牛供体细胞的来源、血清饥饿和预激活对核移植卵体外胚胎发育的影响

牛皮肤成纤维细胞经血清饥饿或预激活处理后获得核胞体 ,并注入去核卵母细胞内构建重组胚。检查重组胚 2 4h和 36h卵裂率以及 8d囊胚率 ,以评估供体细胞及其处理方法对体细胞核移植效果的影响。实验结果表明 :来自 3个年龄 (6、 18和 36月龄 )、 2个品系 (红安格斯肉牛和荷斯坦奶牛 )的 4头供体牛皮肤细胞重组胚的卵裂率和囊胚率均无差异。生长到完全汇合的 36月龄荷斯坦牛供体细胞血清饥饿 10～ 13d组重组胚的 36h卵裂率显著低于 0d (对照 )、 3～ 5d和 6～ 9d组 ,囊胚率显著低于 3～ 5d组 ;经 5 μmol/L离子霉素或7%乙醇预激活 5min重组胚的卵裂率和囊胚率均与对照组无差异。

低氧及常氧条件下不同品系小鼠体外受精胚胎发育及妊娠结局观察

目的 比较不同品系小鼠来源胚胎在低氧条件(5%O2)及常氧条件(20%O2)下体外发育情况和妊娠结局,探讨适用于评价人类体外受精实验室质量控制的体系。方法 KM小鼠、ICR小鼠、C57BL/6J小鼠、BALB/c小鼠各20只,雌雄各半。取四种品系雌性小鼠各10只常规促排卵,取卵后每个品系小鼠均随机分为低氧组与常氧组分别进行培养,进行体外受精及胚胎移植,观察并比较两组各品系小鼠囊胚形态结构、正常受精率、体外受精第2天(D2)卵裂率、D2优质胚胎率、D3优质胚胎率、囊胚率、新鲜移植妊娠率、解冻移植妊娠率。结果 与常氧组比较,低氧组KM小鼠、ICR小鼠、C57BL/6J小鼠、BALB/c小鼠囊胚体外培养均呈中空球形,囊胚均具有更加规则的形状和更高的折光度。低氧组KM小鼠、ICR小鼠、C57BL/6J小鼠、BALB/c小鼠囊胚率、新鲜移植妊娠率、解冻移植妊娠率均高于常氧组(P均<0.05),两组四个品系小鼠正常受精率、D2卵裂率、D2优质胚胎率、D3优质胚胎率比较均无统计学意义。结论 低氧条件下胚胎体外培养可提高KM小鼠、ICR小鼠、C57BL/6J小鼠、BALB/c小鼠胚胎体外发育潜能、改善妊娠结局。

体外受精胚胎发育潜能的形态学评估

随着体外受精-胚胎移植（IVF—ET）技术的不断进步，如卵巢刺激方案和胚胎培养技术的革新，已促使妊娠率大幅度提高，而伴随的多胎妊娠率也升高。多胎妊娠危及母婴的安全，有悖于优生原则。减少移植胚胎的数目，推行单胚胎移植是降低多胎出生最为有效的措施，但困扰胚胎学家的是如何选择最具有发育潜能的胚胎用于移植。目前，胚胎体外发育潜能的评估方法仍主要依据胚胎形态学的评分，

人输卵管上皮细胞共培养系统对小鼠胚胎体外发育的影响

为了检测人输卵管上皮细胞对早期胚胎体外分裂与生长的影响，将２１０个小鼠２细胞期胚胎与传代的人输卵管上皮细胞进行共培养，另以１４５个胚胎培养在单纯的培养液中作为对照。共培养的胚胎有８９．０％发育到桑椹胚，８７．１％形成囊胚，而对照组仅为６３．４％和４９．０％（Ｐ＜０．０１）。共培养胚胎发育速度也较对照组快，且发育过程中，共培养胚胎出现碎片及不规则分裂率明显低于对照组。提示人输卵管上皮细胞共培养系统可以促进胚胎体外发育，能在体外获得数量较多的高质量胚胎。

Iloprost对猪早期胚胎体外发育的影响

本研究旨在探讨PGI2类似物iloprost对猪胚胎体外发育的影响。试验以IVF胚胎为研究对象,分别在不同时期(0、24、48、72h)将不同浓度(0、0.2、0.5、1.0、2.0、5.0、10.0μmol.L-1)iloprost加入到猪胚胎培养液中,于156h时记录囊胚发育率和囊胚细胞数,筛选获得最佳添加方案,检测胚胎脂肪代谢速度和代谢相关基因(cox2、creb、pparδ、pdk、cpt2)的表达水平,分析iloprost影响胚胎发育的机制。结果显示,最佳的添加方案为,在受精后48h加入2.0μmol.L-1 iloprost,胚胎囊胚发育率(28%)和囊胚细胞数(49.42)显著高于(P<0.05)对照组的囊胚发育率(16%)和囊胚细胞数(28.22);添加iloprost后,胚胎脂肪酸降解速度也显著加快(P<0.05),脂肪酸代谢相关基因cox2、creb、pparδ、cpt2的表达量上升,糖代谢相关基因pdk表达量无显著变化。结果表明,PGI2类似物iloprost可以促进胚胎降解脂肪酸,为胚胎发育提供能量,提高了胚胎体外发育能力。

固肾安胎中药对小鼠早期胚胎体外发育的影响

固肾安胎中药在助孕保胎方面有着良好的临床疗效，其中尤以寿胎丸为经典名方。本研究旨在通过采用血清药理学及胚胎体外培养的实验方法，动态观察配有各种含药血清的培养基中早期胚胎各期（2CE至囊胚）的发育率，研究单味固肾安胎中药及寿胎丸对早期胚胎发育的作用，以探讨固肾安胎中药对早期胚胎发育的影响及作用机制。

GnRH类似物促进人早期胚胎体外发育能力的实验研究

目的研究促性腺激素释放激素(GnRH)类似物对人类早期胚胎体外发育能力的影响.方法IVF的受精卵进行体外培养.实验一的培养基中,GnRH类似物的浓度分别是0,0.1,0.2,0.5,0.8和1.0μg/mL;实验二的培养基中都含有0.5μg/mL的GnRH类似物,而GnRH拮抗剂的浓度分别为0,0.2,0.4,0.8,1.0和1.2μg/mL.结果培养基中的GnRH类似物浓度在0.5μg/mL及以上时,实验组的桑椹胚/囊胚生成率显著高于对照组(P<0.05),而且,实验组的8-细胞期胚胎形成率也同时显著高于对照组(P<0.05).培养基中含0.8μg/mL及以上浓度的GnRH拮抗剂时,实验组的桑椹胚/囊胚生成率显著低于对照组(P<0.05),而且8-细胞期胚胎形成率也显著降低(P<0.05).结论GnRH类似物对体外培养的人早期胚胎有促进分裂的作用,这种促进早期胚胎发育的效果在8-细胞期就能显现出来.GnRH拮抗剂能抵消GnRH类似物对早期胚胎发育的促进效果.

血管内皮生长因子对牛胚胎体外发育影响的最适添加浓度筛选试验

为了探明血管内皮生长因子(VascularEndothelialGrowthfactor,VEGF)对牛卵母细胞体外发育影响的最适添加浓度,试验中应用了人类重组VEGF165。结果表明,添加1ng/ml、2ng/ml和5ng/mlVEGF均可显著提高胚胎的卵裂率和体外发育率,但以5ng/mlVEGF处理组可以得到最高的胚胎发育至4-8细胞期的发育率,因而选择5ng/mlVEGF浓度作为以后VEGF系列试验的添加浓度。

代谢组学评估胚胎体外发育潜能的应用研究综述

胚胎体外发育能力的评估在人类辅助生殖技术中起关键作用。多胎妊娠带来的围产期死亡和医疗负担日益凸显。因此,如何获得高发育潜能的胚胎以减少多胎率和提高临床妊娠率是目前辅助生殖技术研究的重点。代谢组学作为一种非侵入性检测方法,主要通过对卵泡液或胚胎的培养液进行检测分析,能客观地评价胚胎质量和预测胚胎的发育潜能。因此,通过代谢组学判断和选择具有良好发育潜能的胚胎,对孕育健康后代和减少经济负担具有重要意义。本文首先对代谢组学的概况及研究方法进行了简单介绍,然后对代谢组学在生殖领域的最新应用进行了综述。

家兔胚胎体外发育的研究

171枚2—细胞期兔胚在 TCM—199,Ham'sF—10、PBS 对照液和试验液中体外培养120小时。以在199组织培养液中的效果最佳,有65.0％(13/20)和30.0％ (6/20)的囊胚和孵出囊胚发育率。292枚2细胞兔胚在含20％FCS、兔、绵羊和猪血清及不同含量 FCS 的199液中培养。四种血清组的囊胚发育率分别为60.0％(27/45)、72.0％(18/25)、72.9％(27/37)、29.9％(7/26),孵出率分别为26.7％(12/45)、40.0％(10/25)、40.5％(15/37)、7.7％(2/26)。186枚1-、2-、4-、8-、16-细胞兔胚在相同条件下培养,结果4-、8-、16-细胞兔胚发育分别显著优于1-、2-、4-细胞兔胚(P<0.05)。72枚早期兔胚在37～38℃ PBS 中培养,平均有11.1％(8/72)胚胎可发育至囊胚,但未见孵出。

培养皿种类与牛磺酸和谷酰胺对牛胚胎体外发育的影响

本研究的目的在于探讨牛磺酸（ｔａｕｒｉｎｅ）和谷酰胺（ｇｌｕｔａｍｉｎｅ） 的综合效果以及对比４ 孔培养板（４ － ｗｅｌｌ ｐｌａｔｅ） 和培替氏培养皿（ｐｅｔｒｉ ｄｉｓｈ）对牛卵子体外受精后的分裂率、囊胚率和囊胚细胞数的影响。结果表明，牛磺酸和谷酰胺对牛受精卵体外发育的作用与胚胎的培养系统和所用培养器皿有关。利用４ 孔培养板和培替氏培养皿培养牛受精卵对牛胚胎体外发育影响的对比效果不明显。

抗氧化剂对家畜胚胎体外发育影响的研究进展

现在研究普遍认为活性氧自由基是导致胚胎体外发育阻滞的主要原因。本文主要综述了不同抗氧化剂对牛胚胎体外发育的影响,并分析其作用机制。

小鼠体外受精及其胚胎体外培养的比较研究

目的通过比较不同品系小鼠体外受精情况以及不同培养液对C57BL/6J小鼠胚胎体外培养效果的实验,进一步完善小鼠体外受精和早期胚胎体外培养体系。方法对C57BL/6J、DBA/2、FVB/NJ、BALB/c、KM、ICR及BARRⅡ小鼠进行超排和体外受精,并对C57BL/6J小鼠体外受精后的2-细胞胚胎用HTF、CZB、KSOM、M16、HECM五种培养液在相同条件下进行体外培养到囊胚,计算4-细胞～囊胚的发育率。结果各品系小鼠平均排卵数为13.0～38.7个(P<0.01),体外受精率为70.2%～92.8%(P<0.05)。不同培养液至4-细胞的发育率为60.3%～95.8%,其中KSOM的4-细胞发育率为95.8%,最适合2-细胞向4-细胞的发育。8-细胞发育率为52.8%～91.1%,桑椹胚发育率为40.6%～87.5%,囊胚发育率为5.1%～75.4%,各阶段胚胎发育率均差异显著。其中适合于金黄仓鼠桑椹胚、囊胚发育的HECM-2并不支持C57BL/6J囊胚的发育,其囊胚发育率只有5.1%,CZB最适合其囊胚的发育。结论遗传背景是影响小鼠超排及体外受精效果的主要因素之一。葡萄糖的存在不利于克服2-细胞发育阻断,胚胎在8-细胞期以前,主要能源物质不是葡萄糖,直到桑椹胚后期,葡萄糖才是主要的能量物质。磷酸盐可引起胚胎发育阻断。氨基酸和EDTA有利于克服胚胎发育阻滞。

精子核蛋白组型转换对胚胎体外发育的影响

目的探讨精子核蛋白组型转换与精子DNA损伤、精子形态以及胚胎发育质量的相关性，评价其在辅助生殖中的诊断价值。方法检测437例接受体外受精-胚胎移植治疗的不育男性精子核蛋白组型转换率，分析核蛋白组型转换率与精子异常形态率、精子DNA损伤率、受精率、正常受精率、卵裂率、可移植胚胎率、受精第3天（D3）优质胚胎率、囊胚形成率以及优质囊胚率之间的相关性。结果核蛋白组型转换正常A组（异常率≤30％，135例）与核蛋白组型转换异常B组（30％〈异常率〈60％，170例）相比，精子正常形态率、精子DNA损伤、受精率、正常受精率、卵裂率、可移植胚胎率、D3优质胚胎率、囊胚形成率、优质囊胚率之间差异无统计学意义（P〉0．05）；核蛋白组型转换异常C组（异常率≥60％，132例）精子异常形态率、精子DNA损伤、正常受精率、可移植胚胎率、D3优质胚胎率、优质囊胚率与A组相比差异具有统计学意义（P〈0．01），而受精率、卵裂率和囊胚形成率同A组比较差异无统计学意义（P〉0．05）。结论精子核蛋白组型转换异常可能与精子DNA损伤、精子形态以及胚胎发育密切相关。在辅助生殖技术治疗前，对男性的精子核蛋白组转换进行评估有临床价值。

玉米赤霉烯酮对小鼠胚胎体外发育的影响

目的研究玉米赤霉烯酮(F-2毒素)对小鼠胚胎体外发育的影响。方法将(8只/批)6～8周龄清洁级昆明妊娠4 d小鼠处死,挑选形态良好的8-细胞(8-细胞期是早期胚胎发育过程中便于观察及深入开展胚胎在发育生物学、胚胎移植、转基因动物等领域研究工作的最佳阶段)。胚胎,采用微滴培养法,将形态良好的8-细胞胚胎(10～15个/孔)移入0(溶剂对照)、10-8、10-6和10-4mol/L的F-2毒素培养液(含5%人输卵管液+10%胎牛血清)中,记录囊胚形成数及囊胚脱带数,并计算囊胚形成率和囊胚脱带率。每个剂量设5个平行。结果与溶剂对照组比较,F-2毒素浓度在10-4和10-6mol/L时囊胚形成率较低,差异均有统计学意义(P<0.05);F-2毒素浓度在10-8、10-6和10-4mol/L时,囊胚脱带率较低,差异均有统计学意义(P<0.05)。囊胚形成率和囊胚脱带率均随着F-2毒素浓度的升高呈下降趋势。结论 F-2毒素在小鼠胚胎发育过程中具有毒性作用。

体外受精胚胎发育潜能的评估概况与研究进展

体外受精胚胎的发育潜能是胚胎产生的后代细胞能分化成各种细胞的能力，或指胚胎所有可能发育命运的总和。体外受精胚胎植入前的发育潜能评估是人类辅助生殖领域需要解决的关键性问题之一。有效预测人类早期胚胎发育潜能，可望移植较少胚胎，获得与移植多枚胚胎同样的植入率和临床妊娠率，同时降低多胎妊娠率。

褪黑素对小鼠2-细胞期胚胎发育的影响

目的:研究褪黑素对小鼠2-细胞期胚胎发育的影响。方法:在培养液中添加不同浓度褪黑素,在不同的作用时间点,观察并记录小鼠胚胎囊胚率、孵出率,研究其变化情况。结果:不同浓度褪黑素对小鼠2-细胞期胚胎存在双向作用,在10-13-10-5M之间促进细胞囊胚形成和孵出,在10-9M时促进效应达到最高,而在10-3M时则呈现出一定的毒性作用。结论:褪黑素对小鼠胚胎发育影响与褪黑素浓度密切相关。

营养

062129必需脂肪酸对大鼠脑组织中EAA含量的影响，062130氨基酸浓度对昆明小鼠胚胎体外发育的影响，062131补充精氨酸对大负荷训练大鼠免疫功能的影响及其机制，062132补充支链氨基酸对划船运动员不同负荷运动后血丙氨酸、葡萄糖及乳酸的影响，062133氨基末端激酶信号通路在细胞凋亡中的作用。