目的构建重组腺病毒载体,观察自杀基因对不同大肠癌细胞系的细胞毒作用。方法利用重组腺病毒载体介导的胞嘧啶脱氨酶(CD)、单纯疱疹病毒胸苷激酶(HSV-tk)融合基因感染人结肠腺癌细胞系LoVo、HCT-8和直肠腺癌细胞系HR-8348,通过细胞集落...目的构建重组腺病毒载体,观察自杀基因对不同大肠癌细胞系的细胞毒作用。方法利用重组腺病毒载体介导的胞嘧啶脱氨酶(CD)、单纯疱疹病毒胸苷激酶(HSV-tk)融合基因感染人结肠腺癌细胞系LoVo、HCT-8和直肠腺癌细胞系HR-8348,通过细胞集落形成实验、细胞存活率测定(MTT法),检测和分析HSV-tk/丙氧鸟苷((GCV)、CD/5-氟胞嘧啶(5-FC)双自杀基因系统对肿瘤细胞的杀伤作用和旁观者效应的大小。结果 Western Blot检测分析融合基因的表达,显示重组腺病毒介导的双自杀基因可以在3种肿瘤细胞中表达。不加5-FC和GCV时,各转染组和对照组肿瘤细胞集落形成分别为:94、93、95;96、92、94,比较差异无显著性(P>0.05)。在5-FC(80.0mg/L)和GCV(0.8 mg/L)浓度下3种肿瘤细胞存活率降至2.1％、4.3％和3.2％,与不用前药相比差异有显著性(P<0.01)。感染细胞在混合细胞中比例仅仅占5％时,就能获得明显的旁观者效应,细胞杀伤率分别升至22.2％、34.8％和40.4％。结论CD、TK融合基因联合联合双前药治疗能取得显著的抗肿瘤作用。展开更多
文摘目的构建重组腺病毒载体,观察自杀基因对不同大肠癌细胞系的细胞毒作用。方法利用重组腺病毒载体介导的胞嘧啶脱氨酶(CD)、单纯疱疹病毒胸苷激酶(HSV-tk)融合基因感染人结肠腺癌细胞系LoVo、HCT-8和直肠腺癌细胞系HR-8348,通过细胞集落形成实验、细胞存活率测定(MTT法),检测和分析HSV-tk/丙氧鸟苷((GCV)、CD/5-氟胞嘧啶(5-FC)双自杀基因系统对肿瘤细胞的杀伤作用和旁观者效应的大小。结果 Western Blot检测分析融合基因的表达,显示重组腺病毒介导的双自杀基因可以在3种肿瘤细胞中表达。不加5-FC和GCV时,各转染组和对照组肿瘤细胞集落形成分别为:94、93、95;96、92、94,比较差异无显著性(P>0.05)。在5-FC(80.0mg/L)和GCV(0.8 mg/L)浓度下3种肿瘤细胞存活率降至2.1％、4.3％和3.2％,与不用前药相比差异有显著性(P<0.01)。感染细胞在混合细胞中比例仅仅占5％时,就能获得明显的旁观者效应,细胞杀伤率分别升至22.2％、34.8％和40.4％。结论CD、TK融合基因联合联合双前药治疗能取得显著的抗肿瘤作用。
