中药复方体外药理研究方法思考

中药复方的体外药理机制研究是明确中药复方效应靶点和清晰阐释中医药内涵的关键,然而中药复方不同于单一成分或化学药物,其物质基础不明、效应成分不清和复杂的成分组成等特点使中药复方的体外药理研究方法争议颇多。就细胞实验而言,直接干预方法多采用水煎液或醇提物直接加入细胞培养体系,间接干预方法主要为制备含药血清、含药肠吸收液、含药肝孵育液或含药脑脊液等加入细胞培养体系,亦或是筛选有效活性成分直接进行药理机制研究。然而,每种方法均存在一定的缺点,不能完全清晰地实现中药复方的体外机制研究,因此,针对不同研究需求,选择合适的中药复方体外药理研究方法,通过研究设计规避其缺点,优化出具备较高科学性和可重复性的研究方案是中药复方体外药理研究亟待解决的关键技术问题。

基于含药肠吸收液法的复方丹参片对大鼠离体胸主动脉环的作用及机制初步研究

目的初步探讨含药肠吸收液方法用于中药复方体外药理作用与作用机制研究的可行性。方法翻转囊法制备复方丹参片含药肠吸收液,采用大鼠离体胸主动脉环灌流模型,观察累积浓度含药肠吸收液对基础状态、KCl预收缩、有钙/无钙液苯肾上腺素(PE)预收缩血管环的作用;对PE和KCl引起的依赖于细胞内钙和细胞外钙收缩反应的影响;吲哚美辛、L-NAME对其舒张血管作用的影响,并与硝苯地平比较。结果复方丹参片含药肠吸收液对基础状态血管环无明显影响;可剂量依赖性抑制KCl、有钙/无钙液PE预收缩的血管;可拮抗PE和KCl诱发的内钙/外钙依赖性收缩反应;而L-NAME、吲哚美辛不能阻断其舒张血管作用。结论复方丹参片含药肠吸收液可主要通过阻断钙通道产生舒张血管平滑肌的作用,提示含药肠吸收液方法可用于中药复方体外药理研究。

基于含药肝孵育液法的麻黄-杏仁药对舒张支气管平滑肌的β2受体机制与效应成分验证

目的:分析麻黄-杏仁药对含药肝孵育液的解痉效应成分与效应指标之间的关联性,与分子对接及文献结果对比,进一步探讨含药肝孵育液法用于中药体外组织器官水平药理学研究的可行性。方法:采用HPLC法测定麻黄-杏仁药对含药肝孵育液中麻黄碱(X1)、伪麻黄碱(X2)、甲基麻黄碱(X3)、苦杏仁苷(X4)的含量;于乙酰胆碱和磷酸组胺预收缩的离体气管环痉挛模型,采用生物信号采集系统检测气管环张力变化,ELISA检测气管组织环磷酸腺苷(cAMP)与环磷酸鸟苷(cGMP)及二者比值变化;采用多元线性回归分析效应成分与效应指标的相关性;采用分子对接技术分析验证上述实验结果。结果:麻黄-杏仁药对能上调气管环舒张率(Y1)和cAMP/cGMP比值(Y2);以效应成分含量为自变量,效应指标变化为因变量,得回归方程分别为Y1=0.238 X1-0.105 X2+0.675 X3-0.097 X4-82.161(R2=0.961)和Y2=0.093 X1-0.056 X2+0.108 X3+0.017 X4-16.197(R2=0.999),效应成分与效应指标之间相关性较强,其对效应指标影响程度为:甲基麻黄碱>麻黄碱>伪麻黄碱>苦杏仁苷;分子对接结果表明效应成分与肾上腺素β2受体的结合程度与上述结果一致。结论:麻黄-杏仁药对含药肝孵育液用于体外支气管环的药效结果与分子对接及文献调研结果基本一致,进一步表明该方法用于中药体外组织器官水平药效学研究具有一定的可行性。