胰岛素吸入粉雾剂的制备及其体外沉积性质

目的采用喷雾干燥法制备胰岛素吸入粉雾剂,并对其体外沉积性质做出评价。方法以产品收率,粉末的空气动力学径、休止角及水分含量为考察指标,采用正交设计Z综合评价法优化喷雾干燥制备方法中各工艺参数,同时采用双层液体碰撞器测定该工艺所制备的胰岛素吸入粉雾剂的有效部位沉积量,并通过扫描电镜观察产品的形态。结果优选出的工艺参数为:气流量为0.6 m3.min-1,进口温度为100℃,喷液速度为5.0 mL.min-1,泵压为130 kPa,溶液质量分数为0.75%。体外有效部位沉积质量高达60%。结论采用本法制备胰岛素肺部吸入粉雾剂重现性好,所得粉雾剂的有效部位沉积量高,提示大部分粒子能够到达肺部。

不同喷射雾化器对吸入混悬液体外沉积性质的影响

目的 分析并比较使用3种喷射雾化器测定布地奈德吸入混悬体外沉积的结果。方法 以自制布地奈德吸入混悬液为模型药物,使用百瑞Turob BOY N、BOY SX和欧姆龙NE-C28雾化器,通过呼吸模拟器和新一代药用撞击器（NGI）测定其体外沉积性质。结果 百瑞两型雾化器递送速率相近,欧姆龙的递送速率较低,递送总量均约在0.11μg;3种雾化器测得的质量平均空气动力学粒径（MMAD）为4.95~6.54μm,几何标准偏差（GSD）为1.66~2.10,微细粒子剂量（FPD）87.64~101.47μg,微细粒子有效沉积率（FPF）37.75%~53.88%。由统计学分析可知不同雾化器对递送总量不产生显著性差异,而对递送速率（P〈0.01）和空气动力学测定结果（P〈0.05）产生显著差异。结论 不同喷射式雾化器对布地奈德吸入混悬液体外沉积有一定影响,所选的3种雾化器中欧姆龙NE-C28适用性较好。

不同压缩式雾化器对痰热清吸入溶液体外沉积性能的影响

目的：优选出适合痰热清吸入溶液使用的空气压缩式雾化器,为这类设备的临床使用提供理论依据。方法：采用呼吸模拟器和新一代药用撞击器,以中药制剂痰热清吸入溶液为模型药物,通过测定其体外沉积性能评价6种压缩式雾化器。结果：Boy SX型蓝芯雾化器递送速率最快,达42.51μg·min-1;Boy SX型红芯雾化器的递送总量最高,达到252.20μg;6种雾化器呼出总量具有显著性差异（P〈0.05）,药杯中残留量最少的是Boy SX型红芯雾化器（仅59.78μg）。6种雾化器质量平均空气动力学粒径（MMAD）处于3.57-4.98μm,Boy SX型红芯雾化器的MMAD和几何标准差值最小,微细粒子有效沉积率最大。结论：Boy SX型红芯雾化器的粒径分布最窄,有效微细粒子沉积最多,最适合痰热清吸入溶液的临床使用。

干粉吸入装置对干粉吸入剂体外沉积性质的影响

目的:测定不同干粉吸入装置的阻力,分析不同干粉吸入装置对排空率和体外沉积率的影响。方法:应用剂量均一性测定装置(delivered dose uniformity device)测定4种干粉吸入装置的阻力,以自制扎那米韦干粉吸入剂为模型制剂,测定不同干粉吸入装置的排空率和体外沉积率。结果:不同干粉吸入装置阻力大小为Free-breath>Twister>Turbospin>AerolizerTM,Free-breath产生最高排空率和沉积率,Turbospin产生最低排空率和沉积率。结论:不同干粉吸入装置阻力不同,干粉吸入装置阻力大小影响干粉吸入剂排空率和沉积率,阻力越大,干粉雾化水平越高,即粉末分散更充分。但装置阻力过大时,患者吸入困难,适应性差。

返魂草干粉吸入剂的含量测定及体外肺沉积率考察

目的建立高效液相色谱法测定返魂草干粉吸入剂中返魂草素Ⅱ含量的方法,并对其体外沉积性质进行初步考察。方法采用Eclipse XDB-C18柱（4.6 mm×150 mm,5μm）,流动相为CH3OH-5 mmol/L NaH2PO4配制的6 mmol/L的四丁基溴化铵（2 mol/L的NaOH调pH7.0）（30∶70）,检测波长230 nm,流速1.0 ml/min。采用双层液体碰撞器测定返魂草干粉吸入剂的有效部位沉积量。结果返魂草素Ⅱ在5~150μg/ml（r=0.9994）范围内与峰面积呈良好的线性关系,平均回收率为97.2%,RSD为1.4%（n=5）,体外肺沉积率大于10%。结论本含量测定方法准确可靠、重复性好,该制剂的体外肺沉积率符合要求。

利巴韦林雾化吸入液的含量测定及体外肺沉积率考察

目的建立HPLC法测定利巴韦林雾化吸入液中利巴韦林含量的方法,并对其体外沉积率进行考察。方法采用SB-AQ C18色谱柱(250mm×4.6mm,5μm),流动相为水,流速:1.0ml·min^(-1),检测波长:207nm。采用新一代多级药用撞击器测定利巴韦林雾化吸入液的有效部位沉积率。结果在41.6~416μg·ml^(-1)范围内,峰面积对质量浓度有良好的线性关系,日内精密度和日间精密度均<2%(n=5);回收率在98%~102%;体外沉积率为68.51%。结论本含量测定方法准确可靠、重复性好,该制剂的体外肺沉积率符合要求。

地塞米松纳米结构脂质载体的制备及体外肺沉积率考察

目的制备地塞米松纳米结构脂质载体,并对其体外肺沉积率进行考察。方法采用高压微射流技术制备地塞米松纳米结构脂质载体,运用正交试验设计对地塞米松纳米结构脂质载体处方进行优化,并对其进行表征。运用透析袋法测定地塞米松纳米结构脂质载体的体外释放特性,并采用新一代药用撞击器评价其体外肺沉积率。结果优化后的地塞米松纳米结构脂质载体外观呈球形或类球形,且药物以无定形形式分散于新相地塞米松纳米结构脂质载体中,平均粒径为(205.95±14)nm,包封率为(64.79±8.32)%,载药量为(0.81±0.12)%。体外溶出试验表明,与原料药相比,地塞米松纳米结构脂质载体的累积释放量高且具有很好的缓释作用;体外肺沉积率试验结果显示,空气动力学质量中位径为(4.25±0.12)μm,可吸入的微细粒子分数为(51.22±1.8)%。结论地塞米松纳米结构脂质载体制剂的体外肺沉积率符合要求,用于肺部给药具有很好的可行性。

三维打印聚乳酸支架促进幼年小鼠体外骨样基质沉积的实验研究

目的 研究三维打印聚乳酸支架促进幼年小鼠体外骨样基质沉积的效果。方法 取小白鼠额、顶骨,经细胞分离培养小鼠成骨细胞,然后与三维打印聚乳酸支架、白磷钙石(WH)复合材料支架、纳米有机复合材料支架分别培养,分别计算各组12 h、24 h、36 h、48 h成骨细胞粘附率、增殖率、骨桥蛋白(OPN)基因表达水平、骨钙素分泌情况以及骨基质沉淀率。结果 三维打印聚乳酸支架细胞粘附率、成骨细胞增殖率、细胞骨基质沉淀率显著高于纳米有机复合支架和白磷钙石复合支架(均P <0. 05),且培养时间从12 h延长至48 h,三组以上指标也均显著增加(均P <0. 05);与白磷钙石复合支架组相比,各时间点三维打印聚乳酸支架组细胞OPN基因表达水平和骨钙素分泌量均显著增加(P<0. 05),但与纳米有机复合支架组相比,仅培养36 h时三维打印聚乳酸支架组细胞OPN基因表达水平显著增加(P <0. 05),仅培养48 h时三维打印聚乳酸支架组骨钙素分泌量显著增加(P <0. 05);随着时间延长,三组细胞OPN基因表达水平和骨钙素分泌量也均显著增加(P <0. 05)。结论 三维打印聚乳酸支架具有促进幼年小鼠体外骨样基质沉积的作用,其总体作用效果最显著培养时长为36~48 h,因此值得在临床骨缺损修复中推广使用。

大白鼠骨髓间质干细胞体外培养体系的建立及分化研究

目的 建立大鼠骨髓间质干细胞 (bonemarrowmesenchymalstemcells ,BMMSCs)体外培养体系。对大白鼠BMMSCs体外培养的条件、供体大白鼠鼠龄等进行了研究。对体外培养的大白鼠BMMSCs的形态学、增殖动力学、成骨的表面标记及体外钙化能力进行了系列研究。方法 取 2月龄SD大鼠胫骨和股骨骨髓进行体外培养。取第二代BMMSCs,绘制生长曲线并计算群体倍增时间。对经成骨诱导剂诱导的BMMSCs的ALP表达及体外钙沉积进行了研究。结果 细胞呈长梭形或多角形 ,细胞表面有不规则的细胞突起。透射电镜可见胞浆有大量的粗面内质网及线粒体 ,细胞表面可见突起。细胞生长曲线呈S形 ,群体倍增时间为 72小时。经诱导分化的BMMSCs可见碱性磷酸酶的表达。vonKossa染色可见散在深染的钙沉积斑块。结论 来源于年轻大鼠股骨骨髓的间质干细胞经体外培养并经诱导后可分化为具有部分成骨特性的细胞 ,可以为体内骨组织工程提供组织细胞。

载体颗粒表面修饰对其表面能及粉雾剂性能的影响

目的 研究载体的表面修饰对粉雾剂性能的影响。方法 用不同的润滑剂对乳糖颗粒进行了表面修饰,并利用反向气相法测定了乳糖修饰前后的表面能,考察了表面能对干扰素α 2b粉雾剂沉积性能的影响。结果 表面修饰后乳糖颗粒的流动性、表面光滑度都得到较大程度的改善,表面能也相应降低,而粉雾剂的性能得以提高。结论 利用反向气相色谱法测定载体的表面能来预测粉雾剂的性能,可以为粉雾剂的处方设计和筛选提供一种快速有力的工具。

用混悬-旋转蒸发包衣法提高干扰素α-2b粉雾剂的沉积性能

目的提高干扰素α-2b粉雾剂的沉积性能并降低其引湿性。方法采用混悬-旋转蒸发法对供吸入载药粉末进行包衣,并用扫描电镜和能谱仪对颗粒表面进行分析,考察了包衣前后粉末的引湿性及溶解性,测试了不同湿度条件对粉雾剂体外沉积的影响。结果经过包衣之后颗粒为多孔结构,且表面分布着许多10 nm左右的突起。粉末的引湿性降低而溶解性提高,包衣后干扰素α-2b粉雾剂的体外沉积性能明显提高,对湿度的耐受性也得到大幅度改善。结论混悬-旋转蒸发包衣法作为一种简单易行的方法可以大幅度降低α-2b粉雾剂的引湿性并提高体外沉积量。

姜黄素固体脂质纳米粒干粉吸入剂的制备工艺研究

目的:制备姜黄素(Cur)固体脂质纳米粒(SLN)干粉吸入剂(DPI)。方法:以粒径、多分散系数、包封率和药物沉积率等为指标筛选Cur-SLN的干燥方法(喷雾干燥和冷冻干燥);基于优化后干燥方法,以药物沉积率、排空率、休止角、吸湿增重率、含量均匀度等指标对Cur-SLN-DPI处方(乳糖-干粉比例、单剂量每粒胶囊装量)进行单因素考察并进行验证试验。结果:喷雾、冷冻干燥法所得Cur-SLN的体外有效部位沉积率分别为29.98%和15.69%,以前者为优;优化后的单剂量处方为乳糖-干粉(1∶1)混合物50mg、第3组分乳糖10 mg,填充于4号胶囊中;所制3批干粉各指标平均值为粒径3.35μm、水分4.57%、含量均匀度3.65、体外有效部位沉积率28.73%、排空率95.17%、休止角24.03°、吸湿增重率2.2%(RSD均小于2%,n=3)。结论:建议选用喷雾干燥法制备Cur-SLN;优化处方后所制Cur-SLN-DPI质量符合要求。

吸气体积对3种不同撞击器评价1种载体型粉雾剂分散沉积表现的影响

不同撞击器尽管设计原理类似,但由于内部结构不同,对相同产品的评价结果常常有差异。本研究尝试探究3种不同撞击器在不同吸气体积下对1种载体型粉雾剂(DPI)体外评价结果的差异及原因,同时讨论3种撞击器在DPI体内外相关性研究中的适用性。以微粉化马来酸氯苯那敏与载体乳糖颗粒的混合物作为处方模型,Breezhaler?为分散装置;在60 L/min吸气流速下,采用快速筛分撞击器(FSI)、安德森级联撞击器(ACI)和新一代撞击器(NGI)分别在5种吸气体积(0.5、1、2、4和5 L)下对该DPI模型进行体外测试。结果表明,FSI、ACI和NGI能准确评价DPI药物递送表现的吸气体积阈值分别为1、2和2 L。此外,在吸气体积小于2 L的条件下,FSI的评价结果更趋近于制剂处方经Breezhaler?递送后的实际分散情况,而ACI的评价结果更能表现颗粒分布的全貌。当吸气体积不小于2 L时,NGI得到的微细颗粒沉积总量与FSI基本一致,而与ACI存在较大差异,这可能与ACI固有结构所造成的级间损失有关。本研究为不同撞击器在DPI体外评价和可能的体内外相关性模型建立中的选择和应用提供了参考。

高效液相色谱法测定扎那米韦粉雾剂的含量及其体外有效部位沉积率

目的:建立高效液相色谱法测定扎那米韦粉雾剂肺部沉积率的方法。方法:采用SCX色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为乙睛-0.02 mol.L-1醋酸盐缓冲液(pH=3.7)(60∶40),检测波长为234 nm。结果:在20.0～300.0μg.mL-1范围内,峰面积对质量浓度有良好的线性关系,日内精密度和日间精密度均小于2%(n=5);回收率在98%～102%之间。结论:本法精密准确,适用于扎那米韦粉雾剂肺部沉积率的测定。

L-亮氨酸对干扰素粉雾剂性能的影响

考察了L-亮氨酸含量对以甘露醇或乳糖为主要赋形剂的载干扰素喷雾干燥颗粒的粒径、形态、吸湿性、流动性、分散性和胶囊中颗粒残留量等粉体学性质的影响,并进行了粉雾剂的体外沉积试验。结果表明,加入L-亮氨酸后,以甘露醇为赋形剂的颗粒压缩度大于乳糖颗粒,吸湿性和胶囊中颗粒残留量均小于乳糖颗粒。L-亮氨酸可提高两种粉雾剂的体外沉积量。

不同含水量胶囊壳对吸入粉雾剂体外分散效果的影响

本研究以明胶胶囊壳和羟丙甲纤维素(HPMC)胶囊壳为研究对象,分别在低、中、高3种相对湿度环境中放置15 d,制得不同含水量的胶囊壳,考察了不同含水量胶囊壳的物理性能差异。再将乳糖Respitose SV003和ML001分别与马来酸氯苯那敏混合,作为模型处方,立即灌入不同含水量和不同材质的胶囊壳中,以Breezhaler®为吸入装置,使用快速筛选撞击器对所得吸入粉雾剂(DPI)的体外沉积进行评价。结果表明,在毛细管力和静电力的共同作用下,采用含水量过高或过低的胶囊壳制备的DPI,胶囊内残留药量和预分离器中药物沉积量均较高,造成微细粒子剂量(FPD)下降;在高含水量条件下,HPMC胶囊壳的分散性能优于明胶胶囊壳;但当2种胶囊壳的含水量均适中时,胶囊材质对相同处方的体外分散性能几乎没有影响。由于乳糖ML001含有较多细粉、较大的表面粗糙度,所以该处方具有更优异的体外分散表现。

撞击器法测定吸入粉雾剂空气动力学粒径分布颗粒反弹的研究

目的对撞击器(cascade impactor,CI)法检测吸入粉雾剂空气动力学粒径分布(aerodynamic particle size distributions,APSDs)时颗粒反弹和二次夹带进行研究,为涂层材料的选择提供方法。方法用甘油、硅油分别对收集杯/盘进行涂层或不涂层处理后,分别在30~90 L·min^(-1)流速下,按照《美国药典》601项下规定进行样品收集并分析检测结果。结果对收集杯/盘进行涂层处理能明显减少滤膜沉积率;用硅油涂层后,相同流速下质量平均空气动力学粒径(mass median aerodynamic diameter,MMAD)不随收集剂量的变化而变化,APSDs也较稳定。结论使用撞击器法检测吸入粉雾剂APSDs时,对收集表面进行涂层很大程度上能够消除颗粒反弹和二次夹带;新一代碰撞取样器(next generation impactor,NGI)检测格隆溴铵吸入粉雾剂APSDs时,用硅油对收集杯进行涂层,可使检测结果更准确。

计算流体动力学用于生地黄低聚糖干粉吸入剂所选装置的模拟验证

目的采用计算流体动力学(CFD)进行药物微粒在生地黄低聚糖干粉吸入剂(RRODPI)所用2种装置内部的运动轨迹模拟,并与体外沉积结果进行对比,验证该结果的准确性。方法采用新一代药用撞击器(NGI)进行体外沉积实验得到相关数据后,根据2种吸入装置的实际尺寸,采用UGNX 10.0软件建立2种干粉吸入装置三维模型,将此模型导入ICEM CFD软件中进行网格的划分,划分网格之后在检查网格质量合格后,将其导入Fluent软件中进行相关参数的设置。设置好参数之后进行数据的迭代和收敛,当数据计算处于稳态之后进行数值分析,最终得到药物微粒在2种干粉吸入装置的运动轨迹图,并与体外沉积结果进行对比,验证模拟结果。结果体外沉积实验结果表明圆筒型装置的有效沉积率高于刺破型装置,CFD结果表明不同粒径的微粒在圆筒型装置中均能到达出气口,而对于刺破型装置,药物微粒在某一个粒径范围内无法到达出气口,2种结果均表明圆筒型装置更适合作为RRODPI所用装置。结论采用CFD进行药物微粒在干粉吸入装置中运动轨迹的模拟,得到的结果较为直观,与体外沉积实验结果相一致,可以很好地预测药物微粒在干粉吸入装置中的运动状况。

含碳酸氢铵羟基喜树碱粉雾剂的研制

目的:提高10-羟基喜树碱(HPCT)粉雾剂的沉积性能。方法:利用喷雾干燥法制备HPCT粉雾剂,考察处方中加入碳酸氢铵后粉末的密度、比表面积、表面形态、粒度及体外沉积性能。结果:制备出了敲击密度为0.015g·mL-1、比表面积为19.81m2·g-1、体积平均直径为15.64μm的粉末,该低密度、大粒径的多孔性粉粒大大提高了药物的体外沉积性能,粉雾剂的体外沉积率由18.0%提高至51.6%。结论:加入碳酸氢铵能够显著提高HPCT粉雾剂的沉积性能。

布地奈德缓释干粉吸入剂的制备及乳糖用量的影响

采用高压匀质联合喷雾干燥法制备载有布地奈德的壳聚糖微粒并考察其体外释放行为,用涡旋混合器使之与乳糖混合,以药物回收率和含量均匀度为指标考察混合速度与混合时间的影响,以药物回收率、含量均匀度、粉末流动性和体外沉积分布为指标考察乳糖用量的影响。制得微粒具有一定的体外缓释效果,可吸入组分百分比为46.0%,但流动性较差,加入10倍乳糖进行混合后,药物回收率高达96.5%,药物含量的相对标准偏差为2.5%,流动性较好,可吸入组分百分比提高至59.6%。结果表明,采用涡旋混合器可制备回收率及含量均匀度均较高的布地奈德缓释干粉吸入剂,处方具有较好的流动性,适于肺部吸入。