。本文就近年来干细胞分化调控研究的相关进展作一综述。

单引物耐热链替代扩增HBV X区方法的初步探讨

目的 :以HBVX区为模型 ,对单引物耐热链替代扩增 (SDA)反应的影响因素进行初步探讨。SDA是一种等温的体外核酸扩增技术 ,其主要依据限制性内切酶识别并切割半硫酸磷酸化DNA未修饰链 (即打缺口 )以及 5′→ 3′外切酶缺陷的DNA聚合酶在切口处聚合延伸并替代下游链的特性 ,这种“打缺口—聚合 替代”不断循环往复 ,达到靶序列的扩增。方法 :以HBV为模型 ,设计一条典型的SDA引物 (含 5′悬端、BsoBⅠ酶切位点及 3′端靶序列互补区 ) ,采用耐热BsoBⅠ BstDNA聚合酶 5 3℃恒温反应体系 ,微孔板杂交检测最终产物。结果与结论 :对SDA反应的重要的影响因素进行了初步探讨 。

PCR研究进展

PCR(Pymerase Chsin Reaction)为多聚酶链反应，又称体外扩增技术。此技术是美国PE公司人类遗传部的Kary B，Mullis于1984年发明的。Saiki等人于1985年首先在《Scirnce》杂志上完整地描述了该反应，1987年美国专利局授与PCR技术专利。

性病患者必须作PCR检查吗

在一些报纸、电视台等的医疗广告中经常可以见到用PCR技术作性病治疗前后的“科学”诊断。许多医疗机构为了追求经济效益,盲目开展PCR检测,甚至将PCR检测结果当作性病的诊断指标及判定疗效的依据。性病必须作PCR检查才能确诊吗?其实不然,以淋病为例,一般细菌培养的阳性率可达95％以上,3～4天即可报告培养及药敏结果。直接涂片查淋球菌则更快速简便,而且费用很低。似没有必要作淋病PCR检查。

医学分子生物学的尖兵

当今时代,分子生物学、基本粒子与宇宙科学已成为自然科学的三大支柱,而分子生物学在医学领域内更是崭露头角,争奇斗艳。在病因、发病机制、诊断、治疗及康复、预防各方面正在发挥重要作用。医学分子生物学其理论乃日新月异,其成果如雨后春笋。下述三例,便是其中的佼佼者。