余甘子总黄酮提取物对H_1N_1流感病毒感染小鼠肺炎的影响

目的:探讨余甘子黄酮提取物对感染H_1N_1流感病毒小鼠的保护作用及肺指数的影响。方法:以H_1N_1流感病毒感染小鼠建立模型,以利巴韦林为阳性药对照,不同浓度的余甘子黄酮提取物水溶液灌胃给药,统计各组小鼠平均存活时间及肺指数。结果:余甘子总黄酮高、中剂量组小鼠肺指数均低于模型组(P<0.01),余甘子总黄酮中剂量和高剂量可显著降低H_1N_1流感病毒小鼠肺指数;模型组小鼠存活时间明显低于正常组,差异有统计学意义(P<0.01)。余甘子总黄酮高、中剂量组小鼠存活时间高于模型组,差异有统计学意义(P<0.01),余甘子总黄酮高、中剂量可延长感染小鼠平均存活时间。结论:余甘子总黄酮提取物具有较好的抑制H_1N_1病毒感染小鼠肺部炎症的作用。

基于网络药理学探讨余甘子叶总黄酮抗结直肠癌的分子机制及活性成分

目的采用网络药理学方法,研究余甘子叶总黄酮(TFPL)抗结直肠癌的分子机制及活性成分。方法采用液相色谱-串联质谱法(LC-MS/MS)分析鉴定TFPL化学成分,利用ChemMapper数据库和OMIM数据库分别收集TFPL成分相关靶点和结直肠癌相关靶点,比对得到TFPL成分与结直肠癌共有靶点,通过分子对接技术预测TFPL抗结直肠癌的潜在活性成分。结果鉴定得到TFPL的12个化学成分,对应100个靶点,结直肠癌对应靶点192个,通过比对得到TFPL抗结直肠癌的潜在靶点EGFR。分子对接结果显示,化学成分Quercetin、Kaempferol与EGFR能够较好结合。结论TFPL可能通过作用于EGFR发挥抗结直肠癌作用,Quercetin和Kaempferol可能是TFPL抗结直肠癌的潜在活性成分。

余甘子叶总黄酮对H22荷瘤小鼠免疫功能调节的影响

目的:探讨余甘子叶总黄酮对H22荷瘤小鼠免疫调节的影响与肿瘤微环境的变化及其相互关系。方法:昆明小鼠50只腋下H22细胞荷瘤造模后,根据瘤体大小采用随机区组法分为对照(Control)组,5-氟尿嘧啶(5-FU)组,余甘子叶总黄酮低(YGZY-L:0.496 g·kg^(–1))、中(YGZY-M:0.991 g·kg^(–1))、高(YGZY-H:1.982 g·kg^(–1))剂量组,连续给药14 d。观察瘤质量及抑瘤率;ELISA法检测肿瘤组织中IL-2、IL-6、IL-10、IFN-γ、TNF-α含量水平;HE染色观察瘤组织形态;免疫组化法检测瘤组织CD4+T、CD8+T细胞比例;制备瘤组织单细胞悬浮液,分离淋巴细胞,并用流式细胞术观察肿瘤组织中浸润的淋巴细胞比例;Western blot观察NF-κB1、FLT3、PD-1、BTLA、CTLA-4表达情况。结果:抑瘤率为5-FU组62.2%,YGZY-L组13.3%,YGZY-M组40.7%,YGZY-H组53.5%;HE染色显示余甘子叶总黄酮使实体瘤细胞坏死、核固缩;免疫组化显示余甘子叶总黄酮和5-FU可以激活肿瘤微环境CD4+T细胞和CD8+T细胞数量(P<0.01);ELISA检测显示余甘子叶总黄酮显著上调肿瘤微环境中IL-2、IL-6、IFN-γ、TNF-α,下调IL-10(P<0.01);瘤组织浸润淋巴细胞流式分析发现,与Control组相比,余甘子叶总黄酮降低CD4+CD25+Foxp3+Treg、CD4+PD-1+TIL、CD8+PD-1+TIL比例,升高CD8+CD28+CTL比例(P<0.05或P<0.01);Western blot分析显示,与Control组相比,余甘子叶总黄酮显著降低肿瘤微环境中NF-κB1、FLT3表达量(P<0.01),及PD-1、CTLA-4、BTLA表达量(P<0.05或P<0.01)。结论:余甘子叶总黄酮可以通过改善肿瘤免疫微环境,调节荷瘤小鼠免疫功能来抵抗肝癌肿瘤。

余甘子总酚酸和总黄酮配伍抑制肝癌细胞增殖及对免疫功能的调节作用

目的:观察余甘子总酚酸和总黄酮不同配伍比例对癌细胞的抑制作用及观察对免疫系统的影响。方法:在96孔培养板中,每孔加入100μL(含有5 000个/mL肿瘤细胞)RPMI 1640培养液,采用MTT法观察不同配伍比例的余甘子总黄酮和总酚酸对人肝癌细胞株HepG2的体外抑制作用;将64只小鼠随机分成8组,分别为正常对照组和余甘子总酚酸总黄酮配伍后的给药组,每天ig给药1次,连续9 d,采用MTT法测定小鼠脾淋巴细胞的转化增殖,测定小鼠血清白介素-2(IL-2)和干扰素-γ(IFN-γ)含量,测定不同配伍比例的余甘子总酚酸和总黄酮的免疫调节作用。结果:MTT法测定的结果均显示,不同比例余甘子总酚酸+总黄酮的配伍,对肝肿瘤细胞的抑制作用明显,其中以总黄酮比总酚酸10∶1(110 mg.L-1∶11 mg.L-1)时抑制率最高,抑制率为60.35%。余甘子总黄酮与总酚酸配伍能促进小鼠脾淋巴细胞增殖,其中每天以总酚酸329.5 mg.kg-1总黄酮228 mg.kg-1对小鼠ig给药组脾淋巴细胞增殖率最高,刺激指数比空白组高了0.786。并且促进小鼠淋巴细胞分泌因子的生成。结论:余甘子总酚酸和总黄酮对肝脏肿瘤细胞增殖有明显的抑制作用,并且能增强机体特异性免疫功能和非特异性免疫功能的作用。

余甘子根的化学成分研究

目的研究余甘子根的化学成分。方法采用各种色谱技术分离纯化,用MS、IR、NMR等谱学技术分析确定化合物结构。结果从余甘子根部95%乙醇提取物分离得到7个化合物。分别鉴定为3,20-二氧代二降木栓烷(1)、羽扇豆醇(2)、β-谷甾醇(3)、豆甾醇(4)、胡萝卜苷(5)、4-O-甲基鞣花酸-3′-α-鼠李糖苷(6)、余甘酸(7)。结论其中化合物1为新化合物,命名为余甘酮A,化合物2～6为首次从余甘子根部分离得到。