微波辅助提取余甘多糖的工艺研究

余甘多糖具有清除自由基、抗氧化和抗肿瘤的生物活性,但对余甘多糖提取工艺的研究报道较少。该文采用微波前处理-热水浸提新工艺提取余甘多糖,通过单因素和正交实验研究了微波时间、微波功率、热水浸提温度和浸提时间对余甘多糖得率的影响。结果表明,多糖得率的主要影响因素及其顺序为:热水浸提温度、热水浸提时间、微波时间、微波功率。在所考察试验范围内,余甘多糖的最佳提取工艺条件为:微波时间60s、微波功率480W、热水浸提温度90℃、热水浸提时间4h,在此条件下,余甘多糖得率为7.94%。

余甘多糖绿色合成纳米银复合粒子的制备及响应面优化

为了优化绿色合成的余甘多糖制备纳米银复合粒子的制备,以余甘多糖为还原剂和稳定剂,将AgNO_3中的Ag+还原为纳米级别的银单质。以AgNPs对金黄色葡萄球菌的抑菌圈为响应值,研究AgNO_3与多糖体积比、NaCl体积、紫外照射时间对AgNPs制备工艺的影响,根据Box-Benhnken中心组合实验的原理采用三因素三水平的分析方法确定最佳工艺。研究结果表明:绿色合成的AgNPs粒子对金黄色葡萄球菌有显著的抑菌效果,最终确定最优AgNPs制备条件为:AgNO_3与多糖体积比2∶1(m L/m L)、NaCl体积为1.5 m L、紫外照射时间为1h,测得抑菌圈直径大小为2.79±0.01 cm。

羧甲基化修饰余甘多糖及生物活性研究

为探讨羧甲基化修饰对余甘多糖生物活性的影响,采用氢氧化钠-异丙醇-氯乙酸钠反应体系对余甘多糖进行羧甲基化修饰,并以清除自由基、NO_2^-作用及抑制肿瘤细胞增殖作用为指标,评价羧甲基化余甘多糖的活性。结果表明,红外光谱显示COO-成功接入余甘多糖,制得羧甲基化余甘多糖,取代度为0.961;CM-EPS对NO_2^-的清除作用显著增强,对人肝癌细胞HepG-2增殖的抑制作用也有所提高,而对DPPH、ABTS自由基的清除活性下降。羧甲基化修饰能够改善余甘多糖的某些生物活性。

余甘粗多糖对HepG-2细胞氧化应激反应的影响

为了研究余甘粗多糖对人肝癌细胞Hep G-2增殖能力及氧化应激反应的影响,将不同浓度余甘粗多糖(CEPS)作用于Hep G-2肝癌细胞,分别培养24、48、72 h后,利用倒置生物显微镜观察其细胞形态,采用MTT法检测细胞增殖抑制率并通过测定超氧化物歧化酶(SOD)活性,乳酸脱氢酶(LDH)活力,谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活力以及丙二醛(MDA)含量来探讨余甘粗多糖对Hep G-2细胞氧化应激反应的影响。研究表明随着余甘粗多糖浓度的增加,细胞存活率降低,贴壁生长异常,悬浮死亡细胞数量增加,且MDA含量增加,SOD、LDH、GSH-Px活力均呈现出增强趋势,初步判断余甘粗多糖引起Hep G-2肝癌细胞受损,导致过氧化物MDA含量增加,相应的抗氧化物酶为了自我保护而增强活力,说明余甘粗多糖对Hep G-2肝癌细胞氧化应激反应产生影响,从而诱导Hep G-2细胞损伤,增殖活力下降。

余甘子果实水溶性多糖抑菌及群体感应抑制活性初探

以余甘果实(粉甘)水溶性多糖为材料,采用比浊法测定余甘多糖对5种细菌的抑菌活性及对改造型紫色杆菌紫色杆菌素生成量的影响。结果显示,余甘多糖对供试菌的抑菌活性大小顺序为:金黄色葡萄球菌>枯草芽孢杆菌>改造型紫色杆菌CV026>红色粘质沙雷氏菌>大肠杆菌;余甘多糖终浓度为20 mg·m L^(-1)时,对紫色杆菌素生成量的抑制作用最大,抑制率达(53.47±3.10)%。因此,余甘多糖具有抑菌活性及群体感应抑制活性。

余甘子多糖的结构表征及免疫增强作用

本试验旨在制备余甘子多糖(Phyllanthus emblica polysaccharide,PEP),通过对其结构表征进行分析,探索PEP对鸡新城疫(Newcastle disease,ND)疫苗免疫效果的影响。利用紫外光谱(ultraviolet spectroscopy,UV)、红外光谱(Fourier transform infrared spectroscopy,FT-IR)、高效液相色谱分析法(high performance liquid chromatography,HPLC)和扫描电镜(scanning electron microscope,SEM)分析PEP结构;选取175只1日龄河田鸡,随机分成5组,每组35只,分别为空白对照组,疫苗对照组,PEP低、中、高剂量组。除空白对照组外均用ND疫苗进行免疫,7日龄首免,并于28日龄二免。在免疫的同时,PEP低、中、高剂量组分别按照10、20、30 g·L^(-1)的剂量给药PEP溶液0.5 mL,疫苗对照组和空白对照组给予等量生理盐水,每天1次,连续3 d。分别于7、14、21、28、35、42和49日龄时,测定血清中新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)特异性抗体水平以及γ-干扰素(INF-γ)和白介素4(IL-4)的水平;于28和49日龄时测定外周血淋巴细胞增殖活性和T淋巴细胞CD4+/CD8+的比值;于49日龄剖杀后采集脾、法氏囊、胸腺和肝进行组织学观察以及检测免疫器官指数。结果表明,PEP为白色棉絮状,糖含量为(86.70±1.05)%,结构分析结果表明,PEP是含α型糖苷键的多糖,其组分均一,不含核酸和蛋白质,呈片状分布,总体结构规整且致密,单糖组成为葡萄糖醛酸(glucuronic acid,GlcA)、葡萄糖(glucose,Glu)、木糖(xylose,Xyl)和岩藻糖(fucose,Fuc),其摩尔比为0.5∶8.3∶1.8∶0.3。动物试验结果表明,PEP能显著提高鸡血清中NDV特异性抗体、INF-γ和IL-4的水平(P<0.05),还能显著促进鸡外周血淋巴细胞增殖和T淋巴细胞CD4+/CD8+的比值(P<0.05),提高免疫器官指数(P<0.05),激活脾、法氏囊、胸腺和肝等器官的免疫功能。PEP糖含量高,结构稳定,可提高机体免疫活性,具有较良好的佐剂活性,对ND具有良好的防治效果。