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相互缠结的PMMA/SPS复合水基微乳液的研究 Ⅱ.体系反应前后的粒度分布及形态表征 被引量:1
1
作者 苏伟梁 廖兵 黄玉惠 《高分子材料科学与工程》 EI CAS CSCD 北大核心 2002年第3期159-161,共3页
将聚苯乙烯磺化制成聚苯乙烯离聚体 (SPS) ,利用相反转技术 ,将磺化聚苯乙烯离聚体制成具有纳米级稳定的水基微乳液 ,利用 SPS微粒核为反应场所 ,引发另一单体 MMA聚合 ,制备具有相互缠结结构的 PMMA/ SPS复合水基微乳液。通过粒度分布... 将聚苯乙烯磺化制成聚苯乙烯离聚体 (SPS) ,利用相反转技术 ,将磺化聚苯乙烯离聚体制成具有纳米级稳定的水基微乳液 ,利用 SPS微粒核为反应场所 ,引发另一单体 MMA聚合 ,制备具有相互缠结结构的 PMMA/ SPS复合水基微乳液。通过粒度分布仪、透射电镜等分析仪器对体系反应前后粒径形态、大小变化进行了探讨 ;用 DSC仪器分析了复合材料的玻璃化转变 。 展开更多
关键词 磺化聚苯乙烯 离聚体 相容性 PMMA/SPS复合水基微乳液 研究 体系反应 粒度分布 形态表征
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数字化重症快速反应体系建设探索 被引量:1
2
作者 莫远明 张瑞霖 +2 位作者 王毅 张敦明 余俊蓉 《中国数字医学》 2024年第3期20-25,共6页
目的:建设数字化重症快速反应体系,实现急危重症患者早期识别和干预,保障患者医疗安全。方法:利用物联网、大数据和人工智能等技术,建设重症快速反应信息平台,完善快速反应管理体系。结果:构建急危重症大数据中心、智能预警及快速反应... 目的:建设数字化重症快速反应体系,实现急危重症患者早期识别和干预,保障患者医疗安全。方法:利用物联网、大数据和人工智能等技术,建设重症快速反应信息平台,完善快速反应管理体系。结果:构建急危重症大数据中心、智能预警及快速反应系统、组织管理体系三位一体的重症快速反应体系,为患者提供智慧、同质、高效的医疗服务。结论:重症快速反应体系建设在我国尚处于探索阶段,通过全流程的信息化、数字化管理,切实提高患者医疗安全保障,不断推动构建适合我国医疗高质量发展的重症快速反应体系。 展开更多
关键词 重症快速反应体系 重症快速反应小组 物联网 大数据 人工智能
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木本油料植物无患子SSR特征分析及SSR-PCR反应体系构建
3
作者 周宵 蒋丽娟 +7 位作者 李昌珠 陈韵竹 李培旺 熊宇晴 张路红 盛克寨 杨艳 陈景震 《中国油料作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第1期72-83,共12页
无患子(Sapindus saponaria L.)是集生物柴油、药用、生态等多种用途于一体的经济型木本油料。本研究利用MISA软件挖掘了无患子叶片转录组中的SSR,对搜索到的SSR进行了特征分析,构建并优化了无患子SSR-PCR反应体系。结果表明,无患子叶... 无患子(Sapindus saponaria L.)是集生物柴油、药用、生态等多种用途于一体的经济型木本油料。本研究利用MISA软件挖掘了无患子叶片转录组中的SSR,对搜索到的SSR进行了特征分析,构建并优化了无患子SSR-PCR反应体系。结果表明,无患子叶片转录组共有Unigene条数目为52460条,其中含有SSR的Unigene有7014条,共检索到8654个SSR。经统计,SSR丰富度从二至六核苷酸依次减少,依次有4327、2669、634、208、161个。SSR长度范围在12~250 bp之间,长度小于等于15 bp的有3619个,均为二和三核苷酸;长度大于15 bp的有5035个,以二、三核苷酸居多。所有SSR共有435种不同重复单元。SSR不同类型重复基元频次分布在4~30次之间,主要分布在4~10频次,共有7090个SSR位点,占总频次的89.65%。SSR位点靶基因GO功能注释显示,无患子叶片转录组Unigene可分为3大类别51个小组;KEGG功能注释显示5大类别中,代谢通路占比最高为65.18%。通过对无患子SSR-PCR反应体系构建与优化,无患子SSR-PCR反应体系最佳组合为:循环次数37次、退火温度60℃、引物量2.0μL、DNA模板浓度为40 ng/μL。 展开更多
关键词 木本油料植物 EST-SSR 功能注释 PCR反应体系 生物柴油
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碳水化合物制备5-羟甲基糠醛反应体系研究进展
4
作者 周方圆 刘想 +2 位作者 汪炜琛 朱万斌 王洪亮 《林产化学与工业》 CAS CSCD 北大核心 2024年第3期145-158,共14页
总结了5-羟甲基糠醛(HMF)的主要制备方法及反应机理,并着重对碳水化合物制备HMF的反应体系进行了分类讨论。当前用于碳水化合物转化制备HMF的反应体系,主要有批次反应体系和连续流动反应体系,其中批次反应体系可分为单相反应体系、双相... 总结了5-羟甲基糠醛(HMF)的主要制备方法及反应机理,并着重对碳水化合物制备HMF的反应体系进行了分类讨论。当前用于碳水化合物转化制备HMF的反应体系,主要有批次反应体系和连续流动反应体系,其中批次反应体系可分为单相反应体系、双相反应体系和三相反应体系,连续流动反应体系可分为单相连续流动体系和双相连续流动体系。系统归纳了不同反应体系的特点和研究现状:双相体系可以实时分离HMF,减少副产物生成,在反应相中加入无机盐能显著提高HMF在两相中的分配系数;离子液体或低共熔溶剂作为反应相的制备体系存在如何高效回收和重复利用以降低生产成本的问题;连续流动反应体系在HMF制备中有许多优势,但在规模化生产中仍存在催化剂失活、副产物对系统运行稳定性的影响等问题。最后在分析了目前该领域研究所面临的挑战的基础上,对未来的应用前景和发展方向作了展望,以期为基础研究和产业化应用提供参考。 展开更多
关键词 5-羟甲基糠醛 反应机理 批次反应体系 连续流动反应体系 微波加热
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芦笋SSR-PCR反应体系的优化及验证
5
作者 白扬 仪泽会 《中国瓜菜》 CAS 北大核心 2024年第7期100-106,共7页
以芦笋幼叶为材料,采用单因素与L1(643)正交试验相结合的方法,对影响芦笋SSR-PCR反应的3个因素(2×Taq Master Mix,模板DNA,引物)进行优化,并以此为基础通过退火温度和循环次数试验筛选引物最佳退火温度和循环次数。结果表明,芦笋... 以芦笋幼叶为材料,采用单因素与L1(643)正交试验相结合的方法,对影响芦笋SSR-PCR反应的3个因素(2×Taq Master Mix,模板DNA,引物)进行优化,并以此为基础通过退火温度和循环次数试验筛选引物最佳退火温度和循环次数。结果表明,芦笋基因组DNA的SSR-PCR最优反应体系为:10μL反应体系中,50 ng·μL^(-1) DNA模板0.125μL,10μmol·L^(-1)上下游引物各0.5μL,2×Taq PCR Mix 3μL,灭菌ddH2O 5.875μL。PCR扩增程序为:94℃预变性4 min;94℃变性30 s,60℃退火30 s,72℃延伸35 s,循环25次;72℃延伸10 min,4℃保存。经5对引物组合和5个不同芦笋品种DNA扩增验证,该体系稳定可靠,可用于芦笋遗传多样性分析、种子纯度鉴定、分子标记辅助育种及重要农艺性状的图位克隆等工作。 展开更多
关键词 芦笋 SSR-PCR反应体系 正交设计
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基于真实情境的复杂体系实验探究——以探究Fe^(3+)与S^(2-)的反应为例
6
作者 陈建托 《化学教与学》 2024年第1期94-96,78,共4页
实验探究是北京高考(等级考)的重点考查内容,也是学生学习的难点之一。本文选取FeCl_(3)和Na_(2)S反应的真实情境进行深度探究,重点分析二者发生的氧化还原反应和复分解反应,并从速率和限度视角分析反应之间的竞争,讨论反应方向的简单... 实验探究是北京高考(等级考)的重点考查内容,也是学生学习的难点之一。本文选取FeCl_(3)和Na_(2)S反应的真实情境进行深度探究,重点分析二者发生的氧化还原反应和复分解反应,并从速率和限度视角分析反应之间的竞争,讨论反应方向的简单调控。通过真实情境的实验探究过程,帮助学生形成多视角分析问题的意识,构建解决实验探究问题的高阶思维能力。 展开更多
关键词 实验探究 真实情境 反应体系
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烟草DNA的提取与SRAP反应体系的建立 被引量:66
7
作者 梁景霞 祁建民 +4 位作者 吴为人 周东新 陈顺辉 王涛 陶爱芬 《中国烟草学报》 EI CAS CSCD 2005年第4期33-38,共6页
以10个烟草栽培品种为试验材料,研究了烟草DNA的提取方法以及对建立烟草SRAP-PCR反应体系的影响因子设置梯度实验,筛选和建立可扩增多态性高、重复性好、带型清晰的最佳SRAP-PCR反应条件:在25μL的反应体系中,MgCl22.0mmol、dNTP200μm... 以10个烟草栽培品种为试验材料,研究了烟草DNA的提取方法以及对建立烟草SRAP-PCR反应体系的影响因子设置梯度实验,筛选和建立可扩增多态性高、重复性好、带型清晰的最佳SRAP-PCR反应条件:在25μL的反应体系中,MgCl22.0mmol、dNTP200μmol,上下引物各30ng、DNA模板40ng、DNA聚合酶1.5U,扩增程序为:在94℃预变性5min,反应前5个循环在94℃1min,33℃1min,72℃1min条件下运行;随后的30个循环复性温度提高到53℃,最后72℃延伸5min。本文还讨论了不同分子标记在烟草中应用的优缺点以及SRAP分子标记在烟草上的应用前景,提出了应用SRAP分子标记构建烟草遗传图谱的可行性。 展开更多
关键词 烟草 DNA提取 SRAP反应体系 PCR反应体系 DNA模板 SRAP 提取方法 DNA聚合酶 分子标记 MGCL2
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辣椒SRAP-PCR反应体系的建立与优化 被引量:150
8
作者 任羽 王得元 +2 位作者 张银东 李颖 王恒明 《分子植物育种》 CAS CSCD 2004年第5期689-693,共5页
SRAP标记(Sequence-related amplified polymorphism,序列相关扩增多态性)是由Li和Quiros发展了一种新的分子标记技术。SRAP标记具有简便、稳定、中等产率、在基因组中分布均匀的特点,已经应用于在水稻、棉花、油菜、马铃薯、苹果、柑... SRAP标记(Sequence-related amplified polymorphism,序列相关扩增多态性)是由Li和Quiros发展了一种新的分子标记技术。SRAP标记具有简便、稳定、中等产率、在基因组中分布均匀的特点,已经应用于在水稻、棉花、油菜、马铃薯、苹果、柑橘类果树、樱桃、梅子、大蒜、莴苣及芹菜等植物和水稻稻瘟病的研究中,对开展遗传图谱构建、基因定位与克隆、比较基因组学、cDNA指纹图谱、生物多样性研究、预测杂种优势等研究是一个十分实用的工具。本研究对辣椒SRAP反应体系的程序、模板、Mg2+等参数进行优化研究,结果表明:辣椒的PCR程序为94℃预变性5min,94℃变性1min,35℃复性1min,72℃延伸1min,5循环,94℃变性1min,50℃复性1min,72℃延伸1min,35循环,最后72℃延伸10min;25滋l反应体系中,模板量为15ng,Mg2+为2.0mmol/L。本研究建立的辣椒SRAP体系重复性好、稳定性强。 展开更多
关键词 辣椒 SRAP-PCR反应体系 体系建立 优化技术
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白桦ISSR-PCR反应体系的优化 被引量:27
9
作者 杨传平 潘华 +1 位作者 魏志刚 姜静 《东北林业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第6期1-3,共3页
以白桦基因组DNA为模板,研究了ISSR的影响因素,建立一套适宜于白桦的ISSR优化反应体系及程序.即20μL反应体系中,Mg2+浓度范围为0.5~3.0 mmol·L-1,dNTPs浓度范围为0.10~0.30 mmol·L-1,Taq聚合酶浓度范围为1.0~2.0 U,模板DN... 以白桦基因组DNA为模板,研究了ISSR的影响因素,建立一套适宜于白桦的ISSR优化反应体系及程序.即20μL反应体系中,Mg2+浓度范围为0.5~3.0 mmol·L-1,dNTPs浓度范围为0.10~0.30 mmol·L-1,Taq聚合酶浓度范围为1.0~2.0 U,模板DNA浓度为30~120 ng,同时含有RNA的模板DNA对ISSR扩增也略有影响,引物浓度范围为0.2~0.4 μmmol·L-1.通过梯度PCR测验,确定了适宜的退火温度为49℃.反应程序为:第一个循环基因组DNA经94℃预变性5 min;30个循环为94℃变性30 s,49℃退火30 s,72℃延伸30 s;最后一个循环完成后,在72℃延伸7min. 展开更多
关键词 白桦 ISSR标记 反应体系
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芒果DNA提取方法比较及ISSR反应体系的优化 被引量:47
10
作者 王家保 王令霞 +3 位作者 刘志媛 杜中军 易小平 徐碧玉 《生物技术》 CAS CSCD 2005年第5期37-41,共5页
为从芒果幼叶中提取高质量的核总DNA,比较了5种DNA提取方法提取芒果叶片核DNA的效果,结果表明:改良CTAB法1提取的DNA A260/A280值最好,ISSR-PCR扩增效果最佳,是有效提取芒果基因组DNA的方法。为得到最佳的芒果ISSR-PCR反应体系,以(ATG)... 为从芒果幼叶中提取高质量的核总DNA,比较了5种DNA提取方法提取芒果叶片核DNA的效果,结果表明:改良CTAB法1提取的DNA A260/A280值最好,ISSR-PCR扩增效果最佳,是有效提取芒果基因组DNA的方法。为得到最佳的芒果ISSR-PCR反应体系,以(ATG)6为引物,采用单因素实验法,优化了ISSR-PCR反应体系:在总体积25μl的反应体系中,含1×反应缓冲液,0.20mmol.L-1dNTPs,0.20μmol.L-1引物,0.60 UTaqDNA聚合酶,30-50 ng DNA模板,不足体积用无菌超纯水补足。 展开更多
关键词 芒果 DNA提取 ISSR 反应体系
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杨树ISSR反应体系的建立及正交设计优化 被引量:36
11
作者 汪结明 项艳 +2 位作者 吴大强 孙志娟 蔡诚 《核农学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第5期470-473,513,共5页
采用正交设计的方法,对杨树ISSR-PCR反应中5个因素(Taq酶、Mg2+、模板DNA、dNTP和引物)在4个水平上进行优化试验。建立了适合杨树的既稳定又能扩出最多数量谱带的ISSR-PCR最佳反应体系,即25μl的反应体系中含有1×buffer,0.12mmol/L... 采用正交设计的方法,对杨树ISSR-PCR反应中5个因素(Taq酶、Mg2+、模板DNA、dNTP和引物)在4个水平上进行优化试验。建立了适合杨树的既稳定又能扩出最多数量谱带的ISSR-PCR最佳反应体系,即25μl的反应体系中含有1×buffer,0.12mmol/L dNTP,0.4μmol/L引物,3.5 mmol/L Mg2+,1.5UTaqDNA聚合酶和40ng模板DNA。对杨树ISSR-PCR最佳反应体系的退火温度进行梯度试验,发现引物W95142的最适退火温度为56.1℃,且最适退火温度因引物而异。这一优化的ISSR-PCR反应体系的建立为今后利用ISSR技术进行杨树种质资源分类、遗传图谱构建和基因定位奠定了技术基础。 展开更多
关键词 杨树 ISSR 正交设计 反应体系 优化
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枣树ISSR反应体系的建立及优化 被引量:21
12
作者 刘兴菊 汤新彩 +2 位作者 梁海永 杨敏生 张媛 《西北林学院学报》 CSCD 北大核心 2007年第5期62-65,77,共5页
为建立枣树适宜的ISSR反应体系,以枣树叶片为材料,对ISSR反应体系中的主要影响因子进行了优化。研究了引物浓度、dNTP浓度、TaqDNA聚合酶及退火温度对扩增的影响。结果表明,在25μLISSR体系中各组分的适宜的浓度为:1×PCR buffer,37... 为建立枣树适宜的ISSR反应体系,以枣树叶片为材料,对ISSR反应体系中的主要影响因子进行了优化。研究了引物浓度、dNTP浓度、TaqDNA聚合酶及退火温度对扩增的影响。结果表明,在25μLISSR体系中各组分的适宜的浓度为:1×PCR buffer,375μmol/LdNTP,0.2μmol/L引物,1.5 UTaqDNA聚合酶。不同引物间适宜的退火温度不同。应用该ISSR体系对10个不同品种的枣材料进行了扩增,证实了该体系的适用性和稳定性。 展开更多
关键词 ISSR标记 反应体系
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葛根SCoT-PCR反应体系优化及引物筛选 被引量:19
13
作者 尚小红 严华兵 +4 位作者 曹升 张尚文 谢向誉 王艳 欧昆鹏 《南方农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第1期1-7,共7页
【目的】优化葛根SCoT-PCR反应体系,筛选适用于葛根的SCoT引物,为利用SCoT分子标记进行葛根种质资源鉴定、遗传多样性分析及分子标记辅助育种提供技术支持。【方法】采用正交设计对SCoT-PCR反应体系中的DNA模板量、dNTPs浓度、Mg^(2+)... 【目的】优化葛根SCoT-PCR反应体系,筛选适用于葛根的SCoT引物,为利用SCoT分子标记进行葛根种质资源鉴定、遗传多样性分析及分子标记辅助育种提供技术支持。【方法】采用正交设计对SCoT-PCR反应体系中的DNA模板量、dNTPs浓度、Mg^(2+)浓度、Taq DNA聚合酶量和引物浓度5个因素进行优化,利用最佳SCoT-PCR反应体系筛选出适用于葛根的SCoT引物,并对该体系进行验证。【结果】最佳葛根SCoT-PCR反应体系20.00μL:DNA模板50.00 ng,dNTPs 0.25 mmol/L,Mg^(2+)1.50 mmol/L,引物0.80μmol/L,Taq DNA聚合酶0.50 U。利用该体系从36条SCoT引物中筛选出35条可从葛根中扩增出清晰条带的引物。使用3条引物对18个葛根材料进行PCR扩增,PCR产物表现出良好的重复性、稳定性和丰富的多态性。【结论】建立的最佳葛根SCoT-PCR反应体系和筛选获得的35条SCoT引物可适用于葛根种质资种鉴定、遗传多样性分析、相关分子标记开发等研究。 展开更多
关键词 葛根 SCoT-PCR 反应体系优化 引物筛选
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苹果SSR反应体系的建立 被引量:26
14
作者 徐兴兴 梁海永 +1 位作者 甄志先 杨敏生 《果树学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第2期161-164,共4页
为摸索适宜苹果的SSR反应体系,以金冠苹果为试验材料,研究了苹果SSR技术中PCR反应体系的主要成分对SSR扩增结果的影响。对SSR反应体系中的Mg2+浓度、引物浓度、dNTP浓度、TaqDNA聚合酶浓度、模板浓度以及退火温度进行了探索,确立了适合... 为摸索适宜苹果的SSR反应体系,以金冠苹果为试验材料,研究了苹果SSR技术中PCR反应体系的主要成分对SSR扩增结果的影响。对SSR反应体系中的Mg2+浓度、引物浓度、dNTP浓度、TaqDNA聚合酶浓度、模板浓度以及退火温度进行了探索,确立了适合苹果的SSR反应体系为:在20μL反应体系中,Mg2+、引物和dNTP的最适浓度分别为2.5mmol/L、0.8μmol/L、0.10mmol/L;反应体系中TaqDNA聚合酶宜加入1U,模板DNA应加入15-30ng;引物的最佳退火温度为48.5-52.0℃。并利用该反应体系对10个苹果代表品种进行SSR反应,用8%的非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳检测,不同品种间DNA谱带多态性丰富,证实该体系稳定可靠。 展开更多
关键词 苹果 金冠 SSR反应体系
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果梅SSR反应体系的优化 被引量:43
15
作者 高志红 章镇 +1 位作者 韩振海 沈志军 《南京农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第4期19-22,共4页
以果梅品种小叶猪肝为试材 ,研究了果梅SSR技术中PCR反应体系的主要成分对SSR扩增结果的影响 ,并比较了采用聚丙稀酰胺凝胶及琼脂糖电泳检测扩增产物多态性的差异。结果表明 :在PCR反应体系中 ,Mg2 + 的最适浓度范围为1 89~ 2 83mmol&... 以果梅品种小叶猪肝为试材 ,研究了果梅SSR技术中PCR反应体系的主要成分对SSR扩增结果的影响 ,并比较了采用聚丙稀酰胺凝胶及琼脂糖电泳检测扩增产物多态性的差异。结果表明 :在PCR反应体系中 ,Mg2 + 的最适浓度范围为1 89~ 2 83mmol·L-1;dNTP最适浓度为 0 2 4mmol·L-1;引物的最适浓度为 0 38μmol·L-1;Taq 聚合酶在 2 6 5 μL反应体系中宜加入 1U。利用此反应体系 ,对 2 4个果梅代表品种进行了SSR反应 ,用 8%的非变性聚丙稀酰胺凝胶电泳检测 ,扩增产物在 10 0~ 2 0 0bp之间 ,不同品种间DNA谱带多态性丰富。 展开更多
关键词 果梅 SSR反应体系 优化 简单重复序列
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油茶SRAP-PCR反应体系的建立 被引量:18
16
作者 吴莺莺 彭方仁 +2 位作者 郝明灼 陈隆升 陈永忠 《南京林业大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2011年第5期112-116,共5页
以油茶品种大别山2号和赣兴46为试验材料,利用Me5Em8正反向引物组合进行了SRAP-PCR反应体系的L9(34)正交试验,采用正交设计直观分析及方差分析对影响SRAP反应的Taq聚合酶、Mg2+、dNTP和引物浓度进行分析,并对模板DNA浓度进行了单因素试... 以油茶品种大别山2号和赣兴46为试验材料,利用Me5Em8正反向引物组合进行了SRAP-PCR反应体系的L9(34)正交试验,采用正交设计直观分析及方差分析对影响SRAP反应的Taq聚合酶、Mg2+、dNTP和引物浓度进行分析,并对模板DNA浓度进行了单因素试验分析。结果表明,油茶SRAP-PCR 20μL反应体系的最佳组合为:Taq聚合酶1.20μmol/min、Mg2+浓度1.25 mmol/L、dNTP浓度0.15 mmol/L、Primer浓度0.60μmol/L、模板DNA含量60 ng,并含有2μL 10×buffer(Mg2+free)。各因素对油茶SRAP-PCR反应的影响大小依次为:dNTP、Mg2+、Taq聚合酶、Primer。 展开更多
关键词 油茶 SRAP 反应体系 正交设计
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油茶SRAP-PCR反应体系的建立和优化 被引量:16
17
作者 孙佩光 奚如春 +2 位作者 钮世辉 骈瑞琪 陈晓阳 《基因组学与应用生物学》 CAS CSCD 北大核心 2010年第6期1192-1199,共8页
为了建立油茶SRAP-PCR扩增体系,本研究使用单因素试验设计,对反应体系的Taq酶、Mg2+、模板DNA、dNTP和引物浓度5个主要影响因子各设10个不同的水平梯度,筛选出适宜的因子范围;在此基础上,进一步采用L16(45)正交设计,对影响油茶SRAP-PCR... 为了建立油茶SRAP-PCR扩增体系,本研究使用单因素试验设计,对反应体系的Taq酶、Mg2+、模板DNA、dNTP和引物浓度5个主要影响因子各设10个不同的水平梯度,筛选出适宜的因子范围;在此基础上,进一步采用L16(45)正交设计,对影响油茶SRAP-PCR反应体系的5个因素在4水平上进行优化,建立了油茶SRAP-PCR最佳反应体系,即25μL体积中包含模板DNA30ng,Mg2+2.8mmol/L,引物0.44μmol/L,dNTP0.2mmol/L和Taq酶1.0U。该SRAP-PCR体系的建立为油茶种质资源遗传多样性分析、品种鉴定及指纹图谱构建等研究提供了一个标准化的程序。 展开更多
关键词 油茶 SRAP-PCR 反应体系 正交设计
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油松SSR-PCR引物筛选及反应体系的建立 被引量:17
18
作者 张冬梅 杨娅 +1 位作者 沈熙环 茹广欣 《北京林业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第2期13-17,共5页
油松是我国特有的重要乡土针叶树种,开发合适的油松PCR-SSR引物并建立优化的反应体系,是开展油松天然群体和种子园人工群体遗传研究的基础.该研究以油松总DNA为材料,分析了Taq聚合酶、样本浓度、Mg^2+浓度、dNTP浓度以及引物浓度对... 油松是我国特有的重要乡土针叶树种,开发合适的油松PCR-SSR引物并建立优化的反应体系,是开展油松天然群体和种子园人工群体遗传研究的基础.该研究以油松总DNA为材料,分析了Taq聚合酶、样本浓度、Mg^2+浓度、dNTP浓度以及引物浓度对PCR-SSR扩增结果的影响,筛选出扩增条带清晰、多态性丰富的SSR引物12对,建立了稳定的、可重复的油松PCR-SSR最佳反应体系及PCR扩增参数.研究结果表明:在15pLSSR-PCR反应体系中,样本最适宜浓度为30ng,Mg^2+的最适浓度为0.25mmol/L,dNTP最适浓度为0.2mmog/L,单引物的最适浓度均为250nmol/L;Taq聚合酶在15止反应体系中宜加入0.375U.统计利用所选12对引物,对辽宁兴城油松种子园内49个建园无性系进行了SSR-PCR反应,通过6%的变性聚丙稀酰胺凝胶电泳检测,每对引物扩增产物在100—250bp之间的等位谱带数最大为10,最小为5,不同无性系间DNA谱带多态性丰富,油松SSR-PCR引物筛选及反应体系的建立,为今后利用SSR标记技术开展油松种子园的父本分析及选择性受精研究提供了一个标准化程序和强有力的工具. 展开更多
关键词 油松 SSR标记 引物 反应体系 优化
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荔枝SRAP-PCR反应体系的优化 被引量:11
19
作者 昝逢刚 吴转娣 +3 位作者 曾淇 张惠云 李明芳 郑学勤 《基因组学与应用生物学》 CAS CSCD 北大核心 2009年第1期132-136,共5页
SRAP(sequence-related amplified polymorphism)是基于基因的内含子和外显子区域进行检测的新型分子标记技术,具有多态性高、重复性好、易测序、便于克隆目标片段等特点,在荔枝(Litchi chinensis Sonn)中还没有相关的研究报道。为了建... SRAP(sequence-related amplified polymorphism)是基于基因的内含子和外显子区域进行检测的新型分子标记技术,具有多态性高、重复性好、易测序、便于克隆目标片段等特点,在荔枝(Litchi chinensis Sonn)中还没有相关的研究报道。为了建立适合荔枝的SRAP反应体系,对反应体系中的DNA模板、Mg2+、dNTP、引物、Taq DNA聚合酶诸因子的用量进行了探索,确立了适合荔枝的SRAP反应体系为:在20μL反应体系中,模板DNA为40ng,Mg2+浓度2.5mmol/L,dNTP0.3mmol/L,引物5mmol/L,Taq DNA聚合酶1.0U。扩增程序为:94℃预变性3min,反应前5个循环在94℃ 1 min、35℃ 1 min、72℃ 1 min的条件下运行;随后的35个循环退火温度提高到50℃;最后72℃延伸10min。利用该反应体系对荔枝10个不同品系进行SRAP反应,用5%的变性聚丙烯酰胺凝胶电泳检测,结果显示:不同品系间DNA谱带多态性丰富。证实该体系稳定可靠,可以用于荔枝的分子标记研究。 展开更多
关键词 荔枝 SRAP-PCR反应体系 优化
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蜜蜂DNA提取纯化与RAPD反应体系的建立 被引量:14
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作者 颜伟玉 谢宪兵 +1 位作者 饶波 曾志将 《江西农业大学学报》 CAS CSCD 2003年第5期783-786,共4页
以意大利蜜蜂为材料,研究了蜜蜂DNA的提取以及对RAPD分析的影响因素,包括模板浓度、Mg2+、dNTP和引物,建立了适于蜜蜂RAPD分析的PCR反应体系,即20μL反应体系中,包括10mmol/LTris-HCl(pH8.3)、50mmol/LKCl、20~60ngDNA、3.0mol/LMgCl2... 以意大利蜜蜂为材料,研究了蜜蜂DNA的提取以及对RAPD分析的影响因素,包括模板浓度、Mg2+、dNTP和引物,建立了适于蜜蜂RAPD分析的PCR反应体系,即20μL反应体系中,包括10mmol/LTris-HCl(pH8.3)、50mmol/LKCl、20~60ngDNA、3.0mol/LMgCl2、0.2mmol/LdNTP、0.5μmol/L随机引物和1.5unitTaq聚合酶。扩增程序为:94℃预变性5min,94℃变性1min,36℃退火1min,72℃延伸2min,40个循环;最后在72℃延伸10min。 展开更多
关键词 蜜蜂 DNA 提取 纯化 RAPD 反应体系
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