3L无菌C型臂套在肺供体保存中的应用

自2002年以来,我院开展了肺移植手术200余例,在供体肺的获取保存过程中,全部采用了3L无菌C型臂套,取得了良好的效果。现介绍如下。1材料与方法1.1材料选用江西3L公司生产的60cm×80cm的无菌独立包装C型臂套。1.2方法先在保温箱内底部和四周放上普通蓝冰,洗手护士戴无菌手套,将C型臂套展开,套在打开保温箱的下层,共套3层,注意保持内面和收口带子的无菌,避免污染。

肝移植供体保存技术及进展

目的:肝移植是终末期肝病和肝恶性肿瘤的最终选择。肝移植技术得到了显著改善,但移植后并发症仍不可避免。移植供体的保存是肝移植的基础,随着器官供需矛盾的日益加剧,边缘化、脂肪变性和心脏循环死亡的供体增加,我们迫切需要更有效、更低成本的保存技术来延长供体缺血时间。本研究介绍了几种经典保存技术的发展过程、几种新的保存方案的进展以及几种保存方案之间的差异,旨在探索更合适的保存技术来指导临床实践,减少资源浪费。方法:通过PubMed、维普、中国知网、万方、重庆医科大学图书馆数据库进行了系统文献检索(1960~2022),纳入UW液、HTK液、Celsior液、HTK-N、IGL-1液、Polysol液、SCOT液、CZ-1液等或比较两种或多种保存液的文章。结果:共有387篇论文关于UW液、HTK液95篇,Celsior液46篇,HTK-N液12篇,IGL-1液45篇,Polysol液8篇,SCOT液20篇,CZ-1液2篇和102篇HMP和74篇多种保存技术的比较研究。目前临床应用较多的的有HTK液、UW液和Celsior液,两者之间的差异较小,但对肝脏的缺血–再灌注损伤仍然存在。新型溶液有HTK-N、IGI-L液、Polysol液、SCOT液、CZ-1液等。HMP作为最新动态保存方式,也逐渐应用于临床。几种保存技术各有优缺点。结论:已用于临床的HTK液、UW液和Celsior液之间差异性较小,IGL-I液除UW液和Celsior的优点外,还减少高钾血症和钙离子超载的发生,具有更好的器官冲洗效果,更好地减少缺血再灌注损伤。其他技术在动物实验和临床试验中逐渐显示出其优势。HMP作为最新的动态保存模式,可降低肝细胞和内皮细胞损伤。然而,目前理论上有效的保存方案仍处于实验阶段,存在许多不确定性,因此需要更深入的探索。

大鼠供体喉保存的研究

目的研究大鼠喉移植供体喉的保存,探讨喉体不同组织结构对缺血和坏死的耐受情况。方法40只Wister大鼠,采用UW液灌注,低温保存供体鼠喉,分别通过病理光学及透射电镜观察其形态学改变,比较喉不同组织结构的缺血、坏死变化。结果供体喉保存60h后,病理HE染色才能镜检到喉体组织缺血改变,电镜24h即可发现组织细胞的缺血改变,鼠喉各组织结构缺血耐受时间不同,最先出现变化的是粘膜上皮,接着是喉内肌、小涎腺、血管内皮、神经纤维,最后改变的是软骨细胞。结论透射电镜检查能及时地反映喉体组织细胞缺血、坏死情况,UW氏液保存供体喉不宜超过26h。

氧合血体外持续灌注保存对猪供肺移植后功能的影响

目的观察氧合血体外持续灌注保存对猪供肺移植后功能的影响。方法将24只广西巴马小型香猪随机分为观察组与对照组各12只,每组供体、受体各6只。手术切除观察组与对照组供体双侧肺,分别经氧合血体外持续灌注保存、低温静态保存各8 h,后将供体左肺分别移植入两组切除左肺的受体。比较两组再灌注0.5、2、4、6 h时左下肺静脉氧合指数(PaO_2/FiO_2),HE染色观察两组供肺保存前(T_0)、供肺保存8 h(T_1)、再灌注3 h(T_2)和再灌注6 h(T_3)左下肺肺组织病理。结果观察组再灌注0.5、2、4、6 h时左下肺静脉PaO_2/FiO_2分别为(482.50±30.72)、(467.17±31.06)、(441.17±17.86)、(422.33±46.45)mm Hg,对照组分别为(413.83±18.53)、(389.67±7.28)、(313.67±24.53)、(308.50±50.45)mm Hg,观察组再灌注6 h与本组再灌注0.5 h时相比,对照组再灌注4、6 h与本组再灌注0.5 h时相比,两组再灌注各时点相比,P均﹤0.05。两组随再灌注时间延长,肺间质逐渐增宽,肺泡组织结构逐渐塌陷,肺泡水肿逐渐明显,肺泡腔内可见渗出物,且对照组肺组织结构损伤在同一时间点比观察组重,T3时对照组肺组织水肿分级比观察组高(P﹤0.05)。结论氧合血体外持续灌注保存猪供肺移植后肺氧合功能稳定、组织结构较完整。

干燥保存角膜供体行穿透性角膜移植治疗大面积严重感染性角膜溃疡

目的 观察用甘油或无水氯化钙保存角膜材料的大面积穿透性角膜移植治疗严重感染性角膜溃疡的临床疗效。 方法 对药物治疗无效的 3例细菌性角膜溃疡 ,合并8.0～ 8.5 mm直径的角膜溶解、穿孔 ;5例真菌性角膜溃疡 ,溃疡浸润范围均大于 7.5 mm,浸润深达全层 ,2例合并小穿孔 ,3例合并前房积脓。用甘油或无水氯化钙保存的角膜材料行大面积穿透性角膜移植。结果 7例感染控制 ,其中 5例移植片保持半透明 ,2例新生血管长入。 1例经 2次角膜移植感染仍不能控制 ,最后做眼内容物摘除术。结论 在没有新鲜角膜材料来源时 ,用甘油或无水氯化钙保存角膜材料对严重感染性角膜溃疡行大面积治疗性穿透性角膜移植是一种有效的方法。

不停跳摘取和保存有完整心包的供心

背景:有文献报道心脏在连续灌注、不停跳下保存,有望突破心脏保存时限。但是心脏的摘取和灌注部位沿用单纯低温保存的办法,有背于连续灌注保存的初衷。作者认为保留完整的心包,于头臂动脉干灌注,在不停跳下摘取和保存供体心脏可能更加科学。目的:评价不停跳保存完整心包的可行性以及供心功能变化情况。方法:选用年龄、体质量相当的广西巴马小型猪6只进行不停跳摘取和保存有完整心包供心的试验。实验猪用氯胺酮麻醉,取胸部正中切口,全身肝素化后,不切开心包,先阻断并切断头臂干插灌注管,后切断上腔静脉和右上肺静脉回收血液,用自行组装的灌注装置灌注心脏,在跳动状态下摘取心脏并保存4h。设4个时点连续监测左心室心功能变化,离体时为T0,保存60min为T1,保存120min为T2,保存180min为T3,保存240min为T4。结果与结论:在不停跳下,摘取和保存有完整心包的供体心脏6例全部成功。不停跳保存各个时点的左心室内压最大上升速率两两比较:T0与其他时点比较,差异有显著性意义(P<0.05);T1与T2时点比较,差异无显著性意义(P>0.05);T1与T3及T4时点比较,差异有显著性意义(P<0.05)。不停跳保存各个时点的左心室内压最大下降速率两两比较:T0与其他时点比较,差异有显著性意义(P<0.05);T1与T2,T3及T4时点比较,差异有显著性意义(P<0.05)。结果表明在不停跳下摘取和保存有完整心包供心是完全可行的。

心脏不停跳法猪供心保存模型的建立

目的研究心脏不停跳法猪供心保存模型的建立,评述其意义及价值。方法选用25～30 kg的广西巴马猪12头,6头只用于采血,6头取心脏作为供心模型。全麻下,胸部正中切口,全身肝素化(4 mg/kg),从上腔静脉放血500 ml;阻断并切断头臂干插灌注管,切断上腔静脉和右上肺静脉回收血液,灌注心脏停跳液使心脏停跳。切断降主动脉起始部和两大分支,取下的心脏经肺静脉和二尖瓣口置入左心室引流管。用自行组装的灌注装置连续灌注氧合温血液,维持心脏空跳8h。结果 6只供心都完好地保存了8h,保存期间除了1例出现短暂的心房传导阻滞(2:1)外,其余无发生心律失常。红细胞压积从灌注1h(T_1)到5h(T_5)逐渐升高,从T_7到T_8逐渐降低;游离钙离子和钾离子有逐渐升高的趋势;pH和BE有逐渐降低的趋势。心脏不停跳保存灌注压变化从T_1到T_4灌注压力呈逐渐下降,以后就处于一个相对稳定的数值。冠状静脉血氧分压(56.62±6.93)mmHg。心脏表面无干燥或水肿现象。结论 "广西巴马小型猪"是进行心血管系统疾病研究理想的实验动物,离体猪心不停跳模型的建立对移植供心保存的研究有更重要的意义和价值。

高压干燥保存对小鼠供心冷缺血再灌注损伤的影响

目的观察氧气（oxygen,O2）及一氧化碳（carbon monoxide,CO）混合高压气体干燥保存方法对小鼠离体供心冷缺血再灌注损伤的影响。方法采用C57BL/6雄性小鼠,建立同系小鼠心脏颈部异位移植模型。4~6周龄供体鼠48只,数字表法随机分为4组（n=12）：空白对照组（A组）、即刻移植组（B组）、组氨酸-色氨酸-酮戊二酸盐（histidine-tryptophan-ketoglutarate solution,HTK）液保存组（C组）及高压干燥保存组（D组）。6~8周龄小鼠36只,数字表法随机分为3组,即刻移植受体组、HTK受体组及高压干燥受体组（n=12）。供心处理如下：A组仅取供体心,不做移植;B组供心不经保存取下后即刻移植;C组供心浸泡于HTK液中;D组供心悬挂并置于高压气体罐中（PO2：3.2×101.3 k Pa＋PCO：0.8×101.3 k Pa=4×101.3 k Pa）。C、D两组供心均于4℃冰箱中保存24 h后,分别移植于受体组小鼠颈部。移植后2 h,对比观察B、C、D三组复跳情况及供心功能。移植后24 h,检测受体鼠血清心功酶变化;取各组供心组织,分别采用苏木素-伊红（HE）染色、Tunnel染色及行蛋白免疫印迹（Western-blot,WB）检测,对比观察供心病理学改变、心肌细胞凋亡及B细胞淋巴瘤/白血病-2（B cell lymphoma/leukemia-2,bcl-2）蛋白表达情况。结果 B组10只供心复跳,C组2只供心复跳,D组9只供心复跳,3组间复跳率比较,差异有统计学意义[83.3%（10/12）vs.16.7%（2/12）vs.75.0%（9/12）,P=0.0015];其中D组复跳率低于B组,但明显高于C组,差异有统计学意义（P〈0.0125）。移植2 h后B、C、D组间供心功能评分比较,差异有统计学意义（5 vs.0 vs.3,P〈0.01）,两两比较差异有统计学意义（P〈0.05）。4组间血清肌钙蛋白I（troponin I,Tn I）浓度比较,差异有统计学意义（P〈0.001）,D组高于A、B两组,但低于C组（P〈0.001）。苏木素伊红染色结果显示D组细胞水肿、炎症细胞浸润等组织变化情况较A、B两组明显,但较C组轻。Tunnel染色结果显示D组心肌细胞凋亡较A、B两组明显,但少于C组,差异有统计学意义（P〈0.01）。Western-blot结果显示D组bcl-2的表达上调,高于其余3组,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论高压干燥保存可减轻离体供心冷缺血再灌注损伤,维持供心活力,有效延长供心保存时间。

高压干燥保存对小鼠供心冷缺血再灌注损伤中自噬及凋亡作用的影响

目的心脏移植是治疗终末期心脏病的有效手段,延长供心保存时间有助于解决供心紧缺的问题,文中旨在通过观察一氧化碳和氧气的高压干燥保存是否能够延长供心保存时间及其作用机制。方法选取SPF级C57BL/6雄性小鼠共84只,将4～6周龄48只供鼠随机分成4组（n=12）：对照组（仅取供体心,不做移植）、即刻移植供体组（供心不经保存取下后即刻移植）、组氨酸-色氨酸-酮戊二酸盐液（histidine-tryptophan-ketoglutarate solution,HTK）保存供体组（供心浸泡于HTK液中24 h）及高压干燥保存供体组[供心悬挂并置于高压气体罐中（氧分压：3200 h Pa,一氧化碳分压：800 h Pa）,保存24 h]。将6～8周龄36只受鼠随机分为3组（n=12）：即刻移植受体组、HTK保存受体组及高压干燥保存受体组。将各供体组的供心分别对应移植于各受体组,移植后2 h,对比观察各受体组复跳情况及供心功能。取对照组及各移植受体组供心组织,HE染色观察供心病理学改变,Tunnel染色观察心肌细胞凋亡情况,Western blot检测自噬标志性蛋白LC3-Ⅱ及Bcl-2蛋白表达情况。结果即刻移植受体组与高压干燥保存受体组复跳率高于HTK保存受体组（P〈0.05）。高压干燥保存受体组、HTK保存受体组、即刻移植受体组移植后2 h供心功能评分分别为[2.5（2.0～2.9）、0.8（0.5～1.0）、4.5（4.0～4.5）分],组间两两比较差异均有统计学意义（P〈0.05）。高压干燥保存受体组LC3-Ⅱ蛋白及Bcl-2蛋白表达量为（2.06±0.29、0.87±0.18）、即刻移植受体组为（1.24±0.20、2.07±0.32）,均高于对照组（0.13±0.03、0.19±0.02）与HTK保存受体组（0.16±0.06、0.26±0.08）,差异有统计学意义（P〈0.05）。HTK保存受体组Bcl-2蛋白表达量高于对照组（P〈0.05）。高压干燥保存受体组LC3-Ⅱ蛋白低于即刻移植受体组（P〈0.05）。HE染色结果显示：高压干燥保存受体组供心心肌细胞水肿、炎症细胞浸润等组织变化情况较对照组、即刻移植受体组明显,但较HTK保存受体组轻。与对照组、即刻移植受体组凋亡细胞指数[（1.08±0.56）、（2.13±1.71）%]比较,高压干燥保存受体组、HTK保存受体组[（5.04±1.77）、（26.72±5.23）%]升高（P〈0.01）,而高压干燥保存受体组凋亡指数较HTK保存受体组降低（P〈0.01）。结论一氧化碳和氧气的高压干燥环境中可减轻小鼠供心冷缺血再灌注损伤,其机制可能与促进自噬,为细胞提供能量,抑制心肌细胞凋亡有关。

同种异体半月板脱细胞基质移植的实验研究

目的 通过对低温冻存的同种异体半月板和半月板脱细胞基质移植效果的比较 ,寻找更好的同种异体半月板的保存方法。方法 取成年大耳白兔 6 4只 ,按照体重配成 32对 ,分别作为供体动物和受体动物。取出供体动物的双膝内侧半月板 ,将右侧的冻存 (- 80℃ ) ,左侧半月板制成脱细胞基质冻存。将供体半月板移植到对应受体动物的膝关节中 ,术后 4、8、1 2和 1 6周分批取材进行大体、影像学、组织学观察。结果 实验侧 (左 )的半月板较对照侧 (右 )萎缩程度轻、速度慢 ,对照侧膝关节退变较实验侧明显 ,实验侧的组织结构明显优于对照侧。结论 兔半月板脱细胞基质移植效果优于低温冻存的半月板移植 ,半月板脱细胞基质可以作为同种异体半月板供体保存方法。

肿瘤坏死因子与移植肝的保存再灌注损伤

肝移植过程中的保存再灌注损伤是缺血再灌注损伤的特殊类型。肝移植过程中肿瘤坏死因子水平升高，可能与内毒素的产生和枯否氏细胞的激活有关。肿瘤坏死因子通过促进血管内皮细胞粘附白细胞及分泌炎性介质，增强中性粒细胞对内皮细胞的粘附、激活巨噬细胞释放白介素等，介导组织损伤，通过使用降低ＴＮＦ合成的药物。

改良Optisol角膜保存液保存兔角膜内皮细胞超微结构的观察

为提高角膜移植供体质量,我院自1996年起对Optisol保存液进行研究,对其成分进行改良称改良Optisol保存液,并对其保存兔角膜内皮细胞的超微结构进行观察.现总结如下.

供肝切取与保存16例体会

目的 探讨肝移植时快速切取供肝技术与保存方法。方法 结合我肝移植中心患者临床资料 ,回顾性分析 16例供肝切取和保存方法。结果 16例供肝热缺血时间为 3～ 6min ,冷缺血时间为 7～ 11h ,供肝血管、胆管均完好 ,13例肝移植患者术后均未出现移植肝原发性无功能等严重并发症。

肺移植,您了解多少?

1983年多伦多肺移植中心的Dr．Cooper教授带领他的团队成功完成首例人肺的移植，1986年该团队又成功地施行了单肺移植和双肺移植，从此开创了肺移植的新纪元。此后，肺移植工作得到迅速发展，到1997年手术例数已达6639例，3年生存率可达50％以上，5年生存率超过40％。如今，随着肺移植技术、供体保存和围手术期处理的逐步成熟。

广西巴马小型猪用于心脏移植的研究

目的：探讨广西巴马小型猪游离心脏保存与心脏移植的意义和价值。方法：广西巴马小型猪24头（25~30 kg）,按随机方法分为供体组（n=12）和受体组（n=12）。两组麻醉后行胸部前正中切口。供体组先行前腔静脉放血,阻断升主动脉灌注心脏停跳液（4℃改良Thomas液）,切取的心脏置入4℃生理盐水,用UW液冲洗至清亮,低温保存8 h。受体组常规建立体外循环,全身降温至30℃。心肺机的灌注量为70 mL/kg。阻断升主动脉。切除受体组的心脏,保留左心房后部。供体心脏按原位放入受体心包内,连续外翻缝合左心房全部—右心房大部分,肺动脉半周和主动脉的全部;开放主动脉阻断钳、心脏复跳后继续完成肺动脉、右心房其余部分的吻合。心肺复苏,并行循环2 h。进行血流动力学测定。结果：实验中未见呼吸抑制而死亡。12头巴马小型猪供体心脏植入受体后,心脏均可复跳,未发生漏血现象并可以脱离体外循环。结论：广西巴马小型猪用于心脏移植的研究是较理想的动物之一。

原位心脏移植长期存活原因分析(附34例报告)

目的探讨原位心脏移植长期存活的原因和价值。方法选自2004-10～2012-12在广西壮族自治区人民医院和解放军181医院进行同种异体心脏移植患者34例。男性29例,女性5例;年龄12～56岁。扩张型心肌病30例,肥厚型心肌病2例,冠心病2例。心脏功能Ⅲ～Ⅳ级。全部病例均采用双腔静脉吻合法进行原位移植。对患者的个体因素、供心保护、手术过程、围手术期情况、免疫抑制剂治疗和术后检测情况、生活质量进行分析。随访1～99个月。结果早期死亡3例,其中2例死于肺动脉高压危象-右心功能衰竭。出院的31例患者全部存活,心脏功能恢复Ⅰ～Ⅱ级。存活3年以上13例,其中8年以上1例,心功能Ⅰ级,已生育一小孩。免疫抑制剂血液浓度监测和B型超声检查未发现异常。64排CT检查未发现冠状动脉有狭窄表现。结论组织配型、供心保存、缺血-再灌注损伤、手术过程、免疫抑制剂合理使用是移植后长期存活的关键因素,防治免疫排斥、代谢、感染等是防治心脏移植物血管病变的重要措施。64排CT等非创伤性检查可作为常用的监测手段。

Preservation of non-heart-beating donor livers in extracorporeal liver perfusion and histidine-trytophan-ketoglutarate solution

AIM: To compare the preservation of non-heart- beating donor (NHBD) livers in cold histidine-trytophan- ketoglutarate (HTK) solution and extracorporeal liver perfusion (ECLP). METHODS: Livers harvested from health pigs were stored for 10 h in cold HTK solution (group A, n = 4) or perfused with oxygenated autologous blood at body temperature (group B, n = 4). Both groups were then tested on the circuit for 4 h. Bile production, hemodynamic parameters, hepatocyte markers and reperfusion injury of extracorporeal livers were tested in each group. Liver tissues from each group were examined at the end of reperfusion. RESULTS: At 1, 2, 3 and 4 h after reperfusion, bile production, hemodynamic parameters, hepatocyte markers and reperfusion injury of livers in group A were statistically different from those in group B (P < 0.05 or P < 0.01). CONCLUSION: ECLP is better than HTK solution to preserve NHBD livers. ECLP can assess the graft viabilitybefore liver transplantation.

棉籽糖低钾右旋糖酐液中灌注丹酚酸B对大鼠离体肺的保护作用

目的:研究丹酚酸B对离体供肺的保护作用。方法:将SD大鼠36只,随机分为对照组、低浓度实验组和高浓度实验组,每组各12只。对照组选择棉籽糖低钾右旋糖酐液(R-LPD液),实验组在对照组灌注液的基础上分别加入丹酚酸B注射液800mg/L、1200 mg/L。呼吸机辅助通气下边灌注边取下供肺,离体后再用灌注液行顺灌及逆灌,后放入盛有4℃相应保存液的无菌冰桶内保存。术后6 h、9 h、12 h、24 h分别测两组供肺的湿干重比(W/D)、髓过氧化物酶(MPO)活性、丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)活性。结果:各组内12 h前相邻时间点比较,各参数均无统计学差异(P>0.05);24 h后各参数明显高于12 h(P<0.01)。各组间同一时间点比较,12 h前组间各参数无统计学差异(P>0,05);保存至24 h,W/D、MDA含量、MPO活性比较,对照组>低浓度实验组>高浓度实验组(P<0.05);而SOD活性比较,对照组<低浓度实验组<高浓度实验组(P<0.05)。光镜下各肺组织保存至12 h以前,病理形态学均无明显炎症损伤,仅表现轻度炎症反应。12 h后对照组组光镜病理观察出现肺泡结构破坏、间质水肿、炎症损伤较低浓度实验组组明显,高浓度实验组情况较低浓度实验组肺组织结构更为清晰且炎症损伤较轻。结论:加入丹酚酸B后的灌注液在12 h前未有明显优势,12 h后能更加有效地保证小鼠供肺质量,使供体肺在离体情况下有效保存更长的时间,且高浓度丹酚酸B能更有效的提高对供体肺的保护发挥了重要作用。

穿透角膜移植手术进展

近年来角膜移植手术有了很大进展，角膜供体保存已由湿房短期保存发展为Ｋ液、ＣＳＭ、Ｏｐｔｉｓｏｌ及Ｄｅｘｓｏｌ等中期保存液。角膜移植手术技巧及手术适应症也随着显微手术的进展而有了改进。穿透角膜移植白内障联合手术，儿童角膜移植手术的开展及植片免疫排斥反应的研究，使角膜移植手术更趋完善、更多的角膜病致盲的患者受益而重见光明。