几种中药体外抗猪流行性腹泻病毒活性的研究

为探究蒲公英、板蓝根、泽泻、葛根、黄芩5种中药水提物体外抑制猪流行性腹泻病毒(PEDV)感染的效果,本研究先将不同浓度中药液分别2倍倍比稀释后加入非洲绿猴肾细胞(Vero细胞)中,观察各药物对细胞生长状态的影响来确定各药物的最大安全浓度。结果显示,蒲公英、板蓝根、泽泻、葛根、黄芩的最大安全浓度分别为3.91 mg/m L、1.95 mg/m L、1.95 mg/m L、0.98 mg/m L、0.98 mg/m L。以药物最大安全浓度为初始浓度,2倍倍比稀释各药物,共6个浓度,采用先加药物后加病毒(阻断作用),先加病毒后加药物(抑制作用)、药物和病毒同时加入(杀灭作用)3种不同加药的方式,加入已铺满单层Vero细胞的96孔细胞培养板中,72 h后加入CCK-8溶液1 h后测定各孔的OD_(450nm)值,评估阻断作用、抑制作用、杀灭作用下各药物对PEDV抑制率最高的浓度。结果显示,5种药物在阻断作用、抑制作用、杀灭作用下对PEDV抑制率最高的浓度分别为3.91 mg/m L、1.95 mg/m L、1.95 mg/m L、0.98 mg/m L以及0.98 mg/m L。以上述对PEDV抑制率最高的药物浓度为试验浓度,重复上述3种加药方式,72 h后加入CCK-8溶液1 h后测定各孔的OD_(450nm)值,计算3种作用方式下各药物对PEDV的抑制率,筛选出对PEDV抑制率最高的药物。结果显示,各中药均可在体外抑制PEDV的感染,阻断作用下黄芩对PEDV的抑制率最高达138.10%,抑制作用下蒲公英对PEDV的抑制率最高达149.90%,杀灭作用下葛根对PEDV的抑制率最高达102.90%,且蒲公英和黄芩在3种作用方式下对PEDV的抑制率均高于80%。以上结果表明蒲公英和黄芩体外抗PEDV感染的效果最好,本研究首次证实5种中药对体外抗PEDV感染的效果,为中药治疗PED提供了参考依据。

百里香酚体外抗伪狂犬病毒活性评价及其作用方式

采用细胞体外培养技术,以BHK-21细胞为研究模型,探讨不同质量浓度的百里香酚在体外抗伪狂犬病毒(PRV)的活性及其作用方式。使用CCK-8法检测百里香酚对BHK-21细胞的最大无害浓度(MNTC),计算得出其半数抑制浓度(IC50)为(212.789±1.652)μg·mL^(-1),对PRV的半数有效浓度(EC50)为(30.710±0.303)μg·mL^(-1),对PRV的治疗指数(TI)为6.929,说明百里香酚属于高效低毒类抗PRV药物。使用CPE观察法检测百里香酚对PRV病毒滴度和病毒一步生长曲线的影响,结果显示,百里香酚能够剂量依赖性显著降低PRV的病毒滴度,并降低PRV在BHK-21中增殖后的毒力。采用荧光定量PCR方法检测不同处理下PRV感染的BHK-21细胞的PRV-gE基因的拷贝量,研究百里香酚体外抗PRV的作用方式,结果显示,百里香酚主要是通过抑制PRV在BHK-21细胞中的增殖来发挥抗病毒活性的,同时能够直接杀灭部分PRV病毒粒子。

太芪培元颗粒体外抗HIV-1病毒活性研究

目的 评价太芪培元颗粒体外对HIV-1 病毒的抑制活性.方法 MTT 法检测太芪培元颗粒细胞毒性;通过细胞病变法检测太芪培元颗粒对HIV-1 急性感染的抑制活性;应用HIV-1 p24 抗原ELISA 检测太芪培元颗粒对HIV-1 急性感染细胞中病毒复制的抑制活性,并计算药物治疗指数.结果 太芪培元颗粒细胞毒性实验CC50 为（3.761±0.370）mg/mL;合胞体抑制实验EC50 为（0.454 5±0.204 6）mg/mL,治疗指数为5.84～12.97;p24 抑制实验EC50 为（0.56±0.27）mg/mL,治疗指数为5.30～8.74.结论 太芪培元颗粒体外抗HIV-1活性较弱.

知母宁体外抗单纯疱疹病毒Ⅰ型体外活性研究

目的 :对知母宁体外抗单纯疱疹病毒Ⅰ型的活性进行研究。方法 :采用MTT比色法测定知母宁对Vero细胞的毒性作用。采用中性红染色法 ,以阿昔洛韦为阳性对照药物 ,考察不同给药方式与不同药物处理时间下知母宁体外抗单纯疱疹病毒Ⅰ型 (HSV ⅠSm4 4 )的活性。结果 :MTT法测得Vero细胞对知母宁的最大耐受浓度与半数中毒浓度 (TC50 )分别为0 .2 9与 3.6 6mg·ml-1。不同加药方式下 ,知母宁与阿昔洛韦均对HSV ⅠSm4 4表现出综合抑制作用并能抑制病毒吸附后的复制增殖过程 ,这些作用总体上随药物浓度升高而增强 ,其中知母宁抗病毒有效率 (ER % )最高达 76 .4 2 %。知母宁预防HSV Ⅰ病毒吸附的作用较弱 ,但其在高浓度 (2 .0 8mg·ml-1以上 )对HSV Ⅰ具强的直接杀伤作用 ,最高ER %值为 98.86 %。随药物处理时间延长 ,低浓度知母宁抗HSV Ⅰ的ER %值递减 ,2 .0 8mg·ml-1以上知母宁的ER %值变化小。在不同药物处理时间下 ,知母宁及阿昔洛韦组病毒的感染性均较平行设置的病毒对照组减弱 ,且知母宁组的感染力较阳性药物组更弱。知母宁组病毒感染力下降值△lgTCID50 随处理时间增加而增加。结论

喷昔洛韦体外抗疱疹病毒活性的研究

为评价新合成的喷昔洛韦的细胞毒性和抗疱疹病毒活性 ,通过观察病毒感染细胞的CPE、病毒滴度、抗病毒指数 ,从而判定喷昔洛韦的抗疱疹病毒作用。结果发现喷昔洛韦对HEL细胞、Hep 2细胞的半数中毒浓度 (TD50 )分别为 10 5 .2 μg/mL和 85 .1μg/mL ;对HSV 1、HSV 2、VZV、HSV 1吴株的平均半数抑制浓度 (IC50 )分别为2 1.78μg/mL、2 0 .15 μg/mL、2 3.19μg/mL和 17.87μg/mL ,对各毒株的治疗指数分别为 5 .84、6 .31、5 .49和 7.11。

乔木蒿精油的脂质体及其体外抗病毒活性

作者研究了乔木蒿Artemisia arborescens L．精油脂质体体外抗Ⅰ型单纯疱疹病毒（HSV-1）的活性，并研究了氢化大豆卵磷脂（P90H）、非氢化（P90）大豆卵磷脂和非离子表面活性剂聚氧乙烯十二烷基醚脂质体（Brij30）对抗病毒活性的影响。3种制剂都制备了多层脂质体（MLV）和单层脂质体（SUV）两种结构，并均含胆固醇和硬脂酰胺，以改善脂质体与细胞的相互作用。

猴耳环抗病毒有效成分研究

目的：对抗炎中药猴耳环的化学成分进行研究。方法：采用体外抗病毒活性追踪的方法，应用大孔吸附树脂吸附，聚酰胺、硅胶和凝胶柱色谱技术进行分离，根据理化性质和波谱数据鉴定其结构。结果：分离并鉴定了6个化合物：tricetiflavan（5，7，3′，4′，5′-pentahydroxylflavan）（1），myricitrin（myricetin-3-O-α-L-rhamnopyranoside）（2），quercitrin（quercetin-3-O-α-L-rhamnopyranoside）（3），quercetin（4），methyl gallate（5）和gallic acid（6）。结论：化合物1-5为首次从陔植物中分离得到，其中化合物4被发现有较好的体外抗呼吸道合胞病毒（RSV）活性。

4种浒苔多糖的体外抗禽流感病毒活性研究

为了检测不同提取方法获得的浒苔提取物浒苔多糖1、浒苔多糖2、浒苔多糖3和浒苔多糖硒的体外抗禽流感病毒活性,试验将4种浒苔多糖用细胞维持液倍比稀释,以金刚烷胺、病毒灵、黄芪多糖和紫锥菊提取物为对照,以犬肾细胞(MDCK)为细胞模型,观察细胞病变效应(CPE),并采用MTT法研究4种浒苔多糖对H9N2禽流感病毒的直接杀灭、抑制病毒复制和阻断病毒吸附的治疗指数。结果表明:浒苔多糖1和浒苔多糖2直接杀灭H9N2禽流感病毒作用治疗指数分别为7.33和7.29,该指数低于金刚烷胺(33.56)、病毒灵(36.00)和黄芪多糖(15.78),高于紫锥菊提取物(6.92);浒苔多糖1和浒苔多糖2抑制H9N2禽流感病毒复制作用的治疗指数分别为5.78和6.13,该指数低于金刚烷胺(22.68)、病毒灵(26.71)和黄芪多糖(10.18),高于紫锥菊提取物(5.41);浒苔多糖1和浒苔多糖2阻断H9N2禽流感病毒吸附作用的治疗指数分别为13.83和12.75,该指数低于金刚烷胺(46.61)、病毒灵(55.20)和黄芪多糖(16.25),高于紫锥菊提取物(11.22);浒苔多糖3和浒苔多糖硒不具有直接杀灭病毒、抑制病毒复制和阻断病毒吸附的作用。说明浒苔多糖1和浒苔多糖2具有体外抗禽流感病毒活性,表现为对H9N2禽流感病毒具有直接杀灭、抑制病毒复制和阻断吸附的作用,浒苔多糖3和浒苔多糖硒无体外抗禽流感病毒活性。

不同Alloferon-1体外抗病毒效果

Alloferon-1是Chernysh等于2002报道的一种由13个氨基酸组成、相对分子质量为1481．53的新型抗菌肽，动物实验证实该抗菌肽有较强的抗流感病毒和抗白血病细胞的活性。人工合成或重组表达的抗菌肽Magainin—Ⅱ的生物学活性与天然产物相同。本研究中构建了串联式表达Alloferon-1的原核重组表达系统得到rAlloferon-1-EK，同时人工合成了sAlloferon-1和sAlloferon-1-EK，比较重组及人工合成的3种Alloferon-1体外抗病毒活性，以期为抗病毒新药研发提供实验依据。

天然裂蹄木层孔菌提取物的抗病毒活性

方法：使用天然裂蹄木层孔菌子实体热水提取物，探讨其对10种病毒增殖的抑制作用。①体外抗病毒活性：以受试物的细胞毒性（CC50）与增殖抑制活性（IC50）之比（CC50／IC50）来评价。②体内抗病毒活性：在小鼠眼部接种单纯疱疹病毒（HSV-1）后，经口给予受试物，根据感染小鼠的死亡率、体重变化、症状进展及血清中和抗体量来评价。