挪威云杉及杂种落叶松稳定胚性细胞系及体胚再生系统的建立(英文)

本文报道了挪威云杉 (Piceaabies)和杂种落叶松 (Larixdeciduas×L .kaempferi)人工授粉种子诱导胚性细胞系及植株的再生。挪威云杉在德国SaxonOre山区被选为对空气污染有抗性的树种并种植在位于Waldsieversdorf的林木遗传育种研究所的种植园中。对挪威云杉测试了几个不同亲本组合的种子形成胚性细胞系的能力。这些云杉种子于 1992 0 1采收 ,含有干燥的成熟合子胚。作为对照 ,相同的亲本组合云杉种子于1993 0 8和 1998 0 8采收 ,合子胚处于成熟中。杂种落叶松则只有一个人工授粉组合 ,大田试验证实幼苗生长良好。分别于 1995和 1996年采收含有未成熟合子胚的未成熟种子。诱导愈伤形成用附加细胞分裂素 (激动素和 或BAP)和生长素 (NAA ,2 ,4 D)及有机氮源 (水解酪蛋白和谷氨酰胺 )的标准培养基 (SPE和MSG) ,于黑暗下培养。尽管在建立培养体系后 5～ 12周产生了大量胚性愈伤组织 ,诱导率超过 2 5 % ,但 1a后只有超过1%的胚性愈伤组织稳定生长。挪威云杉稳定胚性细胞系的数量与成熟合子胚的采收季节及建立细胞系的时间 (8月或 1月 )无关 ,但在 8月收获的合子胚在挪威云杉 5～ 12周后胚性愈伤组织诱导率要高些 ,然而能在悬浮培养中生长及随后成熟体胚能顺利再生植株的稳定胚性细胞系的数量有限。