精子顶体酶活性在男性生殖中的价值研究进展

据报道,全球有8%~12%的育龄夫妇受到不孕不育症的影响,其中男性因素约占50%的主要原因或促成因素。男性生育能力低下,包括先天性、后天性和特发性因素,这些因素可能会损害精子发生。近年来,精子顶体酶已成为男性不育领域的一研究热点。相关研究发现,精子中的顶体酶可能在精子受精和胚胎发育中起重要作用,精子顶体酶活性作为潜在的精子质量以及男性生殖生物标志,不仅为男性不育的评估开辟了新的视角,也为预测辅助生殖治疗结局提供了一定参考。本文主要从精子顶体酶的功能作用、影响因素及其辅助生殖治疗等方面,综述精子顶体酶活性与男性不育的相关性研究进展,以进一步阐明顶体酶活性在男性不育症诊断中的临床价值。

男性不育患者精子线粒体膜电位及顶体酶活性检测研究

目的:探讨男性不育患者精子线粒体膜电位(MMP)及顶体酶活性检测研究。方法:选取2022年7月—2023年7月赤峰学院附属医院收治的102例男性不育患者为研究组,并依据实际情况分为弱畸精子症组、弱精子症组、畸精子症组,各34例;同时选取102例健康男性作为对照组。各组均进行顶体酶活性检测以及精子线粒体膜电位检测,对比检测结果。结果:相较于对照组,研究组的顶体酶活性、MMP更低,差异有统计学意义(P<0.05)。与弱精子症组相比,畸精子症组的MMP明显降低,弱畸精子症组的MMP、顶体酶活性显著降低,差异有统计学意义(P<0.05);与畸精子症组相比,弱畸精子症组顶体酶活性明显降低,差异有统计学意义(P<0.05)。相较于对照组,研究组的正常形态精子百分率(PNM)、精子向前运动率(PFM)更低,差异有统计学意义(P<0.05)。与弱精子症组相比,畸精子症组、弱畸精子症组的PNM显著降低,差异有统计学意义(P<0.05);与畸精子症组相比,弱畸精子症组PFM、PNM明显降低,差异有统计学意义(P<0.05)。研究组的MMP、顶体酶活性与PFM、PNM之间呈正相关性(P<0.05)。结论:在男性生育能力诊断中,顶体酶活性以及MMP检测的价值较高,检测结果和精子形态、活动力密切相关,是评定男性不育患者精子质量的重要检测指标。

获能处理对猪精子质量及泛素对顶体酶抑制剂水平调控的影响

【目的】探究猪精子体外获能前后顶体酶抑制剂(AI)表达量以及AI的泛素化水平的变化,了解AI与泛素-蛋白酶体系统(UPS)间的联系,为深入研究泛素-蛋白酶体途径(UPP)在猪精子获能过程中的作用提供参考。【方法】选择18~24月龄的成年健康长白公猪,使用手握法采集公猪精液,将一部分精子进行获能处理,一部分作为对照(鲜精),使用计算机辅助精子分析系统(CASA)、低渗肿胀法(HOST)、考马斯亮蓝染色、Western blotting和锌离子(Zn2+)标记检测获能前后精子的动力学参数、质量参数、酪氨酸磷酸化水平和Zn2+含量;Western blotting检测获能前后精子中AI和泛素(Ub)的表达量;免疫荧光法检测AI和Ub在精子中的定位;免疫共沉淀分析AI和Ub的结合情况。【结果】与新鲜精子相比,获能精子动力学参数VSL和BCF极显著升高(P<0.01),获能精子的活力、质膜完整性、顶体膜完整性、活率均极显著降低(P<0.01);获能精子蛋白酪氨酸磷酸化水平极显著升高(P<0.01),Zn2+极显著外流(P<0.01)。Western blotting检测结果表明,与新鲜精子相比,获能精子AI表达量极显著降低(P<0.01),Ub表达量显著升高(P<0.05);免疫荧光结果表明,AI和Ub均定位于精子头部顶体区域;免疫共沉淀分析结果显示,获能精子AI发生了泛素化,在抑制泛素激活酶(E1)后,泛素化的AI极显著减少(P<0.01)。【结论】在猪精子体外获能期间,精子蛋白酪氨酸磷酸化水平极显著提高、泛素化水平增强,且AI被降解,从而释放有活性的顶体酶,为后续精子穿透透明带(ZP)与卵母细胞结合完成受精做准备。

抗精子抗体对精子顶体酶活性的影响

本文旨在观察抗精子抗体对精子顶体酶活性的影响。选择男性不育者50例与正常生育者20例，采用固相酶染色法测抗精子抗体，以固定明胶薄膜法测精子顶体酶活性。结果发现50例不育者抗精子抗体阳性率为52％。不育者精子顶体酶活性明显低于生育者；抗精子抗体阳性者须体酶活性明显低于阴性者，表明抗精子抗体可降低精子顶体酶活性。

精子顶体酶活性定量检测与男性不育病例分析

目的探讨精子顶体酶活性定量与男性不育的关系。方法 2011年7月至9月395例男性不育患者进行精子顶体酶活性定量检测。结果部分精液常规检测正常,但精子顶体酶活性定量异常;少弱精子症患者顶体酶活性定量异常比率相对高。结论顶体酶活性定量是判断男性精子功能和生育力强弱的重要评价指标之一。

精索静脉曲张患者术前、后精子顶体酶活性研究

目的 探讨精索静脉曲张患者在精索静脉高位结扎术前、后精子顶体酶活性(SAA)的变化。方法 用改良的Kennedy法测定术前和术后6～8个月精子顶体酶活性。结果 精索静脉高位结扎术后患者的精子顶体酶活性较术前明显增高(P<0.01)。结论 精索静脉高位结扎术后精索静脉曲张患者精液质量如精子顶体酶活性得到明显的提高。

精子DNA损伤、核蛋白组型转换与顶体酶活性及精液参数的相关性分析

目的:探讨精子DNA损伤、精子核蛋白组型转换与顶体酶活性及精液参数的相关性。方法:收集535例精液标本,采用精子染色质扩散(sperm chromatin dispersion,SCD)检测精子DNA损伤,并与精子核蛋白组型转换、顶体酶活性和WHO手册(第4版)精液参数进行相关性分析。结果:精子DNA损伤与精子核蛋白组型转换、顶体酶活性、精子浓度及前向运动精子这些指标之间比较均具有显著性差异(P<0.01);精子DNA损伤与年龄、核蛋白组型转换、精子浓度和D级精子比例之间呈显著正相关(P<0.01或P<0.05),而与顶体酶活性呈显著负相关(P<0.001),多元逐步回归分析显示年龄、精子浓度、D级精子比例、核蛋白组型转换及顶体酶活性是5个独立的相关变量。精子核蛋白组型转换、顶体酶活性、精子密度和前向运动精子这4个指标的异常率在精子DNA异常组(DFI≥30%)中均显著的高于正常组(DFI<30%)。结论:精子DNA损伤与精子核蛋白组型转换、顶体酶活性及WHO(第4版)精液各参数之间存在密切的联系,可能是评价精子质量的另一项重要的指标。

精子顶体酶检测对不明原因不孕夫妇助孕治疗方案选择的临床意义

目的:探讨精子顶体酶检测对不明原因不孕(UI)夫妇选择助孕治疗方案的临床意义。方法:回顾性分析2013年1月至2015年12月诊断为UI,并经3次宫腔内人工授精(IUI)治疗失败改行体外受精-胚胎移植(IVF-ET)助孕的49对夫妇共49个周期的临床资料,并对比分析同期因输卵管阻塞因素行常规IVF治疗的95对夫妇的131个周期的临床资料,比较两组实验室数据、临床结局和顶体酶活性差异;进一步根据UI夫妇男方精子顶体酶活性将UI组分成2个亚组:<36 IU/106精子组共20个周期,≥36 IU/106精子组共29个周期,比较两亚组之间受精率的差异。结果:1行IVF-ET治疗的UI夫妇,比同期因输卵管阻塞行常规IVF的夫妇受精率显著下降(67.0%vs 76.4%,P<0.05),补救性卵细胞胞质内单精子注射(ICSI)率高于输卵管因素组(20.4%vs 6.1%,P<0.05);成熟卵母细胞比例(MII卵率)、可利用胚胎率、优胚率、种植率、临床妊娠率两组差异无统计学意义(P>0.05)。2UI组中位精子顶体酶活性低于输卵管因素组(36.03 IU/106精子vs 61.98 IU/106精子,P<0.01),UI组中顶体酶活性<36 IU/106精子亚组的受精率明显低于顶体酶活性≥36 IU/106精子亚组的受精率(47.7%vs80.3%,P<0.01)。结论:1UI夫妇男方精子顶体酶活性低下导致的受精率低,可能是造成女性不孕的主要原因和潜在因素。2鉴于UI夫妇男方精子顶体酶活性<36 IU/106精子时受精率较低,建议不采用IUI治疗,可选择IVF+短时受精联合早期补救ICSI治疗。

顶体酶活性对体外受精-胚胎移植结局的影响

目的:探讨精子顶体酶活性对体外受精-胚胎移植(IVF-ET)结局的影响。方法:选择909对在本院生殖中心就诊的不孕夫妇,其中女方检查为正常或仅为输卵管因素不孕。采用改良巴氏法染色和Na-苯甲酰-DL-精胺酸-P-硝酰基苯胺(BAPNA)法分别对丈夫的精液进行精子形态学分析和精子顶体酶活性测定。结果:顶体酶异常组中各项精液参数,包括正常形态精子百分率、精子活动率、活动力、快速前向运动精子百分率及精子密度均显著低于顶体酶正常组(P<0.01);顶体酶活性与精液常规分析上述各参数之间存在非常显著的正相关(P<0.01);两组间取卵数、卵裂率、优质胚胎率、胚胎冷冻率、无可移植胚胎周期百分率、胚胎移植数和流产率均无显著性差异(P>0.05);顶体酶正常组的受精率、仅一个胚胎移植的周期百分率、着床率及临床妊娠率均明显高于顶体酶异常组(P<0.01)。结论:顶体酶活性异常与精液常规分析各主要参数的异常密切相关,可导致体外受精率显著下降。顶体酶活性检测在IVF结局预测中起着重要作用。

精子DNA碎片率及顶体酶活性对男性不育的诊断价值

【目的】探讨精子DNA碎片率与顶体酶活性检测对男性不育的诊断价值。【方法】回顾性分析近三年前来本院就诊的902例男性患者的精液常规参数及精子DNA碎片率和顶体酶活性水平。【结果】按DNA碎片率水平将所有患者分为4组(≤10%,11~20%,21~30%,≥31%),各组患者的年龄、精子浓度、精子总活力、前向运动率以及顶体酶活性存在统计学差异;按精子顶体酶活性正常与否将患者分为两组后,两组间精子浓度、精子总数、精子总活力、前向运动率、正常形态率、畸形精子指数、DNA碎片率均有统计学差异。相关性分析显示,DNA碎片率与精子浓度、精子活力、前向运动率、精子总数及顶体酶活性呈负相关关系,与畸形精子指数呈正相关关系;顶体酶与精子浓度、精子活力、前向运动率、精子总数、正常形态率呈正相关关系,与头部异常率、畸形精子指数、DNA碎片率负相关。【结论】精子DNA碎片率及顶体酶活性水平均可以在一定程度上反映精子参数水平,其中DFI更能反映精子活力水平,顶体酶活性则与精子形态更为相关。两者都是精子质量评估更为客观而全面的指标。

不同运动方式和时间对大鼠骨骼肌线粒体呼吸链复合体酶Ⅰ和Ⅳ活性的影响

背景:急性剧烈运动对机体可造成氧化应激,线粒体生成活性氧造成机体氧化应激和钙离子超负荷,导致骨骼肌功能下降,机体产生疲劳。然而长期规律运动后线粒体产生适应性变化,从而起到保护机体免受过多活性氧损害的作用。目的:观察不同运动方式和时间对大鼠骨骼肌线粒体呼吸链复合体酶Ⅰ,Ⅳ活性的影响。方法:48只健康雄性SD大鼠随机等分为正常对照组、无氧运动组、有氧运动组和交替运动组。在大鼠运动2,4,6周的时候分别处死,差速离心提取大鼠骨骼肌线粒体,分光光度法测定线粒体呼吸链复合体酶Ⅰ,Ⅳ的活性。结果与结论:运动后有氧组、交替组与无氧组线粒体呼吸链复合体酶I的活性随时间先增强而后下降;运动后有氧组与交替组线粒体呼吸链复合体酶Ⅳ的活性随时间而增强,无氧组则下降。说明有氧运动在中长期耐力运动中可有效提高大鼠体内呼吸链复合体酶Ⅰ,Ⅳ的活性,而无氧运动则只能在短期内提高其活性,长时间无氧运动可能导致对线粒体呼吸链复合体酶的损伤,影响骨骼肌工作效率,造成机体疲劳。

禁欲时间对人精子顶体酶活性精子密度和精子数的影响

目的:了解禁欲时间对人精子顶体酶活性、精子密度和精子数的影响。方法:分光光度比色法测定精子顶体酶活性。结果:禁欲1～5d时,顶体酶活性是稳定的,而禁欲10d时顶体酶活性明显下降,与禁欲1d时顶体酶活性比较差异有显著性(P<0.05)。精子密度和精子数随禁欲时间增加而增加,禁欲10d精子密度约为禁欲1d精子密度2倍,禁欲10d精子总数约为禁欲1d的4倍。结论:禁欲时间影响顶体酶活性、精子密度和精子数。

左卡尼汀对精子顶体酶活性低下男性不育患者的疗效分析

目的:观察左卡尼汀(LC)治疗精子顶体酶活性低下男性不育患者的疗效。方法:收集精子顶体酶活性低于正常值的男性不育患者212例,随机分为两组,治疗组口服LC 1. 0 g/次,3次/d;对照组给予维生素E软胶囊100 mg/次,3次/d,连续用药3个月。治疗前后分别检测精液常规参数与精子顶体酶活性。根据精液常规分析结果,将治疗组进一步分为少精子症组、弱精子症组和正常组。结果:治疗组中,与治疗前相比,治疗后前向运动精子百分率(PR%)明显提高[(36. 35±1. 26)%vs (32. 58±1. 13)%,P <0. 05],精子顶体酶活性显著提高[(58. 61±1. 93)μIU/106精子vs (37. 05±0. 66)μIU/106精子,P <0. 01]。而在对照组中,治疗后精子浓度、PR%、顶体酶活性较治疗前都有提高,但无显著差异。将治疗组进一步分组分析,治疗后少精子症组精子浓度较治疗前显著增高[(21. 82±4. 21)×106/ml vs (11. 27±0. 73)×10~6/ml,P <0. 01],弱精子症组PR%较治疗前显著提高[(29. 81±1. 88)%vs (20. 61±0. 85)%,P <0. 01],精子顶体酶活性弱精子症组较正常组和少精子症组提高更加显著[(60. 85±3. 04)μIU/106精子vs (56. 32±2. 86)、(57. 09±6. 31)μIU/106精子,P <0. 05]。结论:口服LC可以有效改善精子的顶体酶活性,且对弱精子症患者效果更明显。

精子形态与顶体酶活性关系分析

目的探讨精子形态与精子顶体酶活性的关系。方法对268例男性不育患者采用改良Kennedy法测定顶体酶活性,采用改良巴氏染色法分析精子形态,以正常形态精子率大于或等于15%为正常组,正常形态精子率小于15%为异常组。结果正常组顶体酶活性高于异常组顶体酶活性,差异无统计学意义(P=0.05);正常组正常形态精子率及头部畸形率与顶体酶活性不相关(P>0.05);异常组正常形态精子率与顶体酶活性存在正相关(r=0.39,P<0.01),头部畸形率与顶体酶活性存在负相关(r=-0.352,P<0.01)。结论精子形态可影响顶体酶活性。

原因不明男性不育精子超微结构与顶体酶关系的研究

目的 研究原因不明不育男性精子超微结构与顶体酶活性之间的关系。方法 利用透射电镜和明胶底物膜技术对 12例原因不明男性不育患者和 10例有生育力男性精子超微结构和顶体酶活性关系进行对比观察。结果 正常生育组顶体酶活性阳性反应率高于男性不育组 ( P<0 .0 5 ) ,并且前者顶体酶活性反应较后者强 ,但两者间无显著性差异 ( P>0 .0 5 )。电镜观察 :不育组精子顶体膜受损程度、脱落的生精细胞以及胞质残体均高于正常生育组。

217例男性不育症精子顶体酶检测与分析

目的 研究人精子顶体酶与男性不育之间的关系。 方法 2 1 7例不育男性 ,年龄 2 4～ 43岁 ,根据精液常规检查结果分为不育 A、B两组 ;46例生育男性为对照组。手淫留取精液标本 ,常规洗涤后孵育 ,采用固定明胶底膜法检测精子顶体酶。 结果 正常生育组的精子顶体酶活性阳性率为 86.5% ,酶活性亮区直径为 42 .9μm。不育 A组酶活性阳性率为 57.0 % ,酶活性亮区直径为 3 8.5μm。不育 B组酶活性阳性率为3 5.2 % ,酶活性亮区直径为 2 7.5μm。经统计学处理 ,生育组与不育组之间精子顶体酶阳性率差异有显著性 ( P<0 .0 1 )。 结论 顶体酶阳性率和活力低下是男性不育的一个重要原因 。

菟丝子对弱精子症体外精子膜功能及顶体酶活性的影响

目的通过观察不同浓度菟丝子对弱精子症体外精子膜功能及精子顶体酶活性的影响,探讨菟丝子治疗弱精子症的作用机制。方法将60例弱精子症精液与不同浓度菟丝子(5%、10%、15%、20%、25%)共同孵育,对照组采用quinn's1020液,观察菟丝子在不同时间对人精子的运动功能、精子尾部膜功能、精子顶体酶活性及精子形态的影响。结果 15%菟丝子制备液组在60 min较对照组能显著提高弱精子症患者体外精子活力a级(19.07%vs10.34%)、b级(20.64%vs14.99%)、精子活率(43.93%vs31.01%)及精子尾部肿胀率(50.4%vs35.7%)和精子顶体酶活性(74.83μIU/106vs52.11μIU/106)精子,(P<0.01),精子畸形率则无统计学差异(P>0.05)。结论适宜浓度菟丝子在有效的时间内能明显改善弱精子症患者精子运动功能、精子尾部膜功能及精子顶体酶活性。

顶体酶活性与精子质量的关系

目的研究男性不育患者精子顶体酶活性与精子质量的相关性。方法研究中选择正常生育者,12例作为对照组;不明原因不育患者,10例;精液异常患者,19例作为研究对象,分光光度比色法检测顶体酶活性。结果顶体酶活性与精子密度、正常形态精子率、a+b级精子活力呈显著正相关,与头部畸形呈负相关性;正常生育者的顶体酶活性与精液常规正常不育者的顶体酶活性相比有显著性差异(P<0.05);正常生育者的顶体酶活性与精液异常者的顶体酶活差异性有显著性(P<0.01)。结论精子顶体酶活性与精液参数存在一定相关性,顶体酶活性与正常形态精子率显著正相关,顶体酶活性是评定男性生育能力的重要指标之一,尤其对不明原因不育患者检测顶体酶活性有重要的临床意义。

精子顶体酶活性与精液有关参数的研究

目的分析精子顶体酶活性与精液有关参数变化,探讨精子顶体酶活性对男性不育的影响。方法对214例精液标本作精子顶体酶活性、弹性硬蛋白酶、果糖、α-葡萄糖苷酶、锌、酸性磷酸酶、精子尾部低渗肿胀试验检测,同时用WLJY-9000伟力彩色精子质量检测仪作精液分析。以精子顶体酶活性正常的精液作为对照组,以精子顶体酶活性异常的精液作为观察组,并对两组参数进行比较。结果214份精液标本,精子顶体酶活性正常111例,异常103例。对照组在精子密度、精子活动率、a+b级精子百分率、精子尾部低渗肿胀试验均明显优于观察组(P<0.001),弹性硬蛋白酶、果糖、α-葡萄糖苷酶均明显优于观察组(P<0.05),精液量、锌、酸性磷酸酶无差别(P>0.05)。结论精子顶体酶活性与精液有关参数关系密切,精子顶体酶活性降低将能引起男性不育。

男性不育者精液中一氧化氮和顶体酶、透明质酸酶、酸性磷酸酶的变化

目的探讨男性不育者精液中一氧化氮(NO)和顶体酶(ACE)、透明质酸酶(HYD)、酸性磷酸酶(ACP)的变化。方法参照世界卫生组织(WHO)标准方法进行精液常规分析,按精子密度、活动率不同分组。采用镀铜镉还原荧光法检测NO代谢产物硝酸盐(NO3-);用改良的Kennedy法检测精子ACE活性;用Singer法测定HYD活性;采用磷酸苯二钠法检测ACP。结果72例不育各组NO含量明显高于正常生育组(P<0.01),而ACE、HYD、ACP活性则明显低于正常生育组(P<0.01),随精子密度、活动率减少和畸形率增高而NO含量升高,ACE、HYD、ACP活性降低。结论精液酶类是评价精子成熟、活动率及穿卵受精能力的重要指标,NO对精子酶活性有抑制灭活作用,可影响精子的受精能力,对男性不育的诊断治疗具有重要价值。