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多种酶体系用于肽类药物体外代谢性质的研究
被引量:
4
1
作者
孙会仙
陈佳
+4 位作者
张淑珍
郭磊
廖沙
谢剑炜
刘克良
《分析化学》
SCIE
EI
CAS
CSCD
北大核心
2006年第U09期54-58,共5页
应用反相高效液相色潜法(RP-HPLC)对肽类药物促黄体激素释放激素(LHRH)、醋酸亮丙瑞林(Leuprorelin Acetate,TAP-144-SR)和新药LXT101在6种酶体系中的体外代谢性质进行了研究。流动相采用梯度或等度洗脱;LHRH、TAP-144-SR的检...
应用反相高效液相色潜法(RP-HPLC)对肽类药物促黄体激素释放激素(LHRH)、醋酸亮丙瑞林(Leuprorelin Acetate,TAP-144-SR)和新药LXT101在6种酶体系中的体外代谢性质进行了研究。流动相采用梯度或等度洗脱;LHRH、TAP-144-SR的检测波长为216nm,LXT101的检测波长为225nm。采用液相色谱-电喷雾质谱(LC-ESI-MS)联用技术对其酶解片段进行了鉴定。LHRH、TAP-144-SR和LXT101的浓度在4.0~400mg/L范围内与其峰面积呈良好线性关系(r〉0.9990);在糜蛋白酶、胰蛋白酶、胃蛋白酶和胰混合酶中的绝对回收率为95.0%~98.7%;在血浆和肝匀浆中的绝对回收率为60.0%~71.0%;日内相对标准偏差(RSD)〈1.5%,日间RSD〈2.5%;半衰期(t1/2)为LXT-101〉TAP-144-SR〉LHRH;质谱鉴定表明:LHRH容易在3-4、5-6位发生断裂,TAP-144-SR容易在3-4位发生断裂;选择的酶体系可用于评价多肽药物的体外代谢性质。
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关键词
肽类药物
反相高效液相色谱
液相色谱-电喷雾质谱
体外酶体系
半衰期
下载PDF
职称材料
体外多酶级联反应体系高效合成莱鲍迪苷M
被引量:
1
2
作者
刘思颖
王斌
潘力
《现代食品科技》
CAS
北大核心
2021年第11期175-184,共10页
为建立体外多酶级联反应体系高效合成莱鲍迪苷M(Rebaudioside M,RM),该文分别构建了含有甜叶菊来源的糖基转移酶UGT76G1和水稻来源的糖基转移酶EUGT11以及拟南芥来源的蔗糖合成酶SUS1的重组大肠杆菌,将甜菊苷经一锅法催化合成RM。为提...
为建立体外多酶级联反应体系高效合成莱鲍迪苷M(Rebaudioside M,RM),该文分别构建了含有甜叶菊来源的糖基转移酶UGT76G1和水稻来源的糖基转移酶EUGT11以及拟南芥来源的蔗糖合成酶SUS1的重组大肠杆菌,将甜菊苷经一锅法催化合成RM。为提升该体系中限速酶EUGT11的酶活,从而提升整个体外多酶级联反应体系的RM产量,本文将该酶表达质粒的T7启动子核心区域串联,并比较一重、二重、三重和四重启动子启动转录时该酶活性,当三重启动子启动转录时,重组酶EUGT11的酶活力最高,是一重启动子启动转录时的2.13倍,在酶活力配比为SUS1:UGT76G1:EUGT11/3 copies of T7=1:2:6.39的体外多酶级联反应体系中,RM产量为3.79 mmol/L,较酶活力配比为SUS1:UGT76G1:EUGT11=1:2:3的体外多酶级联反应体系中,RM的产量提升了2.35倍。该文成功建立了高效合成RM的体外多酶级联反应体系,为此后工业化酶法合成RM提供理论和数据支持。
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关键词
甜菊糖苷
莱鲍迪苷M
糖基转移
酶
EUGT11
多重启动子
体
外
多
酶
级联反应
体系
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职称材料
题名
多种酶体系用于肽类药物体外代谢性质的研究
被引量:
4
1
作者
孙会仙
陈佳
张淑珍
郭磊
廖沙
谢剑炜
刘克良
机构
军事医学科学院毒物药物研究所
出处
《分析化学》
SCIE
EI
CAS
CSCD
北大核心
2006年第U09期54-58,共5页
基金
国家自然科学基金(No.30500629)
北京市科委基础研究基金(No.Z0005187040531)资助项目
文摘
应用反相高效液相色潜法(RP-HPLC)对肽类药物促黄体激素释放激素(LHRH)、醋酸亮丙瑞林(Leuprorelin Acetate,TAP-144-SR)和新药LXT101在6种酶体系中的体外代谢性质进行了研究。流动相采用梯度或等度洗脱;LHRH、TAP-144-SR的检测波长为216nm,LXT101的检测波长为225nm。采用液相色谱-电喷雾质谱(LC-ESI-MS)联用技术对其酶解片段进行了鉴定。LHRH、TAP-144-SR和LXT101的浓度在4.0~400mg/L范围内与其峰面积呈良好线性关系(r〉0.9990);在糜蛋白酶、胰蛋白酶、胃蛋白酶和胰混合酶中的绝对回收率为95.0%~98.7%;在血浆和肝匀浆中的绝对回收率为60.0%~71.0%;日内相对标准偏差(RSD)〈1.5%,日间RSD〈2.5%;半衰期(t1/2)为LXT-101〉TAP-144-SR〉LHRH;质谱鉴定表明:LHRH容易在3-4、5-6位发生断裂,TAP-144-SR容易在3-4位发生断裂;选择的酶体系可用于评价多肽药物的体外代谢性质。
关键词
肽类药物
反相高效液相色谱
液相色谱-电喷雾质谱
体外酶体系
半衰期
Keywords
Peptide drug, reversed phase high performance liquid chromatography, liquid chromatography-electrospray ionization mass spectrometry, enzyme, half-life
分类号
R96 [医药卫生—药理学]
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职称材料
题名
体外多酶级联反应体系高效合成莱鲍迪苷M
被引量:
1
2
作者
刘思颖
王斌
潘力
机构
华南理工大学生物科学与工程学院
出处
《现代食品科技》
CAS
北大核心
2021年第11期175-184,共10页
基金
广东省重点领域研发计划项目(2018B020205002,2020B020226007)
佛山市核心技术攻关项目(1920001000824)。
文摘
为建立体外多酶级联反应体系高效合成莱鲍迪苷M(Rebaudioside M,RM),该文分别构建了含有甜叶菊来源的糖基转移酶UGT76G1和水稻来源的糖基转移酶EUGT11以及拟南芥来源的蔗糖合成酶SUS1的重组大肠杆菌,将甜菊苷经一锅法催化合成RM。为提升该体系中限速酶EUGT11的酶活,从而提升整个体外多酶级联反应体系的RM产量,本文将该酶表达质粒的T7启动子核心区域串联,并比较一重、二重、三重和四重启动子启动转录时该酶活性,当三重启动子启动转录时,重组酶EUGT11的酶活力最高,是一重启动子启动转录时的2.13倍,在酶活力配比为SUS1:UGT76G1:EUGT11/3 copies of T7=1:2:6.39的体外多酶级联反应体系中,RM产量为3.79 mmol/L,较酶活力配比为SUS1:UGT76G1:EUGT11=1:2:3的体外多酶级联反应体系中,RM的产量提升了2.35倍。该文成功建立了高效合成RM的体外多酶级联反应体系,为此后工业化酶法合成RM提供理论和数据支持。
关键词
甜菊糖苷
莱鲍迪苷M
糖基转移
酶
EUGT11
多重启动子
体
外
多
酶
级联反应
体系
Keywords
stevioside
rebaudioside M
UDP-glucosyltransferase EUGT11
mutiple-promoter
multiple-enzyme cascade reactionsystem
分类号
TS201.2 [轻工技术与工程—食品科学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
多种酶体系用于肽类药物体外代谢性质的研究
孙会仙
陈佳
张淑珍
郭磊
廖沙
谢剑炜
刘克良
《分析化学》
SCIE
EI
CAS
CSCD
北大核心
2006
4
下载PDF
职称材料
2
体外多酶级联反应体系高效合成莱鲍迪苷M
刘思颖
王斌
潘力
《现代食品科技》
CAS
北大核心
2021
1
下载PDF
职称材料
已选择
0
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