ATP生物荧光肿瘤体外药敏检测技术在治疗非小细胞肺癌胸水中的临床应用

目的:研究三磷酸腺苷-生物荧光肿瘤体外药敏检测技术(ATP-TCA)在非小细胞肺癌(NSCLC)化疗中的应用,为临床治疗方案的选择提供依据。方法:选择52例伴有胸水的NSCLC患者,根据患者及家属治疗意愿分为经验治疗组和药敏治疗组。经验治疗组20例患者根据经验给予(紫杉醇联合卡铂,PTX+CBP)标准方案全身化疗;药敏治疗组32例患者对胸水标本分别进行顺铂(DDP)、诺维本(NVB)、紫杉醇(PTX)、卡铂(CBP)、健择(GEM)、PTX+CBP、NVB+CBP、GEM+DDP体外药敏检测,根据体外药敏检测结果选用化疗方案,比较2组患者治疗有效率。结果:体外药敏试验,单一用药中NVB和PTX对NSCLC的体外敏感率最高,均为28.1%;GEM的体外敏感率次之,为25%;CBP的体外敏感率为21.9%;DDP的体外敏感率最低,为17.6%。联合用药方案显示较好的治疗效果,其中GEM+DDP的体外敏感率最高,达55.9%;PTX+CBP的体外敏感率次之,达50%;NVB+CBP的体外敏感率最低,为40.6%。药敏治疗组患者有效率为65.6%,经验治疗组有效率为40.0%,两组有效率比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论:不同化疗药物对NSCLC的体外敏感率不同;根据药敏试验结果选择化疗方案可取得更好的临床治疗效果。

体外药敏实验及MGMT表达为依据的恶性脑胶质瘤个体化化疗:42例近期疗效分析

背景与目的:脑胶质瘤细胞对化疗药物耐药是导致化疗有效率低的重要原因之一。O6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶(O6-methylguanine-DNAmethyltransferase,MGMT)可使DNA烷基化损伤得到修复,是细胞对治疗恶性脑胶质瘤的常用药物亚硝脲类及替莫唑胺(temozolomide,TMZ)产生耐药的主要原因。本研究采用体外药敏实验和检测肿瘤MGMT表达指导进行恶性脑胶质瘤个体化化疗,评价其近期疗效和不良反应。方法:经手术后病理确诊的恶性脑胶质瘤患者42例,取其新鲜肿瘤组织采用MTT法进行体外药敏实验,免疫组织化学方法检测肿瘤组织MGMT蛋白表达,根据体外药敏实验及MGMT测定结果选择化疗方案进行化疗。42例患者中有7例接受了2个方案化疗,共49例次可评价近期疗效。按WHO疗效评价标准进行近期疗效评价。不良反应评价按照美国国立癌症研究所评价标准。结果:6例次(12%)完全缓解,10例次(20%)部分缓解,20例次(41%)稳定,13例次(27%)进展。客观有效率为33%,疾病控制率为73%。80个周期可以评价不良反应,化疗的主要剂量限制性毒性为骨髓抑制,Ⅲ、Ⅳ级中性粒细胞减少占28%(22/80),Ⅳ级血红蛋白降低占1%(1/80),Ⅲ、Ⅳ级血小板减少占8%(6/80)。非血液学毒性主要为恶心/呕吐、脱发和疲劳。结论:根据体外药敏实验及MGMT蛋白表达选择化疗方案,对恶性脑胶质瘤患者进行个体化化疗,可以提高近期化疗疗效。

体外药敏试验指导的恶性脑胶质瘤预见性化疗

目的探讨体外药敏试验指导恶性脑胶质瘤化疗的临床效果及意义。方法对恶性脑肿瘤标本常规采用MTT法进行7种化疗药物体外药敏试验,以指导临床化疗方案的制定。将临床化疗效果与体外药敏结果相比较,分析二者间的符合情况。结果对147例人脑恶性肿瘤手术标本进行体外药敏试验,获得药敏结果的85例,其体外药敏的总成功率58%,早期阶段成功率只有33%,后期到达82%。其中68例为恶性胶质瘤,31例接受化疗。进入疗效评价的共22例,共化疗84个周期,平均3.8个周期。采用一个化疗方案化疗者17例,2个方案化疗者3例,3个方案化疗者2例,总计疗效评价29例次。体外药敏试验结果与临床治疗效果的总符合率为82.8%,阳性符合率为71.4%,阴性符合率为93.3%。体外药敏试验预示的敏感性为90.9%,特异性为77.8%。根据药敏试验结果进行化疗的临床结果:完全缓解(CR)2例,部分缓解(PR)2例,稳定(SD)6例,进展(PD)4例,客观有效率为(CR+PR)为28.6%,疾病控制率为(CR+PR+SD)为71.4%;药敏试验没有发现敏感药物者(凭临床传统用药)组无CR、PR,SD1例,PD14例,客观有效率为0%,疾病控制率为(CR+PR+SD)为6.7%。客观有效率及疾病控制率在药敏试验敏感组显著高于耐药组(P<0.05)。结论MTT体外药敏试验对排除无效药物、筛选敏感药物进行个体化的化疗,提高临床化疗效果,具有重要意义。

体外药敏试验及化疗耐药和敏感分子特征指导的恶性脑胶质瘤临床个体化化疗研究

目的探讨恶性脑胶质瘤临床个体化化疗的策略。方法恶性脑胶质瘤新鲜肿瘤组织用MTT法进行化疗药物体外药敏试验;用免疫组织化学方法检测肿瘤组织O6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶(O6-methylguanine-DNA methyltransferase,MGMT)蛋白表达,据MGMT测定结果选择化疗方案;经手术后病理确诊的MGMT表达阳性的恶性脑胶质瘤患者,接受3组化疗方案化疗:含亚硝脲类药物化疗组,含替莫唑胺化疗组,不含亚硝脲和替莫唑胺化疗组。评价3组化疗方案的近期疗效和不良反应;用FISH方法检测间变性少突胶质细胞瘤组织1p/19q LOH,据检测结果选择化、放疗模式。结果体外药敏试验阴性符合率较高,为14/15。据MGMT表达情况选择化疗方案的客观有效率为34%,疾病控制率为72%。MGMT阳性表达的恶性脑胶质瘤,含亚硝脲类化疗组、含替莫唑胺化疗组、不含亚硝脲和替莫唑胺化疗组的客观有效率及疾病控制率分别为:0和2/11、3/18和11/18、7/22和17/22。不含亚硝脲和TMZ化疗组的客观有效率和疾病控制率均较含亚硝脲化疗组高,有统计学差异(P<0.05)。结论据体外药敏试验及MGMT测定选择化疗方案,可提高近期疗效;MGMT阳性表达的恶性胶质瘤病人,不含亚硝脲和替莫唑胺化疗方案有较好疗效;但含替莫唑胺化疗方案也可应用。

常用化疗药物对不同组织类型非小细胞肺癌体外药敏实验

目的探讨三种组织类型的非小细胞肺癌(NSCLC)对5种临床常用化疗药物的敏感性。方法28例临床肺部肿瘤标本制备成组织细胞悬液,在体外(96孔细胞培养板内)培养,24 h后加入化疗药物。应用四氮唑蓝比色(MTT)法检测各孔的吸光度值并计算出肿瘤细胞对所试药物的敏感率。结果肺腺癌对异环磷酰胺、丝裂霉素、顺铂的敏感率分别为75%、83%和75%;鳞癌对异环磷酰胺、丝裂霉素、顺铂的敏感率均达到80%。肺腺癌、鳞癌对紫杉醇的敏感率不高,而腺鳞癌对该药的敏感率可达100%。肺腺癌对阿霉素的敏感率仅为33%,肺鳞癌对该药也无明显反应性。结论不同组织类型非小细胞肺癌对5种化疗药物的敏感性存在显著差异。

喉癌和鼻咽癌体外药敏试验AgNOR法的实验及临床研究

目的 :用嗜银蛋白检测技术 (AgNOR)分析喉癌和鼻咽癌对 8种常用化疗药物的敏感性。 方法 :从 5 6例喉癌和鼻咽癌患者获取新鲜肿瘤组织标本 ,采用单纯机械分离法制备单细胞悬液 ,加入抗癌药物后培养 36h ,细胞悬液涂片、银染 ,计数银染颗粒后计算均值下降率 ;12例患者同期行化疗。结果 :5 1例肿瘤获得实验成功 ,可评价率为 91.1% ;AgNOR颗粒均值下降率从 0～ 6 3% ,在 8种单一药物中 ,对DDP的敏感率最高 ,其它较为敏感的药物为VCR、5 -FU、PYM ;鼻咽癌对抗癌药物的敏感性显著高于喉癌对抗癌药物的敏感性 ;体外药敏与体内疗效的总符合率为 80 %。结论 :AgNOR技术简便易行 ,与临床相关性好 ,是一种有应用前景的体外药敏筛选方法。

四种中药抗马拉色菌的体外药敏实验

目的观察苦参、白鲜皮、鱼腥草、马齿苋及其混合液对20株马拉色菌临床分离株和参考菌株的体外抑菌效果。方法参照美国国家临床实验室标准化委员会(NCCLS)制订的M27-A方案中酵母菌微量稀释法,采用含橄榄油的液体培养基测定各中药体外抗马拉色菌的敏感性。结果混合液组和鱼腥草组的MIC值低于其它各组,苦参、白鲜皮、马齿苋各组之间差异无统计学意义。结论鱼腥草在体外有较强的抗马拉色菌的作用,苦参、白鲜皮、马齿苋各单味药对马拉色菌无明显体外抑制作用,NCCLS-M27A方案可用于抗马拉色菌敏感性测定。

土槿皮等5种中药及其不同组合抗糠秕马拉色菌的体外药敏试验研究

目的测定土槿皮、侧柏叶、苦参、丁香、肉桂及其不同组合对糠秕马拉色菌的最小抑菌浓度,观察其体外抑菌效果。方法参照美国国家临床实验室标准化委员会制订的M27-A方案中酵母菌微量稀释法,在此基础上进行改良,采用含油的培养基作为药敏试验的液基,制备微量药敏板,对糠秕马拉色菌进行体外药敏试验。结果最低抑菌浓度(minimum inhibitory concentration,MIC)依次为:5种中药混合液(槿柏洗剂):5.5 mg/m L,土槿皮+侧柏叶+苦参+丁香:16 mg/m L,土槿皮+侧柏叶+苦参:8.5 mg/m L,丁香+肉桂:9 mg/m L,土槿皮:10 mg/m L。结论相比于各单味药及不同组合,槿柏洗剂全方MIC为最小,5种中药及其不同组合混合液均有抑制糠秕马拉色菌生长的作用。

用E-test法对菌丝相马尔尼菲青霉进行体外药敏检测

用E test抗真菌药敏试条研究酮康唑、伊曲康唑、5 氟胞嘧啶、两性霉素B、氟康唑对马尔尼菲青霉(PM)菌丝相的敏感性 ,判定MIC值。结果5种抗真菌药对PM菌丝相均具良好敏感性 ,尤以伊曲康唑为优。马尔尼菲青霉的药敏试验为临床上选择有效药物具有一定的意义。

日光灯光照对替加环素活性及体外药敏试验结果的影响

目的探讨日光灯光照对替加环素抗菌活性的影响,为确定替加环素体外药敏试验合适的照明条件及药物临床使用的稳定性提供依据。方法采用微量肉汤稀释法检测不同光照时间处理后的替加环素药液对大肠埃希菌和鲍曼不动杆菌最低抑菌浓度(MIC值),并采用高效液相色谱法(HPLC)检测替加环素有效成分的变化。结果体外药敏结果显示经光照处理的各组替加环素抗菌活性均未发生明显变化。HPLC结果显示经光照处理的各组替加环素与对照组相比,有效成分也都未发生明显改变。结论替加环素液体制剂形式在实验室和临床操作过程中无须严格避光,日光灯源可直接作为照明光源。

恶性脑胶质瘤细胞体外药敏及P-糖蛋白检测的临床意义

目的 :检测脑胶质瘤细胞体外药敏及P -糖蛋白的表达 ,为临床选择化疗药物制定方案提供依据。方法 :采用MTT法检测 30例脑胶质瘤患者肿瘤细胞 ,对化疗药物的敏感性以及采用免疫组化方法检测脑胶质瘤细胞的P -糖蛋白的表达。结果 :30例脑胶质瘤患者肿瘤细胞体外药敏显示 :高三尖杉酯碱 (H)、长春新碱(VCR)、阿糖胞苷 (Ara -C)、足叶乙甙 (Vp - 16 )、柔红霉素 (DNR)、米托葸昆 (MX)、平阳霉素 (SP)、阿克拉霉素 (ACR)、阿霉素 (ADM )、环已亚硝脲 (CCNU)等化疗药物对肿瘤细胞均有一定的抑制作用 ,以CCNU、ADM、ACR、DNR、MX、Vp - 16抑制作用较强。检测 2 8例患者脑胶质瘤细胞P -糖蛋白表达 ,2 4例表达(- ) ,4例表达 (+) ,其中 3例为复发患者。结论 :胶质瘤细胞体外药敏及P -糖蛋白表达的检测 ,可为临床指导用药 ,制定化疗方案 ,提供重要参考实用价值。

三磷酸腺苷-肿瘤体外药敏试验对宫颈癌临床化学治疗的指导作用

目的:研究三磷酸腺苷-肿瘤体外药敏试验(ATP-tumor chemosensitivity assay,ATP-TCA)对宫颈癌患者化学治疗(化疗)方案选择的指导性作用。方法:选择2007年7月至2009年10月宫颈癌住院患者72例,将其随机分为药敏组(35例)和对照组(37)例。采用ATP-TCA法检测药敏组宫颈癌组织对6种联合化疗方案的敏感性。药敏组患者根据药敏结果选择化疗方案,对照组根据临床经验制定化疗方案。随访3年,比较药敏组与对照组1年复发率和3年生存率。结果:35例药敏组中有32例成功进行了ATP-TCA检测;体外有效例数分别为紫杉醇+卡铂20例、紫杉醇+奥沙利铂18例、博莱霉素+异环磷酰胺+顺铂17例、博莱霉素+长春新碱+顺铂18例、氟尿嘧啶+顺铂17例、吉西他滨+顺铂21例。1年复发例数药敏组与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05);3年生存情况药敏组好于对照组(P<0.05)。结论:ATP-TCA法可以为宫颈癌患者筛选出敏感、有效、个体化的化疗方案,值得临床推广。

生殖系统念珠菌感染的菌型及对6种抗真菌药物的体外药敏分析

目的检测性传播疾病病人念珠菌菌型及药物敏感性。方法采用法国梅里埃公司的ATB ID 32 C酵母菌鉴定反应板鉴定菌种和Rosco纸片扩散法进行念珠菌的体外药敏检测,比较不同菌型念珠菌的药敏趋势。结果临床155例生殖系统念珠菌感染者中白念珠菌110例(70.97%)、近平滑念珠菌22例(14.19%)、光滑念珠菌12例(7.74%)、热带念珠菌6例(3.87%)、其它念珠菌5例(3.23%),其药敏结果总体趋势为制霉菌素(100%)、伊曲康唑(89.03%)、氟康唑(95.48%)和酮康唑(96.13%)较为敏感,而益康唑(58.70%)和咪康唑(56.13%)的中介度和耐药性较高。结论唑类抗真菌药存在交叉耐药,不同菌型念珠菌药敏谱存在差异。

外阴阴道念珠菌病的病原检测及体外药敏检测

目的 :了解性病门诊外阴阴道念珠菌病 (VVC)患者的病因及酵母菌体外对伊曲康唑 (IT)、氟康唑 (FL)的敏感性。方法 :用法国梅里埃公司的试剂盒对 10 7例疑诊为VVC的阴道分泌物标本进行培养鉴定 ,并用E test抗真菌药敏试条检测IT、FL对酵母菌的MIC值 ,判定敏感性。结果 :10 7例阴道分泌物标本培养阳性 87例 ,分离出白念株菌 69株 ( 79.3 1% ,69/ 87) ,其中对IT敏感 67株、中敏 1株、耐药 1株 ,对FL均敏感 ( 69株 ) ;光滑念株菌 10株 ( 11.4 9% ,10 / 87) ,其中对IT敏感 2株、中敏 2株、耐药 6株 ,对FL敏感 9株、耐药 1株 ;近平滑念珠菌 4例 ( 4 .60 % ,4 / 87) ,对IT敏感 3株、耐药 1株 ,对FL均敏感 ( 4株 ) ;热带念珠菌、土生念珠菌、清酒念珠菌和埃莫毕赤念珠菌各 1例 ( 1.15 % ,1/ 87) ,其对IT、FL均敏感。结论 :VVC最常见的病因仍是白念珠菌 ,但比率明显下降 ;用E test法检测酵母菌对IT。