中华五角海星体腔液蛋白质分离技术初探

运用聚丙烯酰胺凝胶电泳方法分析中华五角海星体腔液蛋白组分,探究低丰度蛋白样品的初步分离鉴定方法。研究结果表明,中华五角海星体腔液部分蛋白含量处于凝胶电泳的最小检测浓度范围。通过简易样品浓缩处理、上样前样品处理及电泳缓冲液选择等条件优化,实现了对此类量少,低丰度样品良好的分离效果。

可口革囊星虫体腔液蛋白质的提取及其抗氧化活性研究

文章探究了可口革囊星虫(Phascolosoma esculenta)体腔液蛋白质的抗氧化性及其与二级结构之间的关系。以可口革囊星虫体腔液为材料,用超滤分级分离,乙醇沉淀法对其蛋白质组分进行提取。通过羟基自由基清除率、总还原力及1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH)自由基清除率等指标测定蛋白质的抗氧化性;采用傅里叶红外色谱酰胺I带光谱分峰拟合得出抗氧化蛋白质的二级结构,分析其抗氧化性和二级结构的关系。结果表明:超滤后醇沉所得分子质量<10 ku(Phascolosoma esculenta proteinⅠ,PEPⅠ)、10~30 ku(PEPⅡ)、30~50 ku(PEPⅢ)、50~100 ku(PEPⅣ)、>100 ku(PEPⅤ)5个组分粗蛋白,对羟基自由基的半数清除浓度(IC_(50))分别为3.327、1.637、5.210、6.733、0.998 mg/mL,对DPPH自由基的半数清除浓度(IC_(50))分别为12.719、5.581、9.063、11.934、2.801 mg/mL,总还原力半数清除浓度(IC_(50))分别为6.760、3.700、7.730、10.034、1.461 mg/mL。其中抗氧化性较强的2个组分,PEPⅡ二级结构的含量组成为β-折叠(40.29%)>β-转角(36.21%)>α-螺旋(23.50%)>无规卷曲(0%),PEPⅤ二级结构的含量组成为β-转角(38.28%)>α-螺旋(21.74%)>无规卷曲(20.54%)>β-折叠(19.44%)。推测β-折叠与羟基自由基清除率有较大关系,无规卷曲、β-转角与DPPH自由基清除率、总还原力有较大关系。综上所述,可口革囊星虫体腔液蛋白质有较好的抗氧化性。