RNA干扰用siRNA的体外转录合成

RNA干扰(RNAinterference,RNAi)作为一种特异性沉默基因表达的方法,正在成为研究基因功能、胚胎发育及病毒性疾病治疗的重要工具,而获得符合干扰要求的短双链干扰RNA(smallinterferenceRNA,siRNA)是进行RNA;研究的首要步骤。本研究建立了体外转录合成siRNA方法,并用其生成的siRNA干扰鸡成纤维细胞外源绿荧光蛋白(GFP)基因和内源3-磷酸甘油醛脱氢酶(GAPDH)基因的表达。结果显示,siRNA能特异性降低鸡成纤维细胞中内外源基因的表达。本实验认为这种以DNA为模板体外转录合成siRNA方法操作简单、成本低、产物得率高,值得从事RNA研究者参考借鉴。

染色体原位杂交技术及其应用

染色体原位杂交作为一种直接、快速、有效的基因定位技术最早是由Pardue等于1970年报道的。当时采用小鼠随体DNA为模板,利用氚标记的核苷酸在体外转录合成RNA探针。再用该探针与中期染色体标本进行原位杂交,然后进行放射自显影,显影后用吉姆萨染色,发现银粒大部分集中在染色体上的深染着丝粒区,首次证明小鼠随体DNA主要分布于染色体上的结构异染色质区。

RNA－RNA原位杂交检测和定量分析心肌中肠道病毒RNA

ＲＮＡ－ＲＮＡ原位杂交检测和定量分析心肌中肠道病毒ＲＮＡ上海医科大学中山医院上海市心血管病研究所彭天庆，杨英珍本研究以同位素Ｓ标记肠道病毒特异的柯萨奇Ｂ－３病毒（ＣＶＢ３）的负股ＲＮＡ为探针作原位杂交对多种心肌石蜡切片进行肠道病毒ＲＮＡ检测，同时结合...