特异性磷酸二酯酶抑制剂米力农对供体肺的保护作用

目的:利用大鼠离体肺再灌注模型,观察特异性磷酸二酯酶抑制剂米力农在器官摘取及保存期对大鼠供体肺的保护作用。方法:24只SD大鼠随机分成对照组和实验组,每组12只。对照组为常规保存组,低钾右旋糖酐液(LPD)灌洗后摘取心肺器官,4℃恒温冰箱中保存12h后取出,以5mL·min^(-1)流量再灌注60 min;实验组供体肺灌洗液及保存液中含有666μg·L^(-1)米力农,余同对照组。结果:实验组供体肺的换气功能、肺血流动力学指标、湿重干重比及超微结构均显著优于对照组(P<0.05),再灌注后肺组织丙二醛(MDA),髓过氧化物酶(MPO)和白细胞介素-8(IL-8)含量均显著低于对照组(P<0.05)。结论:使用特异性磷酸二酯酶抑制剂米力农处理供体肺能够减轻缺血再灌注损伤,明显改善移植后早期供体肺功能。

无心跳供体肺移植中部分液体通气对肺保护的病理学评估

背景:如何在热缺血期给予无心跳供体肺提供保护进而降低移植后原发性移植物失功能是所有研究者和临床医生面前的首要问题。目的:从病理学角度评价部分液体通气在无心跳供体肺移植中对供体肺的保护作用。方法:将36只清洁级SD大鼠随机均分为3组,应用自制16G深静脉留置针作气管插管,行气管切开并连接至呼吸机行机械通气。经颈静脉注入KACL溶液猝死大鼠,用多导生理检测仪连续记录血压,在血压变为0mmHg时,认为造模成功,模型建立后氧气组大鼠继续给予机械通气2h;盐水组和氟化碳组先给予盐水和氟化碳5min的纯氧通气,后从气管插管中注入相当于功能残气量的高氧盐水和高氧氟化碳(10mL/kg),并给予机械通气2h。结果与结论:大体观察盐水组肺脏肿胀,肺组织表面片状出血,肺呈暗红色,气道内有血性水肿液;氧气组见肺脏肿胀较轻,肺表面有少量出血点;氟化碳组肺组织炎症细胞浸润和组织水肿明显减轻。光镜下盐水组和氧气组呈弥漫性肺泡和间质充血、水肿,支气管壁及毛细血管周围有大量的炎性细胞浸润和肺泡过度膨胀,肺泡壁断裂;氟化碳组肺组织细胞结构较为完整,无明显破坏。结果可见部分液体通气可以对无心跳供肺起到很好的保护作用。

无心跳供体肺支气管内气体二次流动特性分析

无心跳供体(NHBD)肺有望解决临床供肺严重不足的问题,肺内低温通气被公认为是NHBD肺在体低温保护的有效方法之一。通过建立3D非对称四级支气管模型,借助计算流体动力学(CFD)方法,分别研究在3种被动呼吸频率(0.125、0.25、0.5 Hz)条件下肺支气管内的二次流结构特性。研究结果表明,被动吸气时主支气管截面上不存在二次流结构,且截面上最大无量纲速度差分别为0.67(@0.125 Hz)、0.5(@0.25 Hz)和0.3(@0.5Hz),但在被动呼气时存在明显的二次流结构,且其截面最大无量纲速度差增大到1.25、1.1和1.06;随着支气管级数的增加,无论是吸气还是呼气状态,其对应截面上都存在明显的二次流动结构,但呼吸频率对其截面上最大无量纲速度差变化的影响不大(维持在1.0左右);总体来讲,左肺各支气管内的流动结构比右肺要复杂一些,这与左右支气管的不对称结构有关。该研究明确了低温保护性气体在NHBD肺支气管内的流动总是伴随着二次流的特性,这对于进一步探索其临床保护工艺研究具有重要的指导意义。

供体肺冷缺血损伤机理及保护措施研究进展

当前肺移植手术面临的主要问题是供体肺的严重缺乏及供体肺的保存技术有限等。本文就供体肺在冷缺血保存期间所遭受的冷缺血再灌注损伤机理及相应的供体肺保存措施进行阐述。

肺移植供体肺支气管分泌物细菌培养及药敏试验

目的分析肺移植供体肺支气管分泌物的细菌种类及药物敏感试验的情况。方法对本院2002年9月至2005年5月送检的10份肺移植供体肺支气管分泌物进行培养，并对阳性标本进行细菌鉴定和药敏试验。结果供体中共检出细菌4例，均为嗜氧性革兰氏阳性球菌，检出率为40％，其中2例为表皮葡萄球菌，属血浆凝固酶阴性葡萄球菌（CNS），对红霉素、林可霉素、青霉素G耐药。结论目前对肺移植供体肺的细菌感染，尚未见相关实验报导，对供体肺支气管分泌物应进行细菌培养和药敏，依据细菌检验报告合理选择抗菌药物，对预防术后感染的发生有重要意义。

集束化保护策略对脑死亡供体肺的效果

目的分析脑死亡供体肺集束化保护策略对供肺维护的临床疗效。方法连续收集重症监护室病房内自发性脑出血、特重型颅脑外伤、溺水或外伤所致的缺血缺氧性脑病引起的脑死亡患者98例。采用随机抽样方法进行分组。采用肺集束化保护策略的患者为观察组;常规使用血管活性药物维持血流动力学稳定和传统呼吸支持的患者为对照组。通过分析比较组间肺功能相关指标等来综合评估肺集束化保护策略的疗效。结果肺集束化保护观察组治疗后第6天的HR、Murray评分和12、24、48 h的PaO2/FiO2较对照组有所改善(P<0.05)。观察组符合肺供体标准人数的比例显著高于对照组(P<0.001)。观察组5例供体肺在我院开展移植,接受肺移植者术后存活情况良好。结论脑死亡供体肺集束化保护策略能够有效保护供体肺器官并提高供体肺的质量,具有重要的临床实践价值。

肺保存液复合硫化氢对大鼠供体肺冷缺血期肺组织内质网应激的影响

目的 探讨供体肺保存液中加入外源性硫化氢(H2S)对大鼠供体肺冷缺血期肺组织内质网应激的影响。方法 将28只健康雄性SD大鼠分为对照组、LPD组和硫氢化钠(NaHS)组。NaHS组即在低钾右旋糖酐液(LPD液)中加入NaHS,并根据不同剂量(20 mmol/L和40 mmol/L)进一步分为NaHS20组和NaHS40组。对照组大鼠处死后用LPD液行肺灌注后即取标本保存待检,后3组大鼠放血处死后分别用相应的液体行肺灌注后行低温保存肺脏2 h。测定肺组织匀浆中H2S含量、H2S生成酶胱硫醚-γ-裂解酶(CSE),观察肺组织中细胞凋亡的情况。采用免疫印迹(Westernblot)法测定肺组织中GRP78及PERK蛋白表达。结果 与对照组相比,LPD组肺组织中H2S含量及CSE活性无显著变化(P >0.05),NaHS组H2S含量及CSE活性显著升高(P<0.05),不同剂量NaHS组间比较,差异无统计学意义(P >0.05)。与对照组相比,LPD组及NaHS组凋亡细胞百分比显著升高(P<0.05);与LPD组相比,NaHS组凋亡细胞百分比显著降低(P<0.05);NaHS组间相比,差异无统计学意义(P >0.05)。与对照组相比,LPD组及NaHS组肺组织GRP78及PERK蛋白表达显著增加(均P<0.05);与LPD组相比,NaHS组GRP78及PERK蛋白表达显著下降(P<0.05),NaHS组间差异无统计学意义(P >0.05)。结论 肺保存液中复合H2S可显著增加肺组织中H2S含量及CSE活性,降低内质网应激相关蛋白GRP78及PERK蛋白表达,减少细胞凋亡。

热缺血时间对无心跳供体肺移植再灌注后Ⅱ型细胞凋亡的影响

目的研究热缺血时间对无心跳供体肺移植后Ⅱ型肺泡上皮细胞凋亡的影响。方法将经历不同热缺血时间(30min、60min、120min)间隔Wister大鼠的左肺移植到同系Wister大鼠受体。再灌注2h后,提存肺泡Ⅱ型上皮细胞并进行分析。结果流式细胞计数结果:对照组(心跳组)移植再灌注2h后凋亡细胞率(0.093 1±0.007 7);热缺血-30min组移植再灌注2h后凋亡细胞率(0.166 5±0.014 8);热缺血-60min组移植再灌注2h后凋亡细胞率(0.227 5±0.020 1);热缺血-120min组移植再灌注2h后凋亡细胞率(0.436 5±0.033 7)。各组之间比较P均<0.05。且随着热缺血时间的延长,凋亡率成上升趋势。结论无心跳供体肺移植后原发性移植物失功能的发生率高的一个可能原因是随着热缺血时间的延长造成了移植后II型细胞凋亡比例增高使得移植肺处于失功能状态。

活体供体肺叶移植

活体供体肺叶移植在受体与供体选择、供体肺叶的切除与保护、受体肺切除和移植物的植入以及供体与受体术后管理等诸方面与尸体供体肺移植有许多不同之处，本文综合国外文献进行了叙述。

无心跳供体肺支气管内气体三维流动的数值模拟研究

无心跳供体肺(NHBD)有望解决临床供肺严重不足的问题,肺内低温通气被公认为是NHBD肺在体低温保护的有效方法之一,可提高供肺的利用率。通过建立三维非对称四级支气管模型,运用计算流体动力学(CFD)方法对支气管内的气流流动特性进行数值模拟,并通过试验对数值模拟的边界条件进行验证。研究结果表明:在被动呼吸的吸气和呼气时,支气管截面上的无量纲速度分布不同,左肺支气管和右肺支气管截面上的速度分布也存在较大差异,其中左肺下叶支气管内中心线上的无量纲速度峰值最大,达到1.7,而右肺上叶支气管内中心线上的无量纲速度峰值最小,仅为0.8;由于分叉角度和管径不同,导致吸气过程中流入左主支气管内和右主支气管内的流量分别占55%和45%,而左肺下叶支气管内的流量比率在各肺叶支气管内的流量比率最高,约为35%;通过分析支气管内的流动压力损失,得出支气管的平均压降系数与Re的关系为珔Cp∝Re-0.6。可见,由于支气管的非对称结构以及分叉处空间旋转角度的存在,使得支气管内的气体流动结构比较复杂,这对于无心跳供体肺原位通低温保存的临床实验研究有一定的参考价值。

脑死亡对供体肺的影响及肺保护措施

目前肺移植被公认为治疗终末期肺病的唯一有效方法.自1963年,美国密西西比大学JamesHardy医生进行了第一例人类肺移植以来到2009年底世界范围内共完成肺移植约32 000多例.虽然肺移植手术成功率不断上升。

肺移植中供体肺的保存

由于近年来肺移植的广泛研究和应用，研究肺保存的方法日趋多样化、复杂化。尖端科技的应用已使研究进入分子水平。但与此同时，大量病例已进入临床，成功的经验日趋定型。肺保存的温度已基本控制在１０℃左右，亦有部分学者认为４℃～８℃为最佳。肺缺血保存时间在２４ｈ内最好，最长不应超过４８ｈ。另外大量实验和临床经验证实低Ｋ＋灌洗液（ＬＰＤ、ＬＰＵＷ等）可能是肺动脉灌注中能够最佳保护肺组织的灌洗液。在未来的研究中，各种细胞因子。

供体肺保存研究现状

肺移植是治疗患者中晚期肺疾患的唯一有效方法。安全有效的器官保存是移植成功的先决条件。本文介绍了低温保存离体肺的能量代谢、病理生理改变以及保存离体肺的保存液的理想要求、条件、种类、所含胶体物质、评价指标等方面的研究现状。

激素替代疗法对脑死亡后猪供体肺的影响

目的研究激素替代疗法对猪脑死亡后供体肺的保护作用。方法 20头瑞典健康家猪建立脑死亡模型,随机分为对照组和激素替代组(n=10)。采用ELISA方法检测脑死亡24 h后两组血清IL-1β水平;同时监测两组肺动脉灌流(Pulmonary Artery Flow,PAF)及动脉血气(pH、PCO2、PO2)等肺功能指标。结果脑死亡后24 h对照组IL-1β含量为(1.64±0.30)pg/mL显著高于激素替代组(1.14±0.31)pg/mL(P<0.05),对照组PAF(1.14±0.43)L/min明显低于激素替代组(3.78±0.71)L/min(P<0.05);同时动脉血气分析显示24 h后激素替代组pH、PO2、PCO2明显优于对照组(P<0.05)。结论 (1)在脑死亡24 h后激素替代疗法可以减少血清IL-1β的分泌,减轻肺损伤。(2)激素替代疗法对脑死亡后供体肺功能有一定的保护功能。

部分液体通气对无心跳供体肺的保护作用

目的观察部分液体通气对无心跳供体（NHBD）肺的保护作用。方法36只清洁级SD大鼠随机分为3组：氧气组（C组）、盐水组（B组）和部分液体通气组（A组）。建立NHBD肺模型后行机械通气2h并监测大鼠气道压，2h后测量P-V曲线，切除大鼠左肺下叶，观察供体肺病理特点。行右肺支气管灌洗，测量灌洗液中肺表面活性物质相关蛋白B、C（SP-B、SP-C）的浓度。切除大鼠右肺上叶，并进一步行SP-B、SP-C的实时定量聚合酶链反应（Real-timePCR）检测。结果A组大鼠动态顺应性和静态顺应性在2h热缺血期间都优于B和C组（P〈0．05）；病理组织评分A组优于B组和C组（P〈0．05）；肺泡灌洗液酶联免疫吸附试验（ELlSA）检测和肺组织的Real．timePCR检测说明SP-B和SP-C蛋白和RNA含量差异有统计学意义，其中A组含量明显高于B组和C组（P〈0．05）。结论部分液体通气可以对热缺血期间供肺的肺功能和肺组织起到很好的保护作用，并对sP-B和SP-C有较好的保护作用。

N-乙酰-L-半胱氨酸对供体肺的保护作用

目的 观察核转录因子 (NF κB)抑制剂N 乙酰 L 半胱氨酸 (NAC)对大鼠供体肺在保存期间的保护作用。方法 2 4只大鼠 ,随机分为离体肺用低钾右旋糖酐 (LPD ,对照组 )液和含NAC的LPD液(实验组 )灌洗后于 4℃保存 16h两组。建立离体肺再灌注模型 ,循环灌注 1h。再灌注期间每隔 15min进行供体肺氧合后动脉血氧分压 (PaO2 )、气道峰压 (PAwP)测定 ;再灌注后进行肺组织湿干比 (W/T) ,髓过氧化物酶 (MPO)活性测定 ;分别用免疫组化和RT PCR方法测定肺组织NF κB、黏附分子 (ICAM 1)蛋白和mRNA的表达。结果 再灌注 6 0min后实验组Pa0 .2 降低和PAwP升高程度明显低于对照组 (P <0. 0 1或 <0 . 0 5 ) ;再灌注后 ,实验组比对照组W /T、MPO明显降低 (P <0 . 0 1) ;NF κB、黏附分子 (ICAM 1)蛋白和mRNA表达明显减少 (P <0 . 0 1或 <0 . 0 5 )。结论 应用NAC进行供体肺保存能有效地抑制NF κB和ICAM 1的表达 ,明显改善肺的呼吸功能。