tPA体外纤溶活性及半定量检测方法的确立

在原有的纤维蛋白平板溶圈法 (fibrin agarose plate assay,FAPA)检测系统中引入纤溶酶原 (plasminogen) ,使该法检测组织型纤溶酶原激活剂 (tissue plasminogen activator,t- PA)的灵敏度提高 30倍以上 ,达到 0 .0 1ng(约0 .0 0 1IU )水平 ;并对不同反应时间、纤维蛋白含量、琼脂糖凝胶厚度下的溶圈结果进行对比研究。结果表明 ,37℃温育18～ 2 4h可以得到较满意结果 ;其他因素虽不同程度地影响溶圈出现时间及大小 ,但对其溶圈梯度及标准曲线无明显影响。从而确立了以 FAPA为基础的快速、灵敏、可靠的重组 t- PA体外纤溶活性半定量检测方法。

好食脉孢霉纤溶酶的纯化及体外纤溶活性研究

从公认安全真菌好食脉孢霉(Neospora sitophila)代谢产物中纯化了一种纤溶酶,纯化倍数为86.6倍,比活力为519.59 U/mg。该酶由两个分子量分别为30.0 kDa和15.5 kDa的亚基构成,是一种丝氨酸蛋白酶,能依次水解人血纤维蛋白原的Aα、Bβ和γ链,具有直接水解纤维蛋白以及激活纤溶酶原的双重功能。该酶不水解人血清白蛋白。结果表明,好食脉孢霉纤溶酶可能在治疗血栓中具有潜在的应用价值。

紫外分光光度法测定纳豆激酶体外纤溶活力

建立短时间、定量测定纳豆激酶体外纤溶活力的方法。在体外反应体系中制备血纤维蛋白底物,向体系中加入待测样品(纳豆激酶),进行纤溶反应。用紫外分光光度计测定纳豆激酶水解纤维蛋白后生成的可溶性产物的吸光值。由此对纳豆激酶体外纤溶活性进行定量测定并进行方法可行性分析。该方法具有较好的灵敏度、精密度和准确度,用时短,该方法适用于纳豆激酶体外纤溶活性的定量分析。

黄粉虫蛋白提取物纤溶活性及性质研究

目的研究黄粉虫蛋白提取物的纤溶活性及其性质。方法通过生物化学方法从黄粉虫Tenebrio molitorLinne组织分离纯化出纤溶活性蛋白,纤维蛋白平板法测定其纤溶性,对其进行溶血性、体外溶栓实验和血管生成抑制作用实验,并对其部分性质做了研究。结果分离纯化得到纤溶性蛋白。结论黄粉虫蛋白提取物具有纤溶性,该成分在40℃下基本稳定,最适反应温度为25～45℃,最适pH为7.5～8.0。其溶血率小于5%,不引起体外红细胞的明显溶血,安全性好。黄粉虫蛋白提取物受尿素和巯基乙醇(BME)的影响,而Na+,Mg2+,K+及Ca2+等各种金属离子及EDTA对其影响不大。

加味瓜蒌薤白白酒汤抗凝和溶纤作用的实验研究

目的研究加味瓜蒌薤白白酒汤抗凝和溶纤作用。方法通过凝血实验、体外溶纤实验,研究加味瓜蒌薤白白酒汤对小鼠凝血时间和体外纤维蛋白重量的影响。结果加味瓜蒌薤白白酒汤能显著延长小鼠凝血时间,与阴性对照组比较有显著差异(P<0.05);能降低体外纤维蛋白重量,与阴性对照组比较有显著差异(P<0.05)。结论加味瓜蒌薤白白酒汤有抗凝和溶纤作用。