采用体外染色体畸变试验检测锐钛型纳米二氧化钛的遗传毒性

目的:按《OECD化学品测试准则473:体外哺乳动物染色体畸变测试》的要求进行试验,检测锐钛型纳米二氧化钛诱发体外培养的哺乳动物细胞染色体畸变的能力,以评价其是否属于致突变物。方法:试验组受试物终浓度分别设置为0.0078、0.0312、0.125、0.5和2 mg/mL,同时设立溶剂对照组和阳性对照组。试验分为有代谢活化系统短时处理组(+S9,4 h)、无代谢活化系统短时处理组(-S9,4 h)和无代谢活化系统连续处理组(-S9,24 h)3种处理方式,将培养的中国仓鼠肺细胞(CHL)暴露于锐钛型纳米二氧化钛混悬液中,染毒相应时间后收获细胞,经低渗固定后,制片并染色。每个浓度组选取300个分散良好的中期分裂相细胞进行染色体畸变分析。结果:锐钛型纳米二氧化钛在0.0078、0.0312、0.125、0.5和2 mg/mL浓度下,无代谢活化系统短时处理组不含裂隙的染色体畸变率分别为1.67%、1.33%、2.00%、1.00%和2.33%,有代谢活化系统短时处理组不含裂隙的染色体畸变率分别为1.33%、1.33%、2.00%、1.67%和2.00%,无代谢活化系统连续处理组不含裂隙的染色体畸变率分别为1.33%、1.67%、2.00%、1.67%和2.33%,与溶剂对照组相比,差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:在本实验条件下,锐钛型纳米二氧化钛在0.0078~2 mg/mL浓度范围内,对CHL细胞染色体无致畸作用。

基于体外染色体畸变试验评价纳米银敷料遗传毒性的研究

目的:通过体外染色体畸变试验来检测纳米银敷料引起遗传毒性的可能性,为临床前安全性评价提供资料与提示。方法:根据《GB/T16886.3-2008/ISO 1099-3:2014》中推荐的方法选用中国仓鼠肺细胞(CHL)进行体外哺乳动物细胞染色体畸变试验(CAT),在代谢活化系统(+S9)与非代谢活化系统(-S9)条件下,检测纳米银敷料浸提液在+S9/6h、-S9/6h、-S9/24h三种处理条件下诱发CHL细胞的染色体畸变率。结果:纳米银敷料各处理组的染色体畸变率与阴性对照组相比无显著性差异(P>0.05)。在与CHL接触24h后,细胞出现了明显形态改变。结论:在该试验条件下,纳米银敷料浸提液对CHL细胞的染色体无明显损伤作用,在24h接触组中出现了明显的细胞毒性。

一种宫内节育器的染色体畸变试验研究

目的检测一种宫内节育器的体外细胞的染色体畸变作为遗传毒性评价的一部分。方法在加和不加S9活化系统条件下,试验组用三种不同浓度的节育器浸提液处理CHL细胞20h,对照组分别加入阴性、阳性进行交换,各组置37℃培养箱中培养。24h后采集细胞并分析中期细胞染色体畸变情况,计算染色体畸变率。结果在4g/20mL的浓度下受试物对细胞有明显的细胞毒性,其稀释浸提液的畸变率与阴性对照相比,在统计学上无显著性差异(P>0.05)。结论在该试验条件下,受试物稀释浸提液未诱发CHL细胞染色体畸变。

荧光增白剂致中华仓鼠肺细胞染色体畸变研究

[目的]荧光增白剂是国家安全生产监督管理总局2011年颁布的《职业病危害因素分类表》中定性的化学毒物,本研究探讨荧光增白剂染毒对体外哺乳动物细胞的染色体的影响,为荧光增白剂遗传损伤机制的研究提供科学依据。[方法]使用不同浓度的荧光增白剂28处理中国仓鼠肺细胞,通过体外哺乳动物染色体畸变实验检测细胞的染色体畸变程度。[结果]在有代谢活化系统条件下,各剂量染毒组结构畸变细胞率与阴性对照组相比,差异无统计学意义。[结论]本研究未显示荧光增白剂28造成体外哺乳动物细胞染色体损伤。

血液灌流器体外细胞毒性和遗传毒性试验方法研究

目的:研究一种适合于评价血液灌流器的细胞毒性和遗传毒性试验的方法。方法:选择含血清培养基作为浸提介质,采用灌注的方式分别在37℃振荡浸提24h和48h制备浸提液,然后用新鲜含血清培养基进行稀释,得到100%(未稀释)、50%、25%和12.5%浓度的浸提液,采用MTT法对其进行细胞毒性试验,分别采用体外哺乳动物细胞染色体畸变试验和体外哺乳动物细胞基因突变试验检测样品浸提液的遗传毒性。结果:细胞毒性试验:(1)采用灌注方式制备浸提液可行;(2)浸提原液(100%浓度)因其营养成分被吸附,会造成细胞毒性假阳性结果;(3)浓度为25%和12.5%的浸提液因其稀释倍数过大,浸提液中的毒性成分被稀释,会出现细胞毒性假阴性结果;(4)浓度为50%的浸提液适合细胞毒性评价,其既补充了营养成分,又不至于过度稀释,并且此浓度下的生理盐水对照的细胞存活率>80%,阳性对照的细胞存活率<30%,符合试验体系的要求。遗传毒性试验:(1)体外哺乳动物细胞基因突变试验中各个梯度相对存活率在60%~120%;(2)体外哺乳动物细胞染色体畸变试验中各个梯度染色体畸变率与阴性对照组相比在统计学上均无显著差异性。结论:该试验方法可用于灌流器的细胞毒性试验和遗传毒性试验。

五氯酚钠致突变性研究

目的研究五氯酚钠的致突变性,为五氯酚钠的毒性机制研究提供依据。方法应用Ames试验、小鼠淋巴瘤细胞试验和体外染色体畸变试验研究五氯酚钠的致突变性。结果五氯酚钠对鼠伤寒沙门菌TA97、TA98、TA100、TA1024株菌株无论直接作用或代谢活化后作用,均未呈现致突变性;随染毒浓度增大,L5178Y细胞tk位点的突变频率有升高的趋势,其中150μg/ml剂量组的突变率与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05);无论是否加入代谢活化剂,受试物均引起染色体畸变率的明显增加。结论五氯酚钠能诱发中国仓鼠卵巢(CHO)细胞染色体畸变,是非基因致突变物或弱基因致突变物。

叶下珠有效部位总提取物致突变实验研究

目的评价叶下珠有效部位总提取物的致突变性。方法采用微核实验、Ames实验和体外染色体畸变实验对叶下珠有效部位总提取物进行了诱变性检测。结果小鼠体内骨髓细胞微核实验未发现骨髓细胞微核率增加,Ames实验中对TA97,TA98,TA100,TA102 4种菌株加与不加S9均未发现回变菌落数增加,体外染色体畸变实验加与不加S9均未发现染色体畸变率超过5%。3个实验结果均为阴性。结论在该实验条件下,未检出叶下珠有效部位总提取物的诱变性。

注射用左旋泮托拉唑钠的遗传毒性研究

目的探讨注射用左旋泮托拉唑钠的遗传毒性。方法采用Ames试验、CHL细胞体外染色体畸变试验和体内微核试验3项试验组合,检测注射用左旋泮托拉唑钠的遗传毒性。结果Ames试验表明,注射用左旋泮托拉唑钠各剂量组回变菌落数与溶媒对照组比较,均无显著性升高;CHL细胞体外染色体畸变试验表明,各剂量组的染色体畸变率与溶媒对照组比较,差异无统计学意义;小鼠体内微核试验表明,各剂量组的微核率与溶媒对照组比较,差异无统计学意义;三项试验结果均为阴性。结论在本试验条件下,注射用左旋泮托拉唑钠未见遗传毒性作用。

花青素遗传毒性初步研究

目的对花青素遗传毒性进行初步研究。方法根据《食品安全性毒理学评价程序和方法》(GB15193—2003)进行小鼠精子畸形试验、骨髓细胞微核试验、Ames试验、按照卫生部《化妆品卫生规范》(2007年版)进行体外哺乳动物细胞染色体畸变试验,评价花青素的遗传性作用。结果小鼠精子畸形试验、骨髓细胞微核试验、Ames试验、体外哺乳动物细胞染色体畸变试验等体内外的遗传毒性试验结果均为阴性(P>0.05)。结论花秦素对正常状态的细胞没有遗传毒性作用。

牡蛎水提液的遗传毒性研究

目的采用细菌回复突变试验、体外染色体畸变试验和小鼠骨髓微核试验研究牡蛎水提液的遗传毒性。方法细菌回复突变试验中,牡蛎水提液设5000,2500,1250,625,312.5μg/皿5个剂量,计数在有无代谢活化系统时各剂量组回变菌落数;体外染色体畸变试验中,设5,2.5,1.25 mg/m L 3个剂量,染毒6,24 h,观察各组染色体畸变率;小鼠骨髓微核试验中,设2000,1000,500 mg/kg 3个剂量,每日给药1次,连续给药2天,观察各组微核发生率。结果牡蛎水提液各剂量组回复菌落数、染色体畸变率、微核率与阴性对照组比较,差异均无统计学意义(P>0.05),结果均为阴性。结论在本试验条件下,牡蛎水提液未见潜在的遗传毒性。

对1,1—二氯—1—氟代乙烷基因毒性和长期吸入毒性评估

用1,1一二氯—1—氟代乙烷(HCFC—141b)进行了一组体内、外实验。以大肠杆菌及沙门氏菌做细菌基因突变分析,两者均为阴性。体外染色体畸变分析,CHO细胞呈阳性反应,但人淋巴细胞是阴性。小鼠体内微粒吸入实验表明,HCFC—141b为阴性。基于上述数据及近期有关基因毒性的报道,认为HCFC—141b无基因毒性。

生物可吸收性涂层补片的细胞毒性和遗传毒性研究

生物可吸收性涂层补片在应用于临床前必须进行一系列生物学评价以保证其安全性,细胞毒性和遗传毒性研究是其体外筛选部分。细胞毒性研究以补片浸提液接触受试细胞,观察细胞的毒性反应。生物可吸收性涂层补片浸提液1.5 cm2/ml时,细胞毒性反应1级;生物可吸收性涂层补片浸提液3 cm2/ml时,细胞毒性反应2级。遗传毒性研究包括两个试验,细菌回复突变试验结果表明生物可吸收性涂层补片的浸提液对鼠伤寒沙门氏菌受试株无致突变性;体外哺乳动物细胞染色体畸变试验中,任一处理组的细胞生长率均与阴性对照处于同一水平,表明没有诱导哺乳动物体细胞产生染色体畸变。

新型钾离子竞争性酸阻滞剂柯诺拉赞的遗传毒性研究

1-[5-(2-氟-苯基)-1-((3-(3-甲氧基丙氧基)苯基)磺酰基)-1H-吡咯-3-基]-N-甲基甲胺盐酸盐(柯诺拉赞)是一种新型钾离子竞争性酸阻滞剂(Potassiumcompetitive acid blocker,P-CAB),属于可逆性质子泵抑制剂[1-2]。在胃壁细胞泌酸的最后步骤,通过抑制K^+与H^+-K^+-ATP酶的结合,终止胃酸的分泌,达到抑酸效果[3-4]。柯诺拉赞为沃诺拉赞的Me-better药物,研究结果表明该品种主要优势为在同一剂量下,柯诺拉赞在胃分布较多,抑酸率更高[5-7]。