关注脐血移植后发生供者细胞来源的白血病

复习了最近报道的脐血移植后供者细胞白血病和相关文献,并就其发生机制和脐血保存等问题作了讨论。鉴于存在胚胎来源白血病细胞的可能性,建议较系统地监测脐血移植后白血病复发的病例,以确定供者细胞来源白血病的频率和是否真正存在白血病前体细胞的输注。

父母供者外周血单倍体干细胞移植治疗儿童复发难治急性白血病

背景:儿童复发难治急性白血病单纯化学治疗效果极差,异基因造血干细胞移植是治愈该类疾病的惟一有效方法。研究显示单倍体移植与同胞相合及非亲缘全相合造血干细胞移植的治疗效果接近,甚至优于后者,且父母作为供者单倍体造血干细胞移植依从性好,能够保证移植干细胞数量及预防原发病复发,明显提高了患者移植成功率及长期无白血病生存率。目的:回顾分析父母供者单倍体外周血造血干细胞移植治疗儿童复发难治急性白血病的疗效。方法:入选35例父母供者外周血单倍体造血干细胞移植治疗儿童复发难治急性白血病。均采用"改良1,4-丁二醇二甲磺酸酯/环磷酰胺+胸腺细胞免疫球蛋白"预处理方案和环孢素、吗替麦考酚酯及甲氨蝶呤三联短程预防移植物抗宿主病。结果与结论:35例父母供者外周血单倍体造血干细胞移植治疗儿童复发难治急性白血病均植入成功。135例患儿回输单个核细胞中位数为5.82(3.23-8.45)×108/kg,其中CD34+细胞中位数为4.52(2.37-11.51)×106/kg。2干细胞回输后100 d内,移植相关死亡率为14.3%。33-Ⅱ度急性移植物抗宿主病发生率为34.3%,Ⅲ-Ⅳ度急性移植物抗宿主病发生率为37.1%,慢性移植物抗宿主病总发生率为42.9%。42年无白血病生存率为42.9%,2年总生存率为51.4%,2年原发病复发率为34.3%,中位生存时间为24个月。提示对于无人类白细胞抗原相合同胞供者及不能及时寻找到非血缘人类白细胞抗原相合供者的儿童复发难治急性白血病,父母供者外周血单倍体造血干细胞移植是一种高效可行的治疗方法。

混合造血干细胞移植后输注供者淋巴细胞和白细胞介素2对急性髓性白血病疗效的影响

目的:观察急性髓性白血病经混合造血干细胞移植后,应用供者淋巴细胞输注+白细胞介素2治疗的效果,并与移植后未经特殊治疗的效果进行比较。方法:①选取2000-01/2004-07解放军兰州军区兰州总医院全军血液病中心收治的19例急性髓性白血病患者,实验经医院伦理委员会批准,患者均知情同意。随机数字表法分为两组:观察组8例,年龄17～40岁,M2a 4例,M4 1例,M5a 3例;对照组11例,年龄19～39岁,M2a 2例,M3a 2例,M4 3例,M5a 4例。②两组患者采用化疗联合重组人粒细胞集落刺激因子的方法动员自体外周血造血干细胞,采集后液氮中保存5d备用。③术前采用直线加速器对患者全身及肺部照射,预处理完毕后实施混合造血干细胞移植。首先回输自体单个核细胞中位数为4×108/kg,CD34+细胞中位数为6.2×106/kg,粒-巨噬祖细胞集落形成单位中位数为5.8×104/kg。间隔1～6h后,采集人类白细胞抗原半相合异体骨髓,按回输自体单个核细胞数的1/6～1/10输注给患者。④两组患者移植期间均住无菌层流病房,给予相应并发症的防治及支持治疗。在粒细胞降至0时注射重组人粒细胞集落刺激因子150μg/12h,促进造血恢复。观察组给予供者淋巴细胞输注+白细胞介素2治疗,每次采集的供者淋巴细胞中,CD3+淋巴细胞中位数为1.43×108/kg,CD4+细胞中位数为0.97×108/kg,CD8+细胞中位数为0.41×108/kg,中位治疗次数4(1～7)次,回输后即开始应用100wu/d重组人白细胞介素2,共10d。对照组混合造血干细胞移植后未给予特殊治疗。结果:19例急性髓性白血病患者均进入结果分析。①造血恢复:两组患者均获得造血重建,术后4～9d粒细胞均降至0,12～17d粒细胞达0.5×109L-1,16～21d白细胞达4.0×108 L-1,19～23 d血小板达20×108 L-1。16～21 d骨髓检查示恢复期骨髓象。②术后并发症:两组患者不同程度地出现口腔溃疡,随着造血恢复,7～10d溃疡消失。观察组1例患者出现出血性膀胱炎,两组各2例患者出现发热。无肝静脉闭塞病和移植物抗宿主病发生。③嵌合体形成:观察组中1例M4患者形成嵌合体,对照组中2例M4患者与1例M5患者形成嵌合体,嵌合体持续存在3～12个月。④供者淋巴细胞输注+白细胞介素2疗效:观察组中有1例M2a患者在接受2次特殊治疗后7个月复发死亡;1例M2a患者接受2次特殊治疗后1年出现骨髓增生异常综合征,脑出血死亡,1例M5a患者应用特殊治疗1次后出现不明原因高热、抽搐,死于癫痫持续状态,其余5例患者随访2年均健康存活,长期生存率为62.5%(5/8)。对照组有2例M2a患者、2例M4患者、1例M5患者于移植后1～7个月复发死亡,1例M3患者于移植后25d死于脑出血,其余2例M3患者、2例M4患者、1例M5患者随访2年均健康存活,长期生存率为45.4%(5/11)。结论:混合造血干细胞移植后应用供者淋巴细胞输注+白细胞介素2治疗,急性髓性白血病患者均获得造血重建且无移植物抗宿主病发生,其长期生存率有效提高。

无血缘关系供者异基因外周血干细胞移植治疗急、慢性白血病49例

目的观察无血缘关系供者外周血干细胞移植治疗急、慢性白血病的疗效。方法自2005年1月至2009年10月本科行无血缘关系供者造血干细胞移植治疗急、慢性白血病患者49例,供、受者之间人类白细胞抗原（HLA）配型全相合43例,HLA1个位点不合6例（其中,A位点不合2例,B位点不合1例,CW位点不合2例,DQ位点不合1例）。预处理方案环磷酰胺（CY）＋全身放疗（TBI）方案28例、BU/CY方案21例。采用环孢菌素A（CSA）＋骁悉＋甲氨喋呤（MTX）＋抗胸腺细胞球蛋白（ATG）预防性控制移植物抗宿主病。结果移植后10~23 d（中位时间14.8 d）中性粒细胞大于0.5×109/L;移植后13~27 d（中位时间18.6 d）,血小板大于20×109/L。14例（HLA1个位点不合者2例）发生Ⅱ度急性移植物抗宿主病（aGVHD）,予甲强龙治疗后控制,28例发生慢性移植物抗宿主病（cGVHD）,局限型14例,广泛型14例;无1例发生肝静脉闭塞病（VOD）及巨细胞病毒感染;移植相关毒副作用方面CY＋TBI方案与BU/CY方案差异无统计学意义;随访5~63个月,41例患者无病生存,8例死于本病复发和移植并发症;21例慢性粒细胞白血病bcr/abl融合基因检测转阴。结论无血缘关系供者外周血干细胞移植是一种有效的血液肿瘤治疗方法 。

同一供者外周血单个核细胞输注治疗单倍相合骨髓移植后白血病复发

本研究探讨同一供者外周血单个核细胞输注(DMNCI)治疗单倍相合骨髓移植后白血病复发的疗效和安全性。3例单倍相合骨髓移植后白血病复发患者接受G-CSF动员的DMNCI治疗,其中例1和例2骨髓移植前分别为ph+急性淋巴细胞性白血病伴中枢神经系统侵犯部分缓解及慢性粒细胞性白血病急性变部分缓解,在骨髓移植后这两例均血液学复发,各接受单次DMNCI,单个核细胞剂量分别为8.25×108/kg和5.24×108/kg;CD3+细胞剂量分别为1.87×108/kg和1.14×108/kg。第3例骨髓移植前为CML急性变,治疗后并达缓解。移植后分子水平复发,接受逐渐提高单次细胞数量的分次输注,首次DMNCI剂量为2.0×107/kg,CD3+细胞剂量为1.1×107/kg。同时观察3例患者输注后白血病缓解情况及并发症。结果显示,3例患者均出现不同疗效,2例血液学复发患者骨髓均暂时缓解,但分别于DMNCI后41、48天死于严重移植物抗宿主病(GVHD)、复发及衰竭。分子水平复发患者分次接受DMNCI,输注2次后达分子水平缓解,STR-PCR测定证实为供者基因型。3例均发生急性GVHD,2例接受单次剂量输注者发生Ⅳ度以上GVHD,1例接受分次输注患者发生Ⅰ度GVHD。3例均未发生明显骨髓抑制,分子水平缓解者随访半年无病生存。结论:DMNCI可能具有抗白血病作用,可用于单倍相合骨髓移植后白血病复发的治疗,对分子水平复发者的疗效较对血液学复发者好;输注MNC为×108/kg后GVHD严重。DMNCI起始剂量×107/kg并逐渐提高单次剂量的分次输注方法更为安全。

G-CSF动员供者外周血单个核细胞输注治疗异基因造血干细胞移植后复发白血病的临床研究

目的 观察重组人粒细胞集落刺激因子（G-CSF）动员的供者外周血单个核细胞输注治疗异基因造血干细胞移植后,白血病复发的有效性及安全性.方法 对2009年7月至2011年2月该科20例异基因造血干细胞移植后复发的白血病患者,予以输注G-CSF动员后供者外周血单个核细胞.其中5例急性淋巴细胞白血病-CR2,8例急性髓系白血病-CR2,2例急性髓系白血病-CR3,3例急性混合细胞白血病,2例加速期慢性髓系白血病.在异基因造血干细胞移植后,半年内,20例患者均复发,予G-CSF动员后,供者外周血单个核细胞输注,每次输注细胞量按1×105/kg、2×105/kg、4×105/kg逐级增加,每次输注间隔4周.结果 12例患者再次完全缓解,8例患者未缓解.输注后,3例患者发生了Ⅰ～Ⅱ度急性移植物抗宿主病,12例患者发生了慢性移植物抗宿主病,5例未发生并发症,未观察到输注相关的全血细胞减少.结论 G-CSF动员供者外周血单个核细胞输注治疗异基因造血干细胞移植后,白血病复发有较好的疗效,不良反应小,值得临床进一步推广.

G-CSF预处理供者的HLA相合同胞异基因骨髓移植治疗慢性粒细胞白血病研究(英文)

为了评价供者应用G-CSF的骨髓移植治疗慢性粒细胞白血病的临床疗效,用HLA相合的、混合淋巴细胞培养阴性的同胞供者骨髓,对单一病种慢性粒细胞白血病行移植治疗.供者应用G-CSF 250微克/天,连用7天后供髓的32例为研究组,对照组18例常规采髓移植,在预处理方案,GVHD预防和支持治疗方法相同的情况下,比较研究组和对照组移植后在加速造血重建,降低GVHD发生和延长无病生存的疗效.移植结果显示,供者应用G-CSF在慢性粒细胞白血病移植中造血重建加速,中性粒细胞＞0.5×109/L和血小板＞20×109/L的中位天数分别是第15(10-22)天和第17.5(13-28)天,对照组是第21和24天(P＜0.01),研究组发生急性Ⅱ-Ⅳ度GVHD2例(6.3%),对照组5例(27.8%),通过比较,两组差异有显著性(P＜0.05),慢性GVHD发生分别是24%和33.3%(P＞0.05).研究组移植相关死亡、复发和无病生存与对照组比较无统计学差异(P＞0.05).结论:使用G-CSF动员供者的HLA相合的异基因骨髓移植,造血重建加快和重度急性Ⅱ-Ⅳ度GVHD减轻,有可能提高CML移植的无病生存率.

供者干细胞输注治疗慢性髓性白血病异基因造血干细胞移植后的复发——1例报告及文献复习

目的:探索异基因造血干细胞移植(Allo-HSCT)后白血病复发的供者干细胞输注治疗方法,提高Allo-HSCT的疗效。方法:慢性髓性白血病-慢性期(CML-CP)患者1例,采用改良的白消安/环磷酰胺(BU/CY)方案预处理。回输HLA配型相合的胞兄的外周血干细胞,单个核细胞(MNC)3.42×108/kg,CD34+细胞3.82×106/kg。移植物抗宿主病(GVHD)的预防采用环胞素A(CsA)联合短疗程甲氨蝶呤(MTX)方案,移植后6个月停用CsA。+192d细胞遗传学复发,给予未经动员的供者淋巴细胞输注(DLI),细胞剂量为1.8×107MNC/kg。+458d血液学复发,给予联合化疗加经粒细胞集落刺激因子(G-CSF)动员的供者干细胞输注(DSI),细胞剂量为4.68×108MNC/kg。结果:移植后+13d白细胞植活,+16d血小板植活,+20d短串联重复序列(STR-PCR)检测显示为完全供者的基因型,同时Ph染色体及bcl/abl融合基因转为阴性。于+182d发生了肝脏及皮肤的慢性移植物抗宿主病(cGVHD),未使用免疫抑制剂的情况下,cGVHD逐渐消失。+192d细胞遗传学复发予DLI后完全缓解(CR)。+458d血液学复发,予联合化疗加DSI后再次达CR。随访至今,患者于Allo-HSCT后567d,DSI后79d仍无病存活。结论:DLI≤0.2×108MNC/kg是安全有效的。在血液学水平复发的患者,单用化疗或DLI疗效有限,联合化疗加DSI可使疗效提高,且无明显的并发症发生。

G-CSF动员的供者淋巴细胞输注治疗异基因造血干细胞移植后慢性髓细胞白血病复发

目的探索G-CSF动员的供者淋巴细胞输注治疗异基因造血干细胞移植(allo-HSCT)后白血病复发的方法。方法慢性髓细胞白血病慢性期(CML-CP)患者1例,白消安/环磷酰胺(Bu/Cy)方案预处理,供受者为同胞间HLA6/6相合,回输外周血干细胞,单个核细胞8.69×108/kg,CD34+细胞6.69×106/kg。急性移植物抗宿主病(GVHD)的预防采用骁悉(MMF)、环胞素A(CsA)联合短疗程甲氨蝶呤(MTX)方案。移植后125天,分子生物学复发。先后给予3次未经动员的供者淋巴细胞输注(DLI),细胞剂量分别为1×107/kg、1.5×107/kg和1.5×107/kg。移植后307天,给予G-CSF动员的DLI,MNC 8.69×108/kg。结果 ANC≥0.5×109/L的时间是移植后16天,PLT≥20×109/L的时间是移植后19天。移植后41天,FISH结果示Bcr/Abl融合基因阴性,XX染色体占59%,移植后125天分子生物学复发。3次DLI后患者Bcr/Abl融合基因逐渐下降,XX染色体的比例逐渐上升,但出现严重的全血细胞减少。在G-CSF动员的DLI联合CsA治疗后,患者造血恢复,完全供者型植入,没有出现GVHD的临床表现,并且达到了分子生物学完全缓解。结论 G-CSF动员的DLI和传统的较未经G-CSF刺激的DLI安全性高,且有较好的GVL效应。

无关供者外周血干细胞二次移植治疗幼年型慢性粒细胞白血病1例

患者，男，4岁7个月，因发热，全身皮疹、淋巴结肿大伴面色苍白于2004年4月入住我院。查体：体温39℃，全身皮肤散在陈旧性及新鲜红色丘疹、疱疹，颔下、耳后、腋下多个淋巴结肿大，咽峡部黏膜散在疱疹及溃疡，肝脏肋下3cm，脾脏肋下5cm。常规：血小板21×10^9／L，白细胞75．6×10^9／L，粒细胞80．7％，淋巴占9．2％，血红蛋白91g／L。

供者淋巴细胞回输对异基因造血干细胞移植后急性白血病复发的影响

异基因造血干细胞移植（Allo-HSCT）是治疗急性白血病的有效手段,但移植后复发是影响治疗成功的主要因素。根据国际外周血和骨髓移植登记研究中心的资料,1998—2002年间所进行自体移植患者死亡原因中复发占75%,而HLA相同同胞供体（MSD）移植和非血缘关系供体（MUD）移植后死亡原因中复发分别为38%和32%[1]。移植后复发的治疗困难，多在半年内死亡。

慢性髓性白血病细胞来源的树突状细胞大容量诱导及其功能的实验研究

目的 探索大容量诱导慢性髓性白血病 (CML)细胞来源的树突状细胞 (DCs)的适宜方法 ;研究CML DCs刺激自体T淋巴细胞增殖并分泌γ 干扰素 (IFN γ)的能力。方法 用CS 30 0 0 plus血细胞分离机采集初诊CML病人的外周血单个核细胞 (PBMNCs) ;单采的CML PBMNCS转入组织培养袋 ,加入重组人粒 巨细胞集落刺激因子 (rhGM CSF)和重组人白介素 4 (rhIL 4 ) ,培养诱导 7d ;在诱导前后 ,用流式细胞仪分别检测细胞表面HLA DR、CD1a、CD80和CD86的表达水平 ;用3 H TdR掺入法检测CML DCs和CML PBMNCs刺激自体和异体T细胞增殖的能力 ;用ELISA法检测在自体混合淋巴细胞培养 (MLR)时T细胞分泌的IFN γ浓度。结果 用血细胞分离机收集的CML PBMNCs ,在组织培养袋内经细胞因子培养诱导 ,HLA DR、CD1a、CD80、CD86的表达均有明显上调 ,细胞形态也表现典型的DC特征 ;CML DCs能显著刺激自体和异体T细胞增殖 ,而CML PBM NCs仅能刺激异体T细胞的增殖 ,刺激自体T细胞增殖的能力很弱 ;刺激自体T细胞增殖时分泌的IFN γ浓度 ,CML DCs组为 (877± 2 14 )pg/mL ;CML BPMNCs组仅为 (14± 1.7) pg/mL。 结论 单采的CML PBMNCs转入组织培养袋 ,加入rhGM CSF和rhIL 4 ,可收获大容量的CML DCs;CML DCs在体外具有显著刺激自体T细胞增殖?

无血缘关系供者异基因外周血干细胞移植治疗急、慢性白血病7例

目的观察无血缘关系供者外周血干细胞移植治疗急、慢性白血病的疗效。方法2005年1月~2006年10月本科行无血缘关系供者造血干细胞移植治疗急、慢性白血病患者7例,所有供受者之间HLA高分辨配型全相合。预处理方案:CY+TBI方案4例、BU/CY方案3例。采用环孢菌素A加骁悉加MTX加ATG(即复宁)预防性控制移植物抗宿主病。结果移植+9^+22d(中位时间+13.2d),中性粒细胞>0.5×109/L;+14^+27d(中位时间+17.5d),血小板>20×109/L。2例于移植+38d和+56d发生Ⅱ度急性移植物抗宿主病,予甲强龙治疗后控制,4例发生慢性移植物抗宿主病,局限型2例,广泛型2例;无1例发生VOD及巨细胞病毒感染;移植相关不良反应CY+TBI方案与BU/CY方案未见差异;随访5~27个月,6例患者无病生存,1例死于本病复发;3例慢性粒细胞白血病bcr/abl融合基因检测转阴。结论无血缘关系供者外周血干细胞移植是一种有效的血液肿瘤治疗方法。

供者淋巴细胞输注抗白血病作用研究进展

供者淋巴细胞输注 (DLI)是近年来兴起的骨髓移植 (BMT)后过继性免疫治疗的重要手段 ,这种异源性供者淋巴细胞可以介导受者体内一种重要的免疫攻击 ,即移植物抗白血病 (GVL)效应 ,以消除宿主体内残留的白血病细胞 ,为逆转或预防骨髓移植后白血病复发开辟了一条新的思路。

无关供者与同胞相合供者异基因造血干细胞移植对急性淋巴细胞白血病患儿疗效比较

目的对比分析无关供者(unrelated donor,URD)与同胞相合供者(type matching sibling donor,MSD)异基因造血干细胞移植(allpgeneic hematopoietic stem cell transplantation,allo-HSCT)对急性淋巴细胞白血病(acute lymphoblastic leukemia,ALL)患儿的临床疗效。方法选择2008年3月至2015年3月于本院行allo-HSCT治疗的ALL患儿58例为研究对象,根据供者来源将入选患儿分为URD组(24例)和MSD组(34例),比较两组患儿移植后造血重建情况、并发症发生率及随访生存情况。结果两组患儿造血重建率、血小板重建时间、中性粒细胞重建时间、移植后相关并发症[急性移植物抗宿主病、慢性移植物抗宿主病、肺部感染、巨细胞病毒感染、出血性膀胱炎、EB病毒感染]发生率、总生存率及无病生存率比较均无显著差异(P>0.05)。结论 URD allo-HSCT治疗儿童ALL的疗效与MSD allo-HSCT相当,可将其作为无同胞人类白细胞抗原匹配ALL患儿的治疗选择。

HLA不全相合非血缘供者脐血移植治疗儿童急性淋巴细胞白血病

目的 探讨HLA不全相合非亲缘供者脐血移植 (UCBT)治疗儿童急性淋巴细胞白血病及其移植相关并发症。方法 1例急性淋巴细胞白血病 (ALL)患儿进行HLA1个位点不合非亲缘供者的UCBT。预处理方案 :氟达拉滨 (Fludarabine) 30mg·kg-1·d-1× 5d ,环磷酰胺 (CTX) 6 0mg·kg-1·d-1× 2d ,马利兰 4mg·kg-1·d-1,抗胸腺球蛋白 (ATG兔抗 ) 3mg·kg-1·d-1× 3d。移植物抗宿主病 (GVHD)的预防采用环胞菌素 (CsA)加用骁悉 (MMF)和甲基强的松龙方案。移植有核细胞数 5 .2 4× 10 7/kg,CD34+细胞 2 .93× 10 5 /kg ,CFU GM0 .93× 10 5/kg。观察监测巨细胞病毒 (CMV)感染 ,更昔洛韦 (GCV)与磷甲酸钠联合应用。结果 移植后 2 8d造血重建 ,移植后 84d血型转为供者型 (B型 ) ,染色体检测转为供者 4 6XX ,移植后第 2 2d出现Ⅱ度急性GVHD。移植后第 2 2dDNA指纹图提示供者型。结论 UCBT造血重建快而稳定 ,移植相关并发症较少 ,急性GVHD严重程度较轻。HLA1个位点不合非亲缘供者的UCBT有效可行。