供者特异性HLA抗体及去敏治疗对单倍体造血干细胞移植植入效果的影响

目的 分析供者特异性HLA抗体(anti-HLA donor-specific antibodies, DSA)及DSA阳性患者的去敏治疗对单倍体造血干细胞移植(haploidentical hematopoietic stem cell transplantation, haplo-HSCT)植入效果的影响。方法 收集2017年3月至2023年7月重庆医科大学附属第二医院血液内科行haplo-HSCT,并完成HLA抗体及DSA检测的患者70例,分析DSA阳性和DSA阳性患者去敏治疗对造血干细胞移植植入效果的影响。结果 70例haplo-HSCT患者完成抗体检测,DSA阳性患者15例(21.4%),其中7例(46.7%)强阳性,3例(20.0%)中度阳性,5例(33.3%)弱阳性。DSA阳性患者移植后粒系植入中位时间较DSA阴性患者明显延迟(P=0.027)。植入失败(graft failure, GF)患者6例,DSA阳性4例(26.7%),明显高于DSA阴性(P=0.025)。多因素分析结果显示,DSA是发生GF的独立影响因素(HR=9.273, 95%CI=1.505~57.124,P=0.016)。10例DSA中度和强阳性患者进行去敏治疗,4例采用联合去敏治疗,患者均成功植入(100.0%),6例采用单一去敏治疗,有4例(66.7%)发生GF,联合去敏治疗的GF发生率显著低于单一去敏治疗(P=0.008)。结论 DSA是导致haplo-HSCT患者植入延迟和GF的重要因素,对DSA中度及强阳性患者的单一去敏治疗效果有限,而多联合的去敏治疗时,动态监测抗体滴度水平下降,可保证干细胞的成功植入,降低GF发生。

双重膜滤过式血浆置换联合脱敏治疗单倍体相合造血干细胞移植供者特异性抗体的临床研究

目的探讨分析双重膜滤过式血浆置换(double filtration plasmapheresis,DFPP)联合脱敏治疗单倍体相合造血干细胞移植供者特异性抗体(donor specific antibody,DSA)的疗效。方法采用DFPP联合丙种免疫球蛋白(intravenous immunoglobulin,IVIG)、利妥昔单抗脱敏治疗DSA阳性患者,检测移植前后DSA水平,主要评估分析其植入情况。结果8例DSA性患者7例获得供者细胞稳定植入,嵌合率均为100%,1例血小板植入不良。经过DFPP、IVIG、利妥昔单抗脱敏处理后为平均荧光强度(mean fluorescence intensity,MFI)(3911±2499),均明显降低,差异均有统计学意义(t=2.101,P<0.001),8例患者中有3例转为弱阳性。干细胞回输第3天复测MFI(907士997),较干细胞回输前再次减低,差异均有统计学意义(t=2.145,P=0.002)。8例患者仅1例发生重度急性移植物抗宿主病。结论双重膜滤过式血浆置换脱敏联合大剂量IVIG和利妥昔单抗,尽量输注高剂量的干细胞,可以降低DSA水平促进供者干细胞植入。

15例预存供者特异性抗体阳性肾移植的临床特征

目的:临床上预存供者特异性抗体(donor specific antibody,DSA)患者术后易发生抗体介导的排斥反应(antibody-mediated rejection,AMR),术后发生并发症和移植失败的风险相对较高。本研究旨在探讨DSA阳性肾移植临床治疗效果并分析术前预处理在DSA阳性肾移植中的作用与安全性,为临床DSA阳性肾移植提供单中心治疗经验。方法:回顾性分析郑州大学第一附属医院肾移植科的15例DSA阳性肾移植患者的临床资料,8例为公民逝世后器官捐献来源(organ donation after citizen’s death,DCD)肾移植受者,其中3例在术前未作脱敏治疗(DCD未处理组,n=3),5例受者在术前使用利妥昔单抗作脱敏治疗(DCD预处理组,n=5);其余7例为亲属活体供者(living related donors,LRD)肾移植受者,术前接受利妥昔单抗和血浆置换脱敏治疗(LRD预处理组,n=7)。收集受者肾功能,DSA水平变化,并发症发生情况,术后1年、3年及5年受者和移植肾存活情况等,并比较3组患者的恢复情况与术后并发症的差异。结果:15例受者术前群体反应性抗体(panel reactive antibody,PRA)与DSA均为阳性,均使用甲强龙+兔抗人胸腺细胞免疫球蛋白诱导治疗后行肾移植术。DCD未处理组术后均发生DSA水平反弹、移植肾功能延迟恢复(delayed renal graft function,DGF)与排斥反应,通过联合治疗后患者的DSA水平降低,移植肾功能恢复正常;DCD预处理组均未发生抗体反弹,1例受者出现DGF,接受血浆置换治疗后肾功能恢复正常,余4例受者均于术后2周内肾功能恢复至正常;LRD预处理组中2例发生DSA水平反弹,1例出现排斥反应,经治疗后移植肾功能均恢复至正常,DSA维持在低水平。DCD未处理组患者DGF、排斥反应的发生率高于DCD预处理组和LRD预处理组;术后血尿、蛋白尿、细菌真菌感染发生率及BK病毒感染率的差异均无统计学意义(均P>0.05)。在15例受者中,11例随访1年以上,6例3年以上,1例5年以上,受者和移植肾存活率均为100%。结论:经过有效的术前预处理进行脱敏治疗能够有效预防DSA阳性肾移植抗体反弹,减少围手术期并发症的发生。

供者特异性HLA抗体结合Clq与移植肾抗体介导排斥反应相关性分析

目的供者特异性HLA抗体（DSA）介导的排斥反应是导致慢性移植肾功能丧失的重要因素，补体的激活在抗体介导的排斥反应中起着关键作用。本研究旨在分析Clq结合型新生DSA与肾移植术后抗体介导排斥反应的相关性。方法2014年2月至2015年5月，随诊的肾移植受者经筛查、确认后，有51例受者术后有新生DSA。检测DSA及其结合Clq的能力，同时进行移植肾穿刺病理检查。分析DSA特异性、平均荧光强度（MFI）、DSA结合Clq的情况及移植肾管周毛细血管CAd沉积和组织病理表现，评估Clq结合型DSA与抗体介导排斥反应的相关性。结果51例受者中每例产生新生供者特异性抗体（dnDSA）的数目为1～4个，多数为HLA-Ⅱ类抗体，抗体MFI值为（11240±5211），MFI范围为1323～23817，病理诊断为抗体介导的排斥反应45例（88．2％，45／51）。根据DSA的Clq结合检测结果，51例受者被分为两个组，Clq阳性DSA组与Clq阴性DSA组。Clq阳性DSA组中抗体介导排斥反应的发生率为96．4％，显著高于Clq阴性DSA组（78．3％），两组差异具有统计学意义（P〈0．05）。Clq阳性DSA组移植肾微血管炎和小管间质炎的发生率分别为96．4％、64．3％，分别显著高于Clq阴性DSA组（78．3％、39．1％），差异具有统计学意义（P〈0．05）。Clq阳性DSA组移植肾管周毛细血管CAd沉积的阳性率为78．6％，与Clq阴性DSA组的阳性率（47．8％）相比，差异有统计学意义（P〈0．05）。两组的dnDSA-MFI值、移植肾功能及尿蛋白定量均无显著差异。结论Clq结合型DSA与肾移植术后抗体介导的排斥反应有较强的相关性，DSA结合Clq的检测无创伤，敏感性高，便于临床开展。

供者特异性HLA抗体阳性单倍体造血干细胞移植5例并文献复习

目的探讨人类白细胞抗原(HLA)供者特异性抗体(DSA)对异基因造血干细胞移植(allo-HSCT)的影响及脱敏处理方法。方法收集2019年1月1日—2020年6月1日于郑州大学第一附属医院行allo-HSCT的5例DSA阳性患者临床资料,于移植前采取血浆置换、静注人免疫球蛋白、利妥昔单抗/硼替佐米等脱敏措施并动态监测DSA滴度水平。分析其植入和移植物抗宿主病(GVHD)的发生并评估脱敏方案的效果。结果例1急性髓系白血病(AML)植入失败,例4重型再生障碍性贫血(SAA)植入不良。余3例均植入成功,但均发生不同程度的GVHD。例2 AML移植后复查HLA抗体持续阳性,且同时存在急性GVHD(aGVHD)和慢性GVHD(cGVHD),经多种抗排异药物联合治疗病情仍反复,于移植后9个月发生重度cGVHD,先后经激素冲击、巴利昔单抗、伊布替尼、西罗莫司、他克莫司等治疗仍无效。例3 SAA移植后复查HLA抗体持续转阴,在移植后2个月时发生皮肤IV度aGVHD,经输注间充质干细胞、激素联合巴利昔单抗治疗好转并随访至今。例5骨髓增生异常综合征(MDS)于移植后第18天出现肠道II度aGVHD,输注间充质干细胞、激素联合巴利昔单抗、芦可替尼治疗效果不佳。结论DSA阳性是导致植入失败/植入不良的重要因素,移植后抗体的持续存在可能增加GVHD发生率。脱敏处理应采取从多种不同机制联合的方式进行,单一脱敏处理的作用可能是短暂且有限的。

供者特异性HLA抗体对单倍体相合造血干细胞植入的影响

目的探讨单倍体相合造血干细胞移植中HLA供者特异性抗体（DSA）对干细胞植入的影响以及处理方法。 方法采用免疫磁珠液相芯片技术，对2016年6月至2017年5月拟行单倍体相合造血干细胞移植患者进行HLA抗体及DSA的检测，对已完成移植患者进行DSA与植入失败相关性分析，检测移植前后DSA水平，探索针对DSA的处理方法。 结果共检测了92例拟行单倍体相合造血干细胞移植患者的HLA抗体，其中16例（17.4%）存在HLA抗体，6例（6.5%）DSA阳性。在常规清髓性预处理单倍体相合移植中，26例DSA阴性患者中有24例成功植入，仅有2例发生植入失败，而采用常规预处理的4例DSA阳性患者中仅有1例成功植入，其余3例发生植入失败，二组患者植入率差异有统计学意义[92.3%（24/26）对25.0%（1/4），χ2=8.433，P=0.004]。多因素分析显示，DSA是影响供者干细胞植入的唯一因素[OR=12.0（95% CI 1.39~103.5），P=0.024]。6例DSA阳性的患者中，4例次在移植时采取了针对DSA的措施，均获得供者干细胞顺利植入，其中3例HLA-Ⅰ类DSA阳性患者（首次移植2例、二次移植1例）在输入供者干细胞之前输入供者血小板，另1例HLA-Ⅰ、HLA-Ⅱ类DSA并存患者在二次移植时更换供者并给予全身放疗、利妥昔单抗及供者血小板输注。 结论DSA是导致单倍体相合造血干细胞植入失败的关键因素，移植前应进行常规检查，DSA阳性患者应选用DSA阴性供者；无合适供者时，应采取适当措施降低DSA水平以促进干细胞植入。

肾移植受者术前HLA特异性抗体筛查(附3500例报告)

目的:预致敏的人白细胞抗原特异性抗体(HLA)是抗体介导排斥反应的主要危险因素。本研究对肾移植受者术前进行HLA特异性抗体检测和分析,以评价其致敏状态。方法:1998年至2007年于我院等待肾移植的受者共3500名。2000年3月前694名受者采用补体依赖微量细胞毒性试验(CDC)进行群体反应性抗体(PRA)检测,之后2806名受者改为用酶联免疫吸附实验(ELISA)检测。对致敏受者HLA抗体多样性和特异性,以及致敏相关因素进行分析。结果:CDC方法仅能检出抗HLAⅠ类IgG抗体,而ELISA可检出抗HLAⅠ类和Ⅱ类抗体。CDC方法所检出的病人血清PRA阳性率比ELISA方法检出的阳性率低。而且,ELISA能分别检出抗HLA-A、B、CW、DR和DQ抗原的抗体20种、37种、8种、14种和7种。抗HLA-A2、24、68、23、32;B27、56、57、7;DR7、4、9、13、17、12;CW1、2、6、4、8等位基因产物的抗体频率较高。这些抗HLA抗体与华南地区人群HLA抗原分布不尽一致。不同性别PRA阳性率存在显著性差异,男性以输血致敏为主,女性以输血、妊娠致敏为主。结论:采用ELISA方法能较为准确地检出抗HLA特异性抗体。避免供受者间常见高频抗体相应的HLA位点的错配和减少输血是减少抗HLA抗体的产生,以提高移植物存活的有效手段。

血小板特异性糖蛋白(GPⅡb/Ⅲa)及HLA-Ⅰ类混合抗体引起血小板输注无效的检测

目的探讨血小板混合抗体引起的血小板输注无效(PTR)的检测方法。方法提取1名骨髓增生异常综合征PTR患者的DNA 200μL,通过PCR-SSP方法做血小板特异性抗原(HPA)和人类白细胞抗原(HLA)基因分型,以ELISA法检测患者血浆中的血小板特异性糖蛋白(GPⅡb/Ⅲa)和HLA抗体,用Luminex试剂盒检测HLA-Ⅰ类抗体特异性,以MAIPA法鉴定HPA抗体特异性。结果患者HPA基因型为1aa、2ab、3bb、4aa、5aa、6aa、9aa和15bb;HLA-Ⅰ类抗原为HLA-A*02、A*33,HLA-B*46、B*58;从患者血浆中检出GPⅡb/Ⅲa及HLA-Ⅰ类抗体。该患者的PTR是由GPⅡb/Ⅲa及HLA-Ⅰ类混合抗体引起。结论对于反复输血的患者,输注ABO、Rh(D)同型、HLA和HPA交叉配型相合的相容性血小板,可有效减少PTR的发生。

抗供者特异性抗体对致敏肾移植受者的临床意义

背景:应用灵敏的技术可以检测到致敏肾移植患者体内低水平抗体,但是即便如此临床上依然无法完全检测出全部抗体。目的:探讨抗供者特异性抗体对致敏肾移植受者的临床意义及其在预测排斥反应中的作用。方法:肾移植术前常规检测补体依赖淋巴细胞毒试验和群体反应性抗体,群体反应性抗体阳性者(PRA≥10%)检测抗供者特异性抗体,其术后临床结果与抗供者特异性抗体阴性患者做比较。结果与结论:在379例接受肾移植的患者中,55例患者的群体反应性抗体≥10%,这些患者中75%曾有过致敏史。其中20例检测出抗供者特异性抗体,这些阳性患者肾移植术后更易发生急性排斥反应,移植肾功能恢复延迟和移植肾存活率低下等。结果提示抗供者特异性抗体的存在与移植物失功、排斥反应有显著相关性。而体内仅存非抗供者特异性抗体的患者移植效果相对好。对于淋巴细胞毒试验阴性但体内抗供者特异性抗体阳性的肾移植患者,术后需要更积极地监测免疫功能和调整免疫抑制方案。

肾移植术前供者特异性抗体强度对术后的体液排斥反应和移植物功能的影响

目的:研究肾移植受者的术前供者特异性抗体(donor specific antibody,DSA)与其术后发生抗体介导的体液排斥反应(antibody-mediated rejection,AMR)及移植肾功能的关系。方法:选取符合要求的肾移植受者88例。术前采用Luminex流式法对肾移植受者进行DSA检测,并将受者分为DSA阳性组(n=20)与DSA阴性组(n=68)。随访时间为2年。术后参照Banff 2005标准对移植肾病理形态进行评估分级,并观察移植肾的情况。结果:DSA阳性组与阴性组AMR发生率分别为20.0%和1.5%,移植物丢失发生率分别为15.0%和1.5%,两组比较差异均有统计学意义(分别P<0.01,P<0.05);AMR受者最高DSA的荧光指数中值(mean fluorescence intensity,MFI)较非AMR受者差异明显(P<0.01);受试者工作特征(receiver operating characteristic,ROC)曲线显示肾移植术后受者发展为AMR的最高MFI阈值为7909.5。两组移植肾功能延迟回复的发生相比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:肾移植术前检测DSA水平,可以预测AMR的发生风险和移植肾功能状态。最高DSA值的MFI截点(7909.5)能够预测AMR发生的风险。

抗供者特异性抗体与肾移植后的急性排斥反应

目的:大部分肾移植失败的患者体内都存在抗HLA抗体。检测抗供者特异性HLA抗体在肾移植受者体内的表达,并分析其在预测排斥反应中的作用。方法:2006-10/2008-03郑州人民医院器官移植科采用酶联免疫吸附法检测179例肾移植受者血清中的抗供者特异性HLA抗体以及群体反应性抗体水平,群体反应性抗体>10%为阳性,群体反应性抗体阳性受者即致敏受者。检测移植后2个月内早期急性排斥反应的发生率,统计分析群体反应性抗体及抗供者特异性HLA抗体与移植后早期急性排斥反应的关系。结果:肾移植前血清抗供者特异性HLA抗体阳性50例受者的急性排斥反应率发生率为66%,移植前血清群体反应性抗体阳性56例受者的发生率为25%,两者比较差异具有显著性意义(P<0.01),抗供者特异性HLA抗体水平与急性排斥反应的发生具有更强的相关性。移植前血清抗供者特异性HLA抗体阳性受者的急性排斥反应发生率显著高于抗供者特异性HLA抗体阴性受者(66%,11%,P<0.01)。体内含抗HLA-Ⅱ类抗体受者的急性排斥反应发生率显著高于含HLA-Ⅰ类抗体的受者(78.1%,43.8%,P<0.05)。结论:抗供者特异性HLA抗体是肾移植前筛选致敏受者的重要指标,抗供者特异性HLA抗体阳性患者移植后更容易发生急性排斥反应。

血小板特异性糖蛋白抗体和HLA抗体在特发性血小板减少性紫癜的表达

本研究旨在探讨特发性血小板减少性紫癜(ITP)中血小板特异性糖蛋白抗体和HLA抗体的表达。选择45例ITP患者,运用ELISA方法检测患者的血浆和血小板洗脱物血小板特异性糖蛋白抗体和HLA抗体。使用HPA分型试剂盒检测7个抗原系统HPA-1、2、3、4、5、6、15。结果表明,有45例患者检测到血清或者血小板洗脱物中存在血小板特异性糖蛋白抗体,其中以抗GPⅡb/Ⅲa/HIa和抗GpⅠb/Ⅸ最为常见;有11例患者同时表达HLA抗体和血小板特异性糖蛋白抗体。对病例37和40进行家系调查,发现这些病例所产生的血小板特异性糖蛋白抗体和HLA抗体与父母血小板抗原及HLA抗原不相合密切相关。结论:应用ELISA检测ITP病例的血浆和血小板洗脱物,并与病人的临床表现相结合,对提高ITP的诊断具有重要价值。

重视组织配型和供者特异性抗体监测在肾移植中的重要作用

近50年来，随着医学科学技术的飞速发展，器官移植已经成为治疗终末期器官功能衰竭最为有效的方法。据全球521个移植中心的资料统计，至2008年累计共施行肾移植数量达到84万例。截止至2009年底，我国肾移植数量累积达10．1万余例。随着组织配型、器官保存、新型高效低毒免疫抑制剂、移植肾病理活组织检查、移植后感染防治等方面的巨大进步，肾移植已经成为治疗慢性肾衰竭的首选手段。

群体反应性抗体与供者特异性抗体在肾移植患者中的比较研究

目的研究供者特异性抗体(DSA)与群体反应性抗体(PRA)检测在肾移植患者中的应用价值。方法选择了2007年10月至2009年12月间接受肾移植的128例患者。PRA检测采用美国One lambda公司和美国GTI公司提供的ELISA筛选HLA-I类I、I类混合抗原板。DSA检测使用Micro-AMS HLA-I&II DSA检测试剂盒。结果 128例肾移植患者有13例在术前、术后排斥及恢复期的3个时间点的PRA和DSA呈现不同程度的阳性结果。在128例肾移植患者有10例为再次肾移植患者,其中有9例在术前、术后排斥及恢复期的3个时间点中呈现不同程度的PRA和DSA阳性结果。而初次肾移植患者为118例,仅有4例在术前、术后排斥及恢复3个时间点的PRA和DSA呈现不同程度的阳性结果。结论DSA和PRA检测在肾移植抗体检测中具有同等重要意义。

实体器官移植失败患者HLA和HPA抗体筛查及特异性分析

目的了解广州地区实体器官移植失败患者中HLA抗体和HPA抗体的分布和特异性,初步探索HLA抗体及HPA抗体与实体器官免疫性排斥反应的相关性。方法随机收集广州地区实体器官移植失败患者标本136例,利用Lifecodes Life Screen Deluxe(LMX)筛查标本的HLA抗体,阳性者再分别利用LIFECODES LSATMClassⅠ和LIFECODES LSATMClassⅡ(Single Antigen)鉴定抗体特异性;利用Lifecodes PAKR 2LE对HPA抗体进行筛查,阳性标本利用MAIPA进行最终确证。结果广州地区136例实体器官移植失败患者中,抗-HLA阳性率55.15%(75/136),其中HLA-Ⅰ类抗体出现频率为38.97%(53/136),HLA-Ⅱ类抗体出现频率为42.65%(58/136)。HLA-Ⅰ类抗体中出现频率较高的分别是抗-A~*02 35.85%(19/53)、抗-B~*15 47.17%(25/53)和抗-Cw~*07 28.30%(15/53),HLA-Ⅱ类抗体出现频率最高者是抗-DRB1~*04 39.66%(23/58)和抗-DQB1~*03 46.55%(27/58)。此外,检出HPA-5bb抗体一例。结论初步探讨了广州地区实体器官移植失败患者HLA抗体及HPA抗体的分布情况,证实HLA抗体与移植后的免疫排斥反应密切相关。

抗γc单克隆抗体联合供者特异性输注延长移植物存活

目的探讨抗γ公共链单克隆抗体(抗γc单抗)联合供者脾细胞特异性输注(DST)诱导移植物长期存活的可行性及相关机制。方法建立小鼠颈部异位心脏移植模型,组Ⅰ为单纯实施心脏移植组,组Ⅱ于移植前给予DST,组Ⅲ术前予DST联合抗γc单克隆抗体处理,术后观察移植物的存活时间及相关指标。结果组Ⅲ心脏移植物平均存活时间明显长于组Ⅰ及组Ⅱ(P<0.05)。FACS分析显示组Ⅲ受者脾细胞中Tr比例较组Ⅰ及组Ⅱ显著增高(P<0.05),同时脾细胞增殖活性明显减低(P<0.05)。结论抗γ公共链单克隆抗体联合DST通过增加供者体内Tr的比例,减低对同种抗原的应答能力,显著延长同种心脏移植模型中移植物存活时间。

供者特异性抗体对肾移植术后患者急性排斥和肾功能的影响研究

目的研究抗供者特异性抗体(DSA)对移植肾急性排斥反应和近期肾功能的影响。方法采用MicroAMS HLA-I&II供者特异性抗体检测试剂盒检测96例肾移植患者术后排斥及恢复期2个时间点的DSA,同时检测移植肾功能。结果①96例肾移植患者有8例肾移植术后出现DSA,占8.33%(8/96)。②8例DSA阳性患者6例发生急性排斥反应,其中5例为抗HLA-I类抗体,1例为抗HLA-II类抗体;未发生急性排斥反应的2例为抗HLA-II类抗体。移植肾功能恢复时,仍有2例DSA-I类弱阳性。③DSA阳性对肾移植术后排斥和肾功能均有影响。结论 DSA是预测肾移植术后发生急性排斥反应的有效方法之一。

儿童肾移植术后供者特异性抗体的产生及其影响

近年来,我国儿童肾移植发展迅速,但仍缺乏足够的有关移植肾长期存活方面的临床数据。成人肾移植术后新生供者特异性抗体(dnDSA)的产生及其介导的慢性排斥反应是影响移植肾长期存活的重要危险因素,但儿童的免疫系统发育尚未完全,其术后dnDSA的产生及其对移植肾和受者的影响可能与成人有所不同。因此,本文就儿童免疫系统的特点、儿童肾移植术后供者特异性抗体(DSA)的产生及影响、儿童肾移植术后DSA产生的危险因素进行总结,并对预防策略提出建议,旨在为提高儿童肾移植术后移植肾的长期存活提供参考,促进我国儿童肾移植的发展。

供者特异性抗体在异基因造血干细胞移植中的研究进展

胞在allo-HSCT中较为常见。部分患者移植前或移植后存在供者特异性抗体,此类抗体可能引起植入失败和造血恢复延迟等移植并发症,影响患者的移植效果。识别供者特异性抗体的高危人群并对高危人群进行抗体检测,对于抗体阳性的患者进行及时的干预对于改善HLA不全相合造血干细胞移植的效果有重要意义。本文就供者特异性抗体流行病学、风险因素、供者特异性抗体对于非亲缘供者及单倍体相合HSC供者的allo-HSCT的影响、供者源的抗HLA抗体对于移植的影响以及供者特异性抗体的脱敏治疗做一综述。