用发光法测定DnaJ类分子伴侣MRJ对虫荧光素酶体外重折叠的促进作用(英文)

蛋白质的折叠使新翻译合成的多肽变成有生物功能的空间结构 ,因此蛋白质折叠是后基因组时代的重要工作。而在蛋白质折叠过程中 ,必须依靠分子伴侣的相互作用 ,才能保证蛋白质折叠向正确的方向进行。MRJ是一类新发现的DnaJ类分子伴侣 ,已证实它有调节ATP酶活性和阻止多聚谷氨酰胺凝聚的作用。我们用胍变性的虫荧光素酶作为蛋白质恢复功能活性的分子模型 ,用生物发光法研究了MRJ对蛋白质重新折叠的作用 ,发现MRJ确实有促进变性虫荧光素酶重新折叠并恢复其催化活力的功能。而且这种过程需要另一类Hsp6 0和Hsp70的协助 ,而这三种分子伴侣组合在一起 ,功效最好。实验中还发现 ,MRJ对虫荧光素酶恢复的促进作用是与ATP密切相关的。发光分析是研究分子伴侣促进蛋白质折叠过程的一种灵敏、精确和快速的技术手段。